左金丸-小檗堿的測定-高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定左金丸中小檗堿的含量。

本方法適用于中成藥制劑左金丸。

供試品于錐形瓶中，加100:1水-鹽酸，超聲溶解。提取液過濾后進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長350nm處檢測小檗堿的吸收值，計(jì)算出其含量。

1 .甲醇

2.乙腈

3.磷酸二氫鉀

4.鹽酸

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

色譜柱為CLC2ODS C18 柱(150 mm ×416 mm , 5 Lm ) (Sh im 2pack)，理論板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計(jì)算應(yīng)不低于3 000。

1.3 紫外吸收檢測器

2 色譜條件

2.1 流動相：0.05 mol/L磷酸二氫鉀溶液 乙腈=75 25

2.2 檢測波長：350nm

2.3柱溫：室溫

1.對照品溶液的制備

精密稱取在100 ℃干燥5h 的鹽酸小檗堿對照品約30mg, 置100ml量瓶中, 加水-鹽酸(100∶1) 適量, 超聲10min 使溶解,放冷, 加水-鹽酸(100∶1) 至刻度, 搖勻。精密量取2ml , 置25ml 量瓶中, 用水-鹽酸(100∶1) 稀釋至刻度, 搖勻, 即得。

2.供試品溶液的制備

取左金丸適量研細(xì)(過3號篩) , 取1g, 精密稱定, 置100ml 量瓶中, 加水-鹽酸(100∶1) 適量, 超聲20 min 使溶解, 放冷, 加水-鹽酸(100∶1) 至刻度, 搖勻, 離心。精密量取上清液2ml, 置25ml 量瓶中, 用水-鹽酸(100∶1) 稀釋至刻度, 搖勻, 即得。

1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

精密吸取稀釋前的對照品溶液( 013 mg/mL ) 0125, 015, 110, 210, 310, 410 mL , 置25 mL 量瓶中, 用水-鹽酸(100∶1) 稀釋至刻度, 搖勻, 按上述色譜條件測定鹽酸小檗堿吸收峰面積。以濃度(C) 對峰面積(A ) 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程。

2. 供試品的測定

精密吸取上述供試品溶液各20μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長250nm處測定鹽酸小檗堿的吸收值，計(jì)算出其含量。

周暉，HPLC 法測定左金丸中小檗堿的含量，中草藥，2003，V34(11)：1008～1009