穿心蓮片－脫水穿心蓮內(nèi)酯的測(cè)定－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定穿心蓮片中脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量。

本方法適用于中成藥穿心蓮片。

本品加甲醇超聲提取，過(guò)柱洗脫，搖勻，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)254nm處檢測(cè)脫水穿心蓮內(nèi)酯的吸收值，計(jì)算出其含量。

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按脫水穿心蓮內(nèi)酯峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2色譜條件

2.1流動(dòng)相：甲醇 水＝60 40

2.2檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm

2.3柱溫：室溫

1. 稱取供試品

取本品20片（小片)或10片（大片)，除去包衣，精密稱定，研細(xì)，取0.5g，精密稱定，為供試品。

2. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品適量，加甲醇制成每1mL含0.1mg的溶液。

3. 供試品溶液的制備

供試品，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25mL，密塞，稱定重量，浸泡1小時(shí)，超聲處理（功率250W，頻率33kHz)30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液10mL（剩余的續(xù)濾液備用)，加在中性氧化鋁柱（200~300目，5g，內(nèi)徑1.5cm)上，用甲醇20mL洗脫，收集洗脫液，置50mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器于波長(zhǎng)254nm處測(cè)定脫水穿心蓮內(nèi)酯（C₂₀H₂₈O₄)的峰面積，計(jì)算出其含量。

中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，一部，p549。