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[摘要] 目的 探討乙肝病毒前S1蛋白抗原（PreS1Ag)、乙肝病毒基因（HBV-DNA)和乙肝“兩對半”檢測的相關(guān)性及在乙肝診治中的價值。方法PreS1Ag和乙肝“兩對半”檢測采用酶聯(lián)免疫法，HBV-DNA檢測采用熒光定量PCR擴增技術(shù)。結(jié)果 包括HbeAg陽性的2種組合中，HBV-DNA和PreS1Ag陽性率分別為87.1%、86.0%和100.0%、100.0%，HBV-DNA和PreS1Ag，在不包括HbeAg陽性的3種組合中，HBV-DNA和PreS1Ag陽性率分別為42.3%、45.7%；46.3%、44.8和11.1%、11.1%。HBV-DNA檢測陽性標(biāo)本中，PreS1Ag的陽性率為87.2%，HbeAg陽性率為75.6%；二者聯(lián)合檢測陽性率為96.5%，HBV-DNA檢測陰性標(biāo)本中PreS1Ag和HbeAg的陽性率為7.8%和5.2%，二者聯(lián)合檢測陽性率為9.5%。 結(jié)論 PreS1Ag檢測聯(lián)合乙肝“兩對半”檢測是乙型肝炎早期診斷和評價療效的可靠指標(biāo)，可在臨床推廣應(yīng)用。
關(guān)鍵詞 乙肝病毒；乙肝病毒前S1抗原；乙肝病毒基因
[中圖分類號] R4[文獻標(biāo)識碼] A[文章編號] 1674-074２（２０１3)11（c)－０186-02。
乙型肝炎是我國發(fā)病率最高的傳染性疾病之一，約有超過10%的人口為乙型肝炎患者，病毒攜帶者的比例還要比這個數(shù)字高出許多，對乙型肝炎病毒（HBV)復(fù)制情況進行正確的判斷，可對乙型肝炎的治療及療效的評價提供依據(jù)[1]，在常年的臨床實踐中，肝病科多以乙肝病毒“兩對半”的檢測作為感染HBV的依據(jù)，并通過HBV-DNA的檢測來評價療效，然而，目前越來越多的研究證實HBV前S1抗原（PreS1Ag)更能夠反映病毒的復(fù)制情況，可作為HBV存在和復(fù)制的標(biāo)志及抗病毒治療的療效指標(biāo)[2]。該研究對2011年1月—2012年12月該院收治的288例乙型肝炎患者的血清進行乙肝“兩對半”、 PreS1Ag和HBV-DNA聯(lián)合檢測，以探討其相關(guān)性。
1 資料與方法
1.1 一般資料
288例乙肝血清標(biāo)本均為該院住院和門診治療的乙肝患者，男性152例，女性136例，年齡21~68歲，中位年齡39歲，所有患者均符合中華醫(yī)學(xué)會制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)，此標(biāo)準(zhǔn)與2006年在《中國乙型肝炎防治指南》[3]中公布。
1.2 試劑與方法
乙肝“兩對半”檢測采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELLSA)，其中HBsAg、HBsAb、和HBeAg檢測采用夾心法；HBeAb和HBcAb檢測采用競爭法，PreS1Ag檢測采用ELLSA法的雙抗夾心法，操作過程由技術(shù)熟練的檢驗科技術(shù)人員嚴(yán)格按照說明書進行。結(jié)果檢測采用酶標(biāo)儀（型號：ELx-800)讀取吸光度（A)值，以陽性或陰性報告結(jié)果。采用熒光定量PCR進行HBV-DNA檢測，擴增檢測結(jié)果DNA拷貝數(shù)＞1 000為陽性。
1.3 統(tǒng)計方法
所有統(tǒng)計數(shù)據(jù)采用采用SPSS19.0軟件分析，組間計數(shù)資料比較采用χ2檢驗。
2 結(jié)果
包括HbeAg陽性的2種組合中，HBV-DNA和PreS1Ag陽性率分別為87.1%、86.0%和100.0%、100.0%，HBV-DNA和PreS1Ag在2組中陽性率差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05)，而在不包括HbeAg陽性的3種組合中，HBV-DNA和PreS1Ag陽性率分別為42.3%、45.7%；46.3%、44.8和11.1%、11.1%，見表1。HBV-DNA檢測陽性標(biāo)本中，PreS1Ag的陽性率為87.2%，HbeAg陽性率為75.6%；HBV-DNA檢測陰性標(biāo)本中PreS1Ag和HbeAg的陽性率僅為7.8%和5.2%，PreS1Ag的陽性率在HBV-DNA陽性和陰性標(biāo)本中差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05)，見表2。
3 討論
多年以來HbeAg一直是肝病科醫(yī)生判斷乙肝病毒是否在體內(nèi)復(fù)制并具有傳染性的重要指標(biāo)，當(dāng)HbeAg轉(zhuǎn)化為HbeAb意味著乙肝病毒復(fù)制結(jié)束，病情向好的方面轉(zhuǎn)化[4]，但在后來的研究中發(fā)現(xiàn)，即使HbeAg轉(zhuǎn)為陰性，仍有部分患者能檢測到乙肝病毒的活躍復(fù)制，因此，有學(xué)者認為[5]HbeAg不能作為反映乙肝病毒復(fù)制的唯一指標(biāo)，需結(jié)合其他指標(biāo)的檢測綜合判定。前S1蛋白存在于乙肝病毒的外膜，是乙肝病毒與肝細胞結(jié)合的位點，其在乙肝病毒組裝、分泌并侵襲肝細胞的過程中發(fā)揮重要作用[6]，PreS1Ag作為乙型肝炎新的血清學(xué)指標(biāo)，在臨床越來越顯示出其應(yīng)用價值[7]。
該研究表明，在含有HbeAg陽性的2種組合中，PreS1Ag的檢出率分別為86.0%和100.0%，HBV-DNA的檢出率分別為87.1%和100.0%，而在HBV-DNA陽性的患者中，PreS1Ag陽性率達到87.2%，說明PreS1Ag和HBV-DNA在反映乙肝病毒復(fù)制方面有很高的一致性，也具有較高的伴隨關(guān)系，高于國內(nèi)王建軍等[8]等的報道。PreS1Ag可作為觀察病毒是否復(fù)制的實驗室指標(biāo)，HBV-DNA一直作為反映病毒復(fù)制的金標(biāo)準(zhǔn)，但其檢查需要昂貴的設(shè)備，對化驗室技術(shù)人員的要求也非常高，不利于在基層醫(yī)院開展，而PreS1Ag檢測操作簡單，價格低廉，適宜推廣應(yīng)用。另外，HBsAg+HBeAg+HBcAb陽性組合，PreS1Ag和HBV-DNA陽性檢出率分別為87.1%和86.0%，PreS1Ag陽性檢出率稍高于HBV-DNA，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05)，而在HBsAg+HBeAg陽性組合中，兩者陽性檢出率均為100%，提示在對乙肝患者的日常檢測中，可以用PreS1Ag代替HBV-DNA作為反應(yīng)病毒是否復(fù)制的標(biāo)志。在HbeAg陰性的3種組合中，HBV-DNA和PreS1Ag陽性率分別為42.3%、45.7%；46.3%、44.8和11.1%、11.1%，說明了即使在HbeAg檢測陰性的情況下，仍然存在這病毒的復(fù)制，考慮HbeAg陰性檢測結(jié)果可能與乙肝病毒的PreC區(qū)基因變異出現(xiàn)終止密碼子，阻礙了HbeAg的形成有關(guān)[9]。提示HbeAg雖然是傳統(tǒng)的反應(yīng)病毒復(fù)制的指標(biāo)，但不能完全代表病毒的復(fù)制情況，還存在部分乙肝病毒復(fù)制患者HbeAg檢測陰性。本研究顯示：HBV-DNA陽性的172例標(biāo)本中，PreS1Ag和HBeAg陽性率分別為87.2%和75.6%，但PreS1Ag和HBeAg聯(lián)合檢測陽性率達96.5%，說明在HBeAg檢測陰性的情況下，PreS1Ag依然可以反映乙肝病毒復(fù)制，聯(lián)合應(yīng)用乙肝兩對半和PreS1Ag檢測可提高診斷準(zhǔn)確率，減少單純依靠HbeAg檢測出現(xiàn)的誤診。
綜上所述，PreS1Ag檢測操作簡單，價格低廉，可代替HBV-DNA作為觀察乙肝病毒是否復(fù)制的實驗室指標(biāo)，PreS1Ag聯(lián)合乙肝“兩對半”檢測是乙型肝炎早期診斷和評價療效的可靠指標(biāo)，可在臨床推廣應(yīng)用。
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