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《微生物學(xué)教程》,周德慶,高等教育出版社,1993
第1章 緒 論
1、教材:
2、參考書
(1)《微生物學(xué)教程》,周德慶,高等教育出版社,1993
3、參考雜志
“微生物學(xué)報”、 “微生物學(xué)通報”、“微生物學(xué)雜志”
二、微生物與我們
微生物既是人類的敵人,更是人類的朋友!
微生物是自然界物質(zhì)循環(huán)的關(guān)鍵環(huán)節(jié);
體內(nèi)的正常菌群是人及動物健康的基本保證;
幫助消化、提供必需的營養(yǎng)物質(zhì)、組成生理屏障;微生物可以為我們提供很多有用的物質(zhì);有機酸、酶、各種藥物、疫苗、面包、奶酪、啤酒、醬油等等
基因工程為代表的現(xiàn)代生物技術(shù);
少數(shù)微生物也是人類的敵人!
鼠疫;天花;艾滋病;瘋牛病;埃博拉病毒。
可以說,微生物與人類關(guān)系的重要性,你怎么強調(diào)都不過分,微生物是一把十分鋒利的雙刃劍,它們在給人類帶來巨大利益的同時也帶來“殘忍”的破壞。它給人類帶來的利益不僅是享受,而且實際上涉及到人類的生存。
三、微生物的發(fā)現(xiàn)和微生物學(xué)的建立與發(fā)展
(一)古代人民對微生物的認識
(二)微生物的發(fā)現(xiàn)(列文虎克):1676年,微生物學(xué)的先驅(qū)荷蘭人列文虎克(Antony van leeuwenhoek)首次觀察到了細菌。
(三)微生物學(xué)的奠基
1 法國人巴斯德(Louis Pasteur)(1822~1895)
(1) 發(fā)現(xiàn)并證實發(fā)酵是由微生物引起的;
(2) 徹底否定了“自然發(fā)生”學(xué)說:著名的曲頸瓶試驗無可辯駁地證實,空氣內(nèi)確實含有微生物,是它們引起有機質(zhì)的腐敗。
(3) 免疫學(xué)——預(yù)防接種:巴斯德研究了幾種對人類和牲畜危害很大的疾病,如雞瘟、牛羊炭疽病、人的狂犬病等,并發(fā)現(xiàn)引起這些病害的病原體,制成疫苗,用以預(yù)防和治療疾病,為免疫學(xué)奠定基礎(chǔ)。(挽救了許多人、畜生命)
(4)其他貢獻
巴斯德消毒法:60~65℃作短時間(15-20min)加熱處理,殺死有害微生物的方法。
2 德國人柯赫(Robert Koch)( 1843~1910)
(1)微生物學(xué)基本操作技術(shù)方面的貢獻
a)細菌純培養(yǎng)方法的建立;b)設(shè)計了各種培養(yǎng)基,實現(xiàn)了在實驗室內(nèi)對各種微生物的培養(yǎng);c)流動蒸汽滅菌;d)染色觀察和顯微攝影;
(2)對病原細菌的研究作出了突出的貢獻
a)具體證實了炭疽桿菌是炭疽病的病原菌;b)發(fā)現(xiàn)了肺結(jié)核病的病原菌;(1905年獲諾貝爾獎);c)證明某種微生物是否為某種疾病病原體的基本原則——著名的柯赫原則
(四)微生物學(xué)發(fā)展過程中的重大事件Griffith發(fā)現(xiàn)細菌轉(zhuǎn)化;
1929 Fleming 發(fā)現(xiàn)青霉素
1953 Watson和Crick提出DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)
t1977 Woese提出古生菌是不同于細菌和真核生物的特殊類群,
1982~1983 Prusiner發(fā)現(xiàn)朊病毒(prion)
(五)20世紀的微生物學(xué)
1、十九世紀中到二十世紀初微生物學(xué):鑒定病原菌、研究免疫學(xué)及其在預(yù)防疾病中的作用、尋找化學(xué)治療藥物、分析微生物的化學(xué)活性。
2、20世紀40年代后,微生物自身的特點使其成為生物學(xué)研究的“明星”,微生物學(xué)很快與生物學(xué)主流匯合,并被推到了整個生命科學(xué)發(fā)展的前沿,獲得了迅速的發(fā)展,在生命科學(xué)的發(fā)展中作出了巨大的貢獻。
微生物學(xué)的主要分支學(xué)科:按研究對對象分
(六)我國微生物學(xué)的發(fā)展
湯飛凡:沙眼病原體的分離和確證(國際領(lǐng)先)
陳華癸等:根瘤菌固氮作用的研究(開創(chuàng)農(nóng)業(yè)微生物學(xué))
抗生素的總產(chǎn)量已耀居世界首位:兩步法生產(chǎn)維生素C的技術(shù)居世界先進水平
(七)21世紀微生物學(xué)展望
2.與其他學(xué)科實現(xiàn)更廣泛的交叉,獲得新的發(fā)展
四、微生物的類群及特點
微生物是微小生物的總稱,一般只有借助顯微鏡才能其進行觀察。
微生物類群:病毒;原核生物(真細菌、古生菌);真核生物(真菌:酵母、霉菌、蕈菌等,單細胞藻類;原生動物)等
微生物的特點
個體小、結(jié)構(gòu)簡、胃口大、食譜廣、繁殖快、易培養(yǎng)、數(shù)量大、分布廣、種類多、級界寬、變異易、抗性強、休眠長、起源早、發(fā)現(xiàn)晚
個體小:測量單位:微米或納米
最。夯鹦请E石中發(fā)現(xiàn)的細菌化石(直徑 10 nm);
最大:德國科學(xué)家H. N. Schulz等1999年在納米比亞海岸的海底沉積物中發(fā)現(xiàn)的一種硫磺細菌(sulfur bacterium),其大小可達0.75 mm,Thiomargarita namibiensis,----“納米比亞硫磺珍珠”
結(jié)構(gòu)簡:無細胞結(jié)構(gòu)(病毒);單細胞;簡單多細胞;
胃口大:
食譜廣:微生物獲取營養(yǎng)的方式多種多樣,其食譜之廣是動植物完全無法相比的!
繁殖快:大腸桿菌一個細胞重約10 –12 克,平均20分鐘繁殖一代;
易培養(yǎng):很多細菌都可以非常方便地進行人工培養(yǎng)!
數(shù)量大:在自然界中(土壤、水體、空氣,動植物體內(nèi)和體表)都生存有大量的微生物!
分布廣:人跡可到之處,微生物的分布必然很多,而人跡不到的地方,也有大量的微生物存在!
種類多:微生物的生理代謝類型多;代謝產(chǎn)物種類多;微生物的種數(shù)“多”;
級界寬:Whittaker的五界分類系統(tǒng);Woese三原界分類系統(tǒng)
變異易:青霉素的生產(chǎn):20單位/ ml(1943),10000單位/ ml
抗(逆)性強:
抗熱:有的細菌能在265個大氣壓,250 ℃的條件下生長;自然界中細菌生長的最高溫度可以達到113 ℃;有些細菌的芽孢,需加熱煮沸8小時才被殺死;
抗寒:有些微生物可以在―12℃ ~ ―30℃的低溫生長;
抗酸堿:細菌能耐受并生長的pH范圍:pH 0.5 ~ 13;
耐滲透壓:蜜餞、腌制品,飽和鹽水(NaCl, 32%)中都有微生物生長;
抗壓力:有些細菌可在1400個大氣壓下生長;
第2章 純培養(yǎng)和顯微技術(shù)
培養(yǎng)物:在一定的條件下培養(yǎng)、繁殖得到的微生物群體。
混合培養(yǎng)物:含有多種微生物的培養(yǎng)物;純培養(yǎng)物:只有一種微生物的培養(yǎng)物。
菌落(colony):單個(或聚集在一起的一團)微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長、繁殖到一定程度可以形成肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細胞生長群體。
菌苔(lawn):眾多菌落連成一片。
不同微生物在特定培養(yǎng)基上生長形成的菌落或菌苔一般都具有穩(wěn)定的特征(形狀、顏色等),可以成為對該微生物進行分類、鑒定的重要依據(jù)
二、用固體培養(yǎng)基分離純培養(yǎng)
1、稀釋倒平板法:操作較麻煩,對好氧菌、熱敏感菌效果不好!
2、涂布平板法:使用較多的常規(guī)方法,但有時涂布不均勻!
3、平板劃線法
4、厭氧微生物的分離:厭氧罐;厭氧手套箱;稀釋搖管法。
三、用液體培養(yǎng)基分離純培養(yǎng)稀釋法進行液體分離必須在同一個稀釋度的許多平行試管中,大多數(shù)(一般應(yīng)超過95%)表現(xiàn)為不生長。
四、單細胞(孢子)分離五、選擇培養(yǎng)分離:抑制大多數(shù)其它微生物的生長;使待分離的微生物生長更快;
1.利用選擇平板進行直接分離高溫下培養(yǎng):分離嗜熱細菌;培養(yǎng)基中不含N:分離固氮菌;培養(yǎng)基加抗生素:分離抗性菌;牛奶平板:分離蛋白酶產(chǎn)生菌;顏色反應(yīng):分離特定的菌株;2. 富集培養(yǎng)
六、二元培養(yǎng)物:大腸桿菌和蛭弧菌
第3章 微生物類群與形態(tài)結(jié)構(gòu)
古生菌在進化譜系上與真細菌及真核生物相互并列,且與后者關(guān)系更近,而其細胞構(gòu)造卻與真細菌較為接近,同屬于原核生物。
真細菌(eubacteria)包括:普通細菌、放線菌、藍細菌、枝原體、立克次氏體和衣原體等
第一節(jié) 真細菌(Eubacteria)
一、一般形態(tài)及細胞結(jié)構(gòu)
(一)個體形態(tài)和排列(P28):基本形態(tài):球狀;桿狀;螺旋狀
1、球狀
1)概念:細胞個體呈球形或橢圓形。
2)排列:不同種的球菌在細胞分裂時會形成不同的空間排列方式,常被作為分類依據(jù)。
單、雙、鏈、四聯(lián)、八疊、葡萄球菌等。
3)例子A 金黃色葡萄球菌;B 淋病奈瑟氏球菌;C 肺炎鏈球菌
2、桿狀
1)概念:細胞呈桿狀或圓柱形,一般其粗細(直徑)比較穩(wěn)定,而長度則常因培養(yǎng)時間、培養(yǎng)條件不同而有較大變化。
2)排列:桿狀細菌的排列方式常因生長階段和培養(yǎng)條件而發(fā)生變化,一般不作為分類依據(jù)。
3)例子:A 枯草芽孢桿菌;B 地衣芽孢桿菌;C 銅綠假單胞菌(綠膿桿菌);D 結(jié)核分枝桿菌;E 炭疽病的病原菌-----炭疽桿菌;F 破傷風(fēng)梭菌
3、螺旋狀:弧菌,螺旋菌、螺旋體菌
弧菌:菌體只有一個彎曲,其程度不足一圈,形似“C”字或逗號,鞭毛偏端生。
例子:霍亂弧菌;寄生性弧菌-----蛭弧菌
螺旋菌:菌體回轉(zhuǎn)如螺旋,螺旋數(shù)目和螺距大小因種而異。鞭毛二端生。細胞壁堅韌,菌體較硬。
螺旋體菌:菌體柔軟,用于運動的類似鞭毛的軸絲位于細胞外鞘內(nèi)。
例子:梅毒密螺旋體
4、其它形狀
柄桿菌(prosthecate bacteria):細胞上有柄(stalk)、菌絲(hyphae)、附器(appendages)等細胞質(zhì)伸出物,細胞呈桿狀或梭狀,并有特征性的細柄。
星形細菌(star-shaped bacteria );方形細菌(square-ahaped bacteria)
4)異常形態(tài)
環(huán)境條件的變化:物理、化學(xué)因子的刺激阻礙細胞正常發(fā)育;培養(yǎng)時間過長:細胞衰老;營養(yǎng)缺乏;自身代謝產(chǎn)物積累過多。環(huán)境條件恢復(fù)正常。
(二)大小
1、范圍:最小:與無細胞結(jié)構(gòu)的病毒相仿(50 nm);最大:肉眼可見(0.75 mm),(Thiomargarita namibiensis)(0.75mm);最。簄anobacteria;最大和最小細菌的個體大小懸殊:
一般細菌的大小范圍:
球菌:0.5 ~ 1 m (直徑)
桿菌:0.2~ 1 m (直徑) X 1~ 80 m(長度)
螺旋菌:0.3~ 1 m (直徑) X 1~ 50 m(長度)(長度是菌體兩端點之間的距離,而非實際長度)
2、測量方法:顯微鏡測微尺;顯微照相后根據(jù)放大倍數(shù)進行測算;
2、細菌大小測量結(jié)果的影響因素(參見 P 31)
(三)細胞的結(jié)構(gòu)
一般構(gòu)造:一般細菌都有的構(gòu)造;
特殊構(gòu)造:部分細菌具有的或一般細菌在特殊環(huán)境下才有的構(gòu)造。
1、細胞壁
1)概念:細胞壁(cell wall)是位于細胞表面,內(nèi)側(cè)緊貼細胞膜的一層較為堅韌,略具彈性的細胞結(jié)構(gòu)。
2)證實細胞壁存在的方法:
(1)細菌超薄切片的電鏡直接觀察;
(2)質(zhì)、壁分離與適當(dāng)?shù)娜旧,可以在光學(xué)顯微鏡下看到細胞壁;
(3)機械法破裂細胞后,分離得到純的細胞壁;
(4)制備原生質(zhì)體,觀察細胞形態(tài)的變化;
3)細胞壁的功能:
(1)固定細胞外形和提高機械強度;
(2)為細胞的生長、分裂和鞭毛運動所必需;
(3)滲透屏障,阻攔酶蛋白和某些抗生素等大分子物質(zhì)(分子量大于800)進入細胞,保護細胞免受溶菌酶、消化酶和青霉素等有害物質(zhì)的損傷;
(4)細菌特定的抗原性、致病性以及對抗生素和噬菌體的敏感性的物質(zhì)基礎(chǔ);
4)革蘭氏染色與細胞壁
(1)革蘭氏染色:C.Gram(革蘭)于1884年發(fā)明的一種鑒別不同類型細菌的染色方法。
1、初染:用堿性染料結(jié)晶紫對菌液涂片進行初染;
2、媒染:用碘溶液進行媒染,其作用是提高染料和細胞間的相互作用從而使二者結(jié)合得更牢固;
3、脫色:用乙醇或丙酮沖洗進行脫色。在經(jīng)歷脫色后仍將結(jié)晶紫保留在細胞內(nèi)的為革蘭氏陽性細菌,而革蘭氏陰性細菌的結(jié)晶紫被洗掉,細胞呈無色;
4、復(fù)染:用一種與結(jié)晶紫不同顏色堿性染料對涂片進行復(fù)染。例如沙黃,它使原來無色的革蘭氏陰性細菌最后呈現(xiàn)桃紅到紅色,而革蘭氏陽性細菌繼續(xù)保持深紫色。
表3-1 革蘭氏陽性和陰性細菌細胞壁成分的比較(P39)
(2)革蘭氏陽性細菌的細胞壁
特點:厚度大(20~80nm),化學(xué)組分簡單,一般只含90%肽聚糖和10%磷壁酸。
肽聚糖(peptidoglycan):又稱粘肽(mucopeptide)、胞壁質(zhì)(murein)或粘質(zhì)復(fù)合物(mucocomplex),是真細菌細胞壁中的特有成分。
磷壁酸(teichoic acid)
A、肽聚糖:厚約20~80nm,由40層左右的網(wǎng)格狀分子交織成的網(wǎng)套覆蓋在整個細胞上。雙糖單位:
雙糖單位中的β-1,4-糖苷鍵很容易被溶菌酶(lysozyme)所水解,從而引起細菌因肽聚糖細胞壁的“散架”而死亡。
B、磷壁酸
革蘭氏陽性細菌細胞壁上特有的化學(xué)成分,主要成分為甘油磷酸或核糖醇磷酸。
壁磷壁酸,它與肽聚糖分子間進行共價結(jié)合,含量會隨培養(yǎng)基成分而改變,一般占細胞壁重量的10%,有時可接近50%。用稀酸或稀堿可以提取。
膜磷壁酸:跨越肽聚糖層并與細胞膜相交聯(lián)的膜磷壁酸(又稱脂磷壁酸),由甘油磷酸鏈分子與細胞膜上的磷脂進行共價結(jié)合后形成。其含量與培養(yǎng)條件關(guān)系不大。可用45%熱酚水提取,也可用熱水從脫脂的凍干細菌中提取。
(3)革蘭氏陰性細菌的細胞壁
A、肽聚糖:埋藏在外膜層之內(nèi),是僅由1~2層肽聚糖網(wǎng)狀分子組成的薄層(2~3nm),含量約占細胞壁總重的10%,故對機械強度的抵抗力較革蘭氏陽性菌弱。
B、外膜(outer membrane):位于革蘭氏陰性細菌細胞壁外層,由脂多糖、磷脂和脂蛋白等若干種蛋白質(zhì)組成的膜,有時也稱為外壁。
脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)位于革蘭氏陰性細菌細胞壁最外層的一層較厚(8~10nm)的類脂多糖類物質(zhì)。
組成:類脂A;核心多糖(core polysaccharide); O-特異側(cè)鏈(O-specific side chain,或稱O-多糖或O-抗原)
脂多糖的主要功能:
LPS結(jié)構(gòu)的多變,決定了革蘭氏陰性細菌細胞表面抗原決定簇的多樣性;
LPS負電荷較強,與磷壁酸相似,也有吸附Mg2+、Ca2+等陽離子以提高其在細胞表面濃度的作用,對細胞膜結(jié)構(gòu)起穩(wěn)定作用。
類脂A是革蘭氏陰性細菌致病物質(zhì)——內(nèi)毒素的物質(zhì)基礎(chǔ);具有控制某些物質(zhì)進出細胞的部分選擇性屏障功能;許多噬菌體在細胞表面的吸附受體。
C、外膜蛋白(outer membrane protein) 嵌合在LPS和磷脂層外膜上的蛋白。有20余種,但多數(shù)功能尚不清楚?椎鞍祝恢鞍
D、周質(zhì)空間(periplasmic space, periplasm) 又稱壁膜間隙。在革蘭氏陰性細菌中,一般指其外膜與細胞膜之間的狹窄空間(寬約12~15nm),呈膠狀。周質(zhì)空間是進出細胞的物質(zhì)的重要中轉(zhuǎn)站和反應(yīng)場所在周質(zhì)空間中,存在著多種周質(zhì)蛋白(periplasmic proteins):
水解酶類;結(jié)合蛋白;受體蛋白;
(4)革蘭氏陽性和陰性細菌的比較
革蘭氏染色的原理(參見P46)
5)特殊細胞壁的細菌:某些分枝桿菌和諾卡氏菌的細胞壁主要由一類被稱為霉菌酸(Mycolic acid)的枝鏈羥基脂質(zhì)組成,后者被認為與這些細菌感染能力有關(guān)。用抗酸性染色對宿主體內(nèi)的分枝桿菌病原體進行檢測。
6)細胞壁缺陷細菌:
缺壁突變——L型細菌實驗室或宿主體內(nèi)形成
基本去盡——原生質(zhì)體(G+)部分去除——球狀體(G-)
在自然界長期進化中形成——枝原體
(1)L型細菌(L-form of bacteria)
細菌在某些環(huán)境條件下(實驗室或宿主體內(nèi))通過自發(fā)突變而形成的遺傳性穩(wěn)定的細胞壁缺陷變異型。因英國李斯德(Lister)預(yù)防研究所首先發(fā)現(xiàn)而得名(1935年,念珠狀鏈桿菌 Streptobacillus moniliformis)
特點:
沒有完整而堅韌的細胞壁,細胞呈多形態(tài);有些能通過細菌濾器,故又稱“濾過型細菌”;對滲透敏感,在固體培養(yǎng)基上形成“油煎蛋”似的小菌落(直徑在0.1mm左右);
(2)原生質(zhì)體(protoplast)
在人為條件下,用溶菌酶處理或在含青霉素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)而抑制新生細胞壁合成而形成的由一層細胞膜包裹的,圓球形、對滲透壓變化敏感的細胞,一般由革蘭氏陽性細菌形成。特點:對環(huán)境條件變化敏感,低滲透壓、振蕩、離心甚至通氣等都易引起其破裂;有的原生質(zhì)體具有鞭毛,但不能運動,也不被相應(yīng)噬菌體所感染;在適宜條件(如高滲培養(yǎng)基)可生長繁殖、形成菌落,形成芽孢。及恢復(fù)成有細胞壁的正常結(jié)構(gòu)。比正常有細胞壁的細菌更易導(dǎo)入外源遺傳物質(zhì),是研究遺傳規(guī)律和進行原生質(zhì)體育種的良好實驗材料。
(3)球狀體(sphaeroplast):又稱原生質(zhì)球采用上述同樣方法,針對革蘭氏陰性細菌處理后:而獲得的殘留部分細胞壁(外壁層)的球形體。與原生質(zhì)體相比,它對外界環(huán)境具有一定的抗性,可在普通培養(yǎng)基上生長。
(4)枝原體(Mycoplasma)在長期進化過程中形成的、適應(yīng)自然生活條件的無細胞壁的原核生物。因它的細胞膜中含有一般原核生物所沒有的甾醇,? 所以即使缺乏細胞壁,其細胞膜仍有較高的機械強度。
2、細胞膜
細胞質(zhì)膜(cytoplasmic membrane),又稱質(zhì)膜(plasma membrane)、細胞膜(cell membrane)或內(nèi)膜(inner membrane),是緊貼在細胞壁內(nèi)側(cè)、包圍著細胞質(zhì)的一層柔軟、脆弱、富有彈性的半透性薄膜,厚約7~8nm,由磷脂(占20%~30%)和蛋白質(zhì)(占50%~70%)
組成。
2)觀察方法:
質(zhì)壁分離后結(jié)合鑒別性染色在光學(xué)顯微鏡下觀察;原生質(zhì)體破裂;
超薄切片電鏡觀察
3)細胞膜的化學(xué)組成與結(jié)構(gòu)模型:
(1)磷脂:膜蛋白約占細菌細胞膜的50%~70%,比任何一種生物膜都高,而且種類也多。細胞膜是一個重要的代謝活動中心。
(3)液態(tài)鑲嵌模型(fluid mosaic model)
(4)甾醇類物質(zhì)
4)細胞膜的生理功能:(參見P 48)
5)間體(mesosome,或中體):細胞質(zhì)膜內(nèi)褶而形成的囊狀構(gòu)造,其中充滿著層狀或管狀的泡囊。多見于革蘭氏陽性細菌。
3、細胞質(zhì)和內(nèi)含物
1)概念:細胞質(zhì)(cytoplasm)是細胞質(zhì)膜包圍的除核區(qū)外的一切半透明、膠狀、顆粒狀物質(zhì)的總稱。含水量約80%。細胞質(zhì)的主要成分為核糖體、貯藏物、多種酶類和中間代謝物、質(zhì)粒、各種營養(yǎng)物和大分子的單體等,少數(shù)細菌還有類囊體、羧酶體、氣泡或伴孢晶體等。2)顆粒狀貯藏物(reserve materials):貯藏物是一類由不同化學(xué)成分累積而成的不溶性沉淀顆粒,主要功能是貯存營養(yǎng)物。
①聚-β-羥丁酸(poly-β-hydroxybutyrate, PHB):類脂性質(zhì)的碳源類貯藏物它無毒、可塑、易降解,被認為是生產(chǎn)醫(yī)用塑料、生物降解塑料的良好原料。
②多糖類貯藏物:在真細菌中以糖原為多糖原粒較小,不染色需用電鏡觀察,用碘液染成褐色,可在光學(xué)顯微鏡下看到。有的細菌積累淀粉粒,用碘液染成深蘭色。
③異染粒(metachromatic granules)大小:為0.5~1.0μm,成份:無機偏磷酸的聚合物,功能:1)貯藏磷元素和能量,2)降低細胞的滲透壓。一般在含磷豐富的環(huán)境下形成。
④藻青素(cyanophycin):一種內(nèi)源性氮源貯藏物。通常存在于藍細菌中。
⑤硫粒(sulfur globules):很多真細菌在進行產(chǎn)能代謝或生物合成時,常涉及對還原性的硫化物如H2S,硫代硫酸鹽等的氧化。在環(huán)境中還原性硫素豐富時,常在細胞內(nèi)以折光性很強的硫粒的形式積累硫元素。當(dāng)環(huán)境中環(huán)境中還原性硫缺乏時,可被細菌重新利用。
3)磁小體(megnetosome):
4)羧酶體(carboxysome):一些自養(yǎng)細菌細胞內(nèi)的多角形或六角形內(nèi)含物其大小與噬菌體相仿,約10nm,內(nèi)含1,5-二磷酸核酮糖羧化酶,在自養(yǎng)細菌的CO2固定中起著關(guān)鍵作用。
5)氣泡(gas vocuoles):許多光合營養(yǎng)型、無鞭毛運動的水生細菌中存在的充滿氣體的泡囊狀內(nèi)含物,大小為0.2~1.0μm×75nm,內(nèi)由數(shù)排柱形小空泡組成,外有2nm厚的蛋白質(zhì)膜包裹。
功能:調(diào)節(jié)細胞比重以使細胞漂浮在最適水層中獲取光能、O2和營養(yǎng)物質(zhì)。
氣泡的膜只含蛋白質(zhì)而無磷脂。二種蛋白質(zhì)相互交連,形成一個堅硬的結(jié)構(gòu),可耐受一定的壓力。膜的外表面親水,而內(nèi)側(cè)絕對疏水,故氣泡只能透氣而不能透過水和溶質(zhì)。
6)載色體(Chromatophore):光合細菌進行光合作用的部位相當(dāng)于綠色植物的葉綠體。
7)核糖體(ribosome):組成:70S=50S(大)+ 30S(小)功能:蛋白質(zhì)合成場所。
4、核區(qū)(nuclear region or area):原核生物所特有的無核膜結(jié)構(gòu)、無固定形態(tài)的原始細胞核。5、特殊的休眠構(gòu)造——芽孢
1)概念:某些細菌在其生長發(fā)育后期,在細胞內(nèi)形成一個圓形或橢圓形、厚壁、含水量極低、抗逆性極強的休眠體,稱為芽孢(endospore或spore,偶譯“內(nèi)生孢子”)。
2)細菌芽孢的特點:整個生物界中抗逆性最強的生命體,是否能消滅芽孢是衡量各種消毒滅菌手段的最重要的指標。
芽孢是細菌的休眠體,在適宜的條件下可以重新轉(zhuǎn)變成為營養(yǎng)態(tài)細胞;
產(chǎn)芽孢細菌的保藏多用其芽孢。產(chǎn)芽孢的細菌多為桿菌,也有一些球菌。
芽孢的有無、形態(tài)、大小和著生位置是細菌分類和鑒定中的重要指標。
芽孢與營養(yǎng)細胞相比化學(xué)組成存在較大差異,容易在光學(xué)顯微鏡下觀察。(相差顯微鏡直接觀察;芽孢染色)
4)芽孢的耐熱機制:滲透調(diào)節(jié)皮層膨脹學(xué)說。
芽孢衣對多價陽離子和水分的透性很差皮層的離子強度很高,產(chǎn)生極高的滲透壓奪取芽孢核心的水分,結(jié)果造成皮層的充分膨脹。核心部分的細胞質(zhì)卻變得高度失水,因此,具極強的耐熱性。(參見P52圖3-13)
5)伴孢晶體(parasporal crystal):少數(shù)芽孢桿菌,例如蘇云金芽孢桿菌(Bacillus thuringiensis)在其形成芽孢的同時,會在芽孢旁形成一顆菱形或雙錐形的堿溶性蛋白晶體—δ內(nèi)毒素,稱為伴孢晶體。特點:不溶于水,對蛋白酶類不敏感;容易溶于堿性溶劑。伴孢晶體對200多種昆蟲尤其是鱗翅目的幼蟲有毒殺作用,因而可將這類產(chǎn)伴孢晶體的細菌制成有利于環(huán)境保護的生物農(nóng)藥——細菌殺蟲劑。
6、細菌細胞壁以外的構(gòu)造——糖被(glycocalyx)
1) 概念:包被于某些細菌細胞壁外的一層厚度不定的膠狀物質(zhì)。糖被按其有無固定層次、層次厚薄又可細分為莢膜(capsule或macrocapsule,大莢膜)、微莢膜(microcapsule)、粘液層(slime layer)和菌膠團(zoogloea)。
2)特點:
(1)主要成分是多糖、多肽或蛋白質(zhì),尤以多糖居多。經(jīng)特殊的莢膜染色,特別是負染色(又稱背景染色)后可在光學(xué)顯微鏡清楚地觀察到它的存在。
(2)產(chǎn)生糖被是微生物的一種遺傳特性,其菌落特征及血清學(xué)反應(yīng)是是細菌分類鑒定的指標之一。
(3)莢膜等并非細胞生活的必要結(jié)構(gòu),但它對細菌在環(huán)境中的生存有利。(詳見P 57-58)(4)細菌糖被與人類的科學(xué)研究和生產(chǎn)實踐有密切的關(guān)系。(詳見P58)
7、細菌細胞壁以外的構(gòu)造—— 鞭毛(flagellum,復(fù)flagella)
1) 概念:某些細菌細胞表面著生的一至數(shù)十條長絲狀、螺旋形的附屬物,具有推動細菌運動功能,為細菌的“運動器官”。 醫(yī)學(xué)全在線友情提供 m.52667788.cn
鞭毛的有無和著生方式具有十分重要的分類學(xué)意義:單端鞭毛;端生叢毛;兩端生鞭毛;周生鞭毛等。
2)觀察和判斷細菌鞭毛的方法
電子顯微鏡直接觀察;
光學(xué)顯微鏡下觀察:鞭毛染色和暗視野顯微鏡;
根據(jù)培養(yǎng)特征判斷:半固體穿刺、菌落(菌苔)形態(tài)。
8、細菌細胞壁以外的構(gòu)造——菌毛(fimbria,復(fù)數(shù)fimbriae):長在細菌體表的纖細、中空、短直、數(shù)量較多的蛋白質(zhì)類附屬物,具有使菌體附著于物體表面的功能。
每個細菌約有250~300條菌毛。有菌毛的細菌一般以革蘭氏陰性致病菌居多,借助菌毛可把它們牢固地粘附于宿主的呼吸道、消化道、泌尿生殖道等的粘膜上,進一步定殖和致病。9、細菌細胞壁以外的構(gòu)造 ———性毛(pili,單數(shù)pilus)構(gòu)造和成分與菌毛相同,但比菌毛長,數(shù)量僅一至少數(shù)幾根。性毛一般見于革蘭氏陰性細菌的雄性菌株(即供體菌)中,其功能是向雌性菌株(即受體菌)傳遞遺傳物質(zhì)。有的性毛還是RNA噬菌體的特異性吸附受體。
二、放線菌
(一)概念:在形態(tài)上具有分枝狀菌絲、菌落形態(tài)與霉菌相似,以孢子進行繁殖!敖橛诩毦c絲狀真菌之間又接近細菌的一類絲狀原核生物”放線菌:1)屬于原核微生物,2)細胞形態(tài)為分枝狀菌絲。
(二)形態(tài)與結(jié)構(gòu)
單細胞,大多由分枝發(fā)達的菌絲組成;
菌絲直徑與桿菌類似,約1mm;
細胞壁組成與細菌類似,革蘭氏染色陽性(少數(shù)陰性);
細胞的結(jié)構(gòu)與細菌基本相同;
按形態(tài)和功能可分為營養(yǎng)、氣生和孢子絲三種。
1、營養(yǎng)菌絲:匍匐生長于培養(yǎng)基內(nèi),吸收營養(yǎng),也稱基內(nèi)菌絲。一般無隔膜,直徑0.2-0.8 mm,長度差別很大,有的可產(chǎn)生色素。
2、氣生菌絲:營養(yǎng)菌絲發(fā)育到一定階段,伸向空間形成氣生菌絲,疊生于營養(yǎng)菌絲上,可覆蓋整個菌落表面。在光學(xué)顯微鏡下觀察,顏色較深,直徑較粗(1-1.4 mm),有的產(chǎn)色素。
3、孢子絲:氣生菌絲發(fā)育到一定階段,其上可分化出形成孢子的菌絲,即孢子絲,又稱產(chǎn)孢絲或繁殖菌絲。其形狀和排列方式因種而異,常被作為對放線菌進行分類的依據(jù)。
(三)生長與繁殖繁殖方式:
1)無性孢子;存在多種孢子形成方式
2)菌絲斷裂:常見于液體培養(yǎng)中。
(四)菌落形態(tài)
1)能產(chǎn)生大量分枝和氣生菌絲的菌種(如鏈霉菌):菌落質(zhì)地致密,與培養(yǎng)基結(jié)合緊密,小而不蔓延,不易挑起或挑起后不易破碎。
2)不能產(chǎn)生大量菌絲體的菌種(如諾卡氏菌):粘著力差,粉質(zhì),針挑起易粉碎
(五)分布特點及與人類的關(guān)系
1)放線菌常以孢子或菌絲狀態(tài)極其廣泛地存在于自然界,土壤中最多,其代謝產(chǎn)物使土壤具有特殊的泥腥味。
2)能產(chǎn)生大量的、種類繁多的抗生素(其中90%由鏈霉菌產(chǎn)生)。
3)有的放線菌可用于生產(chǎn)維生素、酶制制;此外,在甾體轉(zhuǎn)化、石油脫蠟、烴類發(fā)酵、污水處理等方面也有應(yīng)用;
4)少數(shù)寄生型放線菌可引起人、動物(如皮膚、腦、肺和腳部感染)、植物(如馬鈴薯和甜菜的瘡痂病)的疾病。