形態(tài)學(xué)檢查方法是細(xì)菌檢驗(yàn)中極為重要的鑒定手段之一，它不僅有助于細(xì)菌的初步識(shí)別，同時(shí)也是決定進(jìn)行生化反應(yīng)鑒定的重要步驟。如痰中的抗酸桿菌、腦脊液中腦膜炎球菌、泌尿生殖道分泌物中的淋球菌等。通過(guò)形態(tài)學(xué)檢查得到初步的診斷。由于細(xì)菌體積小，無(wú)色透明， 因此利用光學(xué)顯微鏡直接檢查只能觀察到細(xì)菌的動(dòng)力，對(duì)形態(tài)、大小、排列方式、染色特性及特殊結(jié)構(gòu)的判定，還須借助于染色標(biāo)本的觀察。要研究其細(xì)菌的超微結(jié)構(gòu)，還需用電子顯微鏡。
一、不染色標(biāo)本檢查法
不染色標(biāo)本的檢查用于觀察活菌狀態(tài)，常用以檢查細(xì)菌的動(dòng)力或運(yùn)動(dòng)狀況。
1．濕片法：用接種環(huán)取細(xì)菌培養(yǎng)液兩環(huán)， 置于載玻片中央，輕輕覆以蓋玻片。菌液要適量，不可外溢，不可有氣泡。高倍鏡下觀察。
2．懸滴法：加一小滴菌液在蓋玻片中央，在另一凹玻片凹窩的周圍涂少量凡士林，將凹面向下，對(duì)準(zhǔn)蓋玻片中央，蓋在凹玻片上，迅速翻轉(zhuǎn)玻片，用小鑷子輕壓，使蓋玻片與醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)網(wǎng)凹玻片粘緊，密封凹窩邊緣。高倍鏡下觀察。
3．毛細(xì)管法：本法適用于觀察厭氧菌動(dòng)力。先將待檢菌接種在適宜的液體培養(yǎng)基中，經(jīng)厭氧過(guò)夜培養(yǎng)后，以毛細(xì)管（長(zhǎng)60 ～70n m ， 管徑0．5 ～1．0n m ) 接觸培養(yǎng)物，使菌液進(jìn)入毛細(xì)管中，用火焰封閉毛細(xì)管兩端，將毛細(xì)管固定在載玻片上，鏡檢。
二、染色標(biāo)本檢查法
（一) 基本方法
細(xì)菌胞漿無(wú)色透明，不易識(shí)別。常用適宜的染料使細(xì)菌著色后，以觀察其形態(tài)和特殊構(gòu)造，且可按染色反應(yīng)進(jìn)行分類。
1．原理
（1) 物理吸附作用：由于毛細(xì)管現(xiàn)象和滲透作用， 使染料進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)被溶解吸收。此外細(xì)菌等電點(diǎn)較低，p H 值2 ～5 ，在一般情況下細(xì)菌帶負(fù)電荷，易和帶正電荷的堿性染料相結(jié)合。
（2) 化學(xué)反應(yīng)：菌體內(nèi)某些化合物和染料相結(jié)合，發(fā)生化學(xué)反應(yīng)使細(xì)菌著色，而且不易被脫色劑所脫色。
（3) 其他因素：細(xì)胞膜的通透性、膜孔的大小、細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整與否以及培養(yǎng)基成分，染色液中電解質(zhì)含量、p H 值、菌齡等都是影響細(xì)菌著色的因素。
2．方法
（1) 涂片：臨床標(biāo)本大多可直接涂抹在潔凈的載玻片上。若是細(xì)菌的液體培養(yǎng)物，可直接加一小滴在載玻片，稍加涂布。若是從固體培養(yǎng)基上取細(xì)菌菌落，則應(yīng)先用接種環(huán)取一環(huán)生理鹽水置于玻片上，然后從培養(yǎng)基上取少許菌在鹽水中輕輕磨勻，使呈輕微
乳白渾濁，再涂布擴(kuò)大至直徑20 m m 大小的圓形，待自然干燥，也可加微熱使其干燥。
（2) 固定：涂片干燥后，在火焰上迅速通過(guò)3 次加以固定。固定過(guò)程可殺死細(xì)菌，凝固細(xì)胞質(zhì)和其他細(xì)胞結(jié)構(gòu)，增加細(xì)菌細(xì)胞對(duì)染液的通透性，還可使細(xì)菌涂膜牢固，不被在染色過(guò)程中的流水沖洗脫落。
（3) 染色：一般用低濃度染色液（1 ％以下)，滴加染液覆蓋涂膜。分單染法和復(fù)染法。為促使染料與菌體結(jié)合，有的染色法可在染液中加入酚、明礬，有的在染色過(guò)程中加碘液，可起到媒染的作用，也有用加熱法促進(jìn)著色的。
（4) 脫色：一般應(yīng)用乙醇、丙酮或酸類作為脫色劑。適當(dāng)掌握脫色時(shí)間以獲良好的效果。脫色劑可以顯示出細(xì)菌與染料結(jié)合的牢固程度，具有鑒別染色的作用。
（5) 復(fù)染：復(fù)染液應(yīng)與初染液的顏色不同，以形成鮮明對(duì)比。復(fù)染可使已脫色的細(xì)菌重新著色。
