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3. 結(jié)果
3.1 PR在EPCs中的表達
EPCs在體外呈梭形，貼壁生長；PR表達陽性，多為胞漿表達，少數(shù)可見核表達。
3.2 細胞增殖實驗
1×10-3mol/L的MPA作用24h細胞大部分變圓，漂浮，48h后呈碎片樣改變；1×10-4mol/L的MPA作用24h，細胞數(shù)量與對照組比較減少，細胞形態(tài)改變不明顯，48h后細胞大部分變圓漂浮，隨著時間的延長，漂浮細胞增多，逐漸呈碎片樣改變，其余組的細胞生長良好，與對照組比較無明顯差異。1×10-3和1×10-4mol/LMPA對EPCs有明顯的抑制作用，且隨著作用時間的延長，抑制作用越明顯；而濃度小于或等于1×10-5mol/L時對內(nèi)皮祖細胞的增值無明顯影響。
3.3 抑制率及ID50
MPA濃度大于7.5×10-5mol/L時對EPCs的抑制作用隨著濃度的增加而增強，組間差異有統(tǒng)計學意義(*，P<0.01)，而MPA濃度小于或等于5.0×10-5mol/L時對EPCs的抑制率組間差異無統(tǒng)計學意義(﹟，P>0.05)。ID50為4.89×10-4mol/L。
4. 討論
內(nèi)皮祖細胞EPCs是一類能增殖并分化為成熟且有功能的血管內(nèi)皮細胞的前體細胞。成人中，內(nèi)皮祖細胞主要定居于骨髓，在體內(nèi)缺血、血管損傷，大細胞因子或藥物作用下可向外周循環(huán)遷移，并分化為成熟內(nèi)皮細胞，促進新生血管形成，緩解組織缺血和修復血管損傷。
MPA是一種合成孕激素，它可以使子宮內(nèi)膜從增生期向分泌期轉(zhuǎn)變，常用于功血治療和HRT，長期使用會使子宮內(nèi)膜萎縮和脫落，因此也用于治療子宮內(nèi)膜異位癥。MPA有對抗雌激素的作用，并可能通過直接作用于子宮內(nèi)膜癌細胞，延緩DNA和RNA的復制，從而抑制癌細胞的生長，因此MPA也用于子宮內(nèi)膜癌的治療。MPA還用于乳腺癌，腎癌等激素依耐性腫瘤的治療和惡性腫瘤的姑息治療。本實驗發(fā)現(xiàn)EPCs的PR表達陽性，提示MPA對EPCs的作用有效。一些實驗表明MPA與化療藥物聯(lián)合使用可增強其抗腫瘤的效果。
多項研究已表明EPCs在對腫瘤的血管生成有重要的的作用。EPCs通過旁分泌生長因子和直接分化成內(nèi)皮細胞整合到新生血管壁中來調(diào)節(jié)新血管的生成，而且EPCs還可以通過刺激器官和組織血管床的生成來吸引外周血中的腫瘤細胞的停留和生長，從而促進腫瘤的轉(zhuǎn)移，在體內(nèi)選擇性的去除EPCs明顯抑制了血管生成和腫瘤的發(fā)展和轉(zhuǎn)移。我們研究發(fā)現(xiàn)MPA在濃度高于7.5×10-5mol/L時明顯抑制了EPCs的生長，且呈濃度和時間依賴性。
高濃度的MPA抑制EPCs作用明顯，這與臨床使用高濃度的MPA治療惡性腫瘤和子宮內(nèi)膜異位癥等是一致的。提示MPA可能通過抑制EPCs從而抑制血管生成發(fā)揮對惡性腫瘤和子宮內(nèi)膜異位癥等的協(xié)同治療作用。
5. 結(jié)論
本實驗證實MPA抑制EPCs增殖且EPCs的PR表達陽性，提示MPA可能通過PR抑制EPCs的生物學功能，并因此抑制腫瘤血管生成，發(fā)揮抗腫瘤的作用。
