山楂葉—金絲桃苷的測(cè)定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定山楂葉中金絲桃苷的含量。

本方法適用于薔薇科植物山里紅Crataegus pinnatifida Bge.var.major N.E.Br.或山楂Crataegus pinnatifida Bge.的干燥葉。

本品細(xì)粉置于索氏提取器中，依次加入三氯甲烷和甲醇提取，蒸干，加稀乙醇溶解，濾過(guò)，續(xù)濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)363nm處檢測(cè)金絲桃苷的吸收值，計(jì)算出其含量。

1. 三氯甲烷

2 .甲醇

3 .乙腈

4 .四氫呋喃

5 .0.5%冰醋酸溶液

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按金絲桃苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2色譜條件

2.1流動(dòng)相：乙腈 甲醇 四氫呋喃 0.5%冰醋酸溶液＝1 1 19.4 78.6

2.2檢測(cè)波長(zhǎng)：363nm

2.3柱溫：室溫

1. 稱取供試品

精密稱定本品細(xì)粉1g。

2. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取金絲桃苷對(duì)照品適量，加稀乙醇制成每1mL含20mg的溶液。

3. 供試品溶液的制備

取本品細(xì)粉1g，精密稱定，置索氏提取器中，加三氯甲烷加熱回流提取至提取液無(wú)色，棄去三氯甲烷液，藥渣揮去三氯甲烷，加甲醇繼續(xù)提取至無(wú)色（約4小時(shí))，提取液蒸干，殘?jiān)�加稀乙醇溶解，轉(zhuǎn)移至50 mL量瓶中，加稀乙醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。

分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器于波長(zhǎng)363nm處測(cè)定金絲桃苷（C₂₁H₂₀O₁₂)的峰面積，計(jì)算出其含量。