方法名稱： |
吳紹輝、譚曉梅、羅佳波等. 高效液相色譜法測(cè)定葛根芩連微丸中葛根素的含量. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，1999，5（6)：9-11. |
應(yīng)用范圍： |
本方法采用高效液相色譜法測(cè)定葛根芩連微丸中鹽酸小檗堿、鹽酸巴馬汀的含量。 本方法適用于葛根芩連微丸中鹽酸小檗堿、鹽酸巴馬汀的含量測(cè)定。 |
方法原理： |
供試品加入甲醇超聲提取，濾過(guò)，濾液進(jìn)入中性氧化鋁柱，洗脫液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)345nm處檢測(cè)小檗堿、巴馬汀的吸收值，計(jì)算出其含量。 |
試劑： |
1. 0.2％三乙胺溶液 2. 乙腈 3. 0.02％磷酸二氫鉀溶液 4. 0.01％十二烷基磺酸鈉溶液 |
儀器設(shè)備： |
1 儀器 1.1 高效液相色譜儀 1.2 色譜柱 YWG－C18柱（300 × 4.6mm, 10μm) 1.3 紫外檢測(cè)器 2 色譜條件 2.1 流動(dòng)相： (0.2％三乙胺/0.02％磷酸二氫鉀/0.01％ 二烷基磺酸鈉) 乙腈 ＝ 55 ＋ 45 2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：345nm 2.3 柱溫：室溫 |
試樣制備： |
1. 稱取供試品 精密稱取本品細(xì)粉（過(guò)五號(hào)篩-80目)約2g。 2. 對(duì)照品溶液的制備 分別精密稱取在105°C干燥至恒重的鹽酸小檗堿對(duì)照品10mg、鹽酸巴馬汀對(duì)照品5mg，置25mL量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密量取1mL置10mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。 3. 供試品溶液的制備 取供試品于三角燒瓶中，精密加入甲醇50mL，稱定重量，超聲提取30分鐘，放冷，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液5mL，置已處理好的中性氧化鋁柱(玻璃柱內(nèi)徑10mm，中性氧化鋁5g，濕法裝柱，用30mL乙醇預(yù)洗)上，用乙醇30mL洗脫，收集洗脫液，置50mL量瓶中，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。 注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一�！熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。 |
操作步驟： |
1.標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 精密吸取對(duì)照品溶液6、8、10、14、16、20μL，進(jìn)入高效液相色譜儀，用紫外檢測(cè)器測(cè)定小檗堿、巴馬汀的吸收值，以峰面積積分值對(duì)對(duì)照品溶液進(jìn)樣量繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程。 2.供試品的測(cè)定 分別精密吸取上述對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)345nm處測(cè)定小檗堿、巴馬汀的吸收值，計(jì)算出其含量。 |
參考文獻(xiàn)： |
朱斌. 葛根芩連微丸中小檗堿、巴馬汀的含量測(cè)定. 中藥材，2000，23（10)：641-642. |
