方法名稱： |
不同生長(zhǎng)期的連翹- 連翹酯苷及蘆丁的含量測(cè)-HPLC-UV |
應(yīng)用范圍： |
用于不同生長(zhǎng)期的連翹的連翹酯苷及蘆丁的含量測(cè)定 |
方法原理： |
本品粉碎加75 %乙醇超聲提取，經(jīng)液相色譜分離，分別在328 nm（連翹酯苷)、254 nm（蘆丁)處測(cè)定峰面積，外標(biāo)法計(jì)算含量 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件： |
儀器 高效液相色譜儀，包括Waters515 HPLC Pump，Water s2996 檢測(cè)器，Millennium32login 色譜管理者軟件（美國(guó)Waters公司) 色譜條件 色譜柱：Dikma C18 柱（4.6 mm×200 mm，5 μm)；流動(dòng)相：乙腈- 0. 2 %醋酸水溶液（20∶80)；流速：1.0 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：328 nm（連翹酯苷)，254 nm（蘆丁)；柱溫：室溫 |
試樣制備： |
對(duì)照品溶液的制備 1)連翹酯苷對(duì)照品溶液的制備：精密稱取連翹酯苷對(duì)照品5. 5 mg，置于10 mL容量瓶中，加75 %乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，得到0. 55 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液。精密移取標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液1.00 mL，置于5 mL容量瓶中，加入75 %乙醇至刻度，搖勻，得到0.11 mg/ mL連翹酯苷對(duì)照品溶液。2)蘆丁對(duì)照品溶液的制備：精密稱取蘆丁對(duì)照品5.0 mg，置于10 mL容量瓶中，加75 %乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，得到0.150 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液。精密移取標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液1.00 mL，置于5 mL容量瓶中，加入75 %乙醇至刻度，搖勻，得到0.10 mg/mL蘆丁對(duì)照品溶液。 供試品溶液的制備 將采集來(lái)的連翹藥材陰干，粉碎，研細(xì)。精密稱取0.1 g，置10 mL容量瓶中，加75 %乙醇溶解并稀釋至刻度，加蓋超聲40 min，用0. 45 μm針頭式微孔過濾器濾過，棄去初濾液，取續(xù)濾液備用。 |
操作步驟： |
分別精密吸取連翹酯苷及蘆丁對(duì)照液以及連翹供試品溶液適量，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測(cè)定峰面積。以外標(biāo)法計(jì)算連翹酯苷及蘆丁含量。 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
龐維榮，趙平，劉養(yǎng)清等. 不同生長(zhǎng)期的連翹中連翹酯苷及蘆丁含量動(dòng)態(tài)研究. 世界中西醫(yī)結(jié)合雜志.2007，2（5)：277~279 |
