三磷酸腺苷二鈉注射液－三磷酸腺苷二鈉－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定三磷酸腺苷二鈉注射液中三磷酸腺苷二鈉的含量。

本方法適用于三磷酸腺苷二鈉注射液。

供試品經(jīng)流動(dòng)相稀釋，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)259nm處檢測(cè)三磷酸腺苷二鈉的峰面積，計(jì)算出其含量。

1. 甲醇

2. 0.2mol/L磷酸鹽緩沖液

3. 1mol/L氫氧化鈉

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按三磷酸腺苷二鈉峰計(jì)算應(yīng)不低于1500。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2. 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：0.2mol/L磷酸鹽緩沖液 甲醇=95 5

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：259nm

2.3 柱溫：35℃

1. 0.2mol/L磷酸鹽緩沖液

取磷酸氫二鈉35.8g、磷酸二氫鉀13.6g，加水900mL溶解，用1mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至7.0，加入四丁基溴化銨1.61g，加水至1000mL，搖勻。

2. 1mol/L氫氧化鈉

取氫氧化鈉適量，加水振搖使溶解成飽和溶液，冷卻后，置聚乙烯塑料瓶中，靜置數(shù)日，澄清后備用。取澄清的氫氧化鈉飽和溶液56mL，加新沸過(guò)的冷水使成1000mL，搖勻。

3. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取三磷酸腺苷二鈉對(duì)照品適量，用流動(dòng)相溶解并定量稀釋制成每1mL約含0.4mg的溶液，即為對(duì)照品溶液。

4. 供試品溶液的制備

精密量取供試品適量，用流動(dòng)相稀釋制成每1mL中約含三磷酸腺苷二鈉4mg的溶液，即為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。