方法名稱： |
連翹-連翹甙含量測定-HPLC-UV |
應用范圍： |
用于連翹中連翹甙的含量測定 |
方法原理： |
本品粉末加甲醇進行超聲提取，經液相色譜分離，測定峰面積，用外標法計算含量 |
儀器設備及實驗條件： |
儀器 Agilent 1100 高效液相色譜儀帶二極管陣列檢測器 色譜條件 色譜柱：ZORBA Eclipse DBC18（250 mm ×4. 6 mm，5 ；流動相：乙腈-水，梯度洗脫；柱溫：25 ℃；流速：0. 8 mL/ min；梯度洗脫條件：φ（乙腈)為10 %→15 %→25 %→40 %→10 %，時間分別10，20，35，50，60 min |
試樣制備： |
對照品溶液的制備 稱取連翹甙標準品1.5 mg，加入甲醇溶解，用一次性有機相過濾球（0. 45 μm)濾過，制成0.3 mg/mL溶液。 供試品溶液的制備 取不同產地連翹果實干燥（40 ℃)粉碎過120目篩，稱取1.0 g，置于50 mL具塞錐形瓶中，加入甲醇15 mL，稱重后密塞浸漬過夜，超聲處理25 min后稱重，用甲醇補重，搖勻濾過，蒸至近干，加中性氧化鋁0.5 g拌勻，加于中性氧化鋁柱（0. 15～0. 18 mm，1 g，內徑為1. 5 cm)，用φ（乙醇)=70 % 80 mL洗脫，收集洗脫液，濃縮至干，殘渣用甲醇溶解后轉移至5 mL容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻，用一次性有機相過濾球（0.45 μm)濾過，即得。 |
操作步驟： |
分別精密吸取連翹甙對照液以及連翹供試品溶液各60 μL，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定峰面積。以外標法計算連翹甙含量。 |
附件： |
點擊下載 (解壓密碼:m.52667788.cn) |
備注： |
|
參考文獻： |
顧華，蓋玲，周銅水等. 中藥材連翹道地性的分子生物學探討. 復旦學報（自然科學版).2002，41（6)：664~668 |
