用轉(zhuǎn)錄因子提高長春花毛狀根萜類吲哚生物堿含量的方法
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公開(公告)號
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CN1807631A
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公開(公告)日
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2006.07.26
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申請(專利)號
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CN200610023234.3
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申請日期
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2006.01.12
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專利名稱
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用轉(zhuǎn)錄因子提高長春花毛狀根萜類吲哚生物堿含量的方法
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主分類號
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C12N15/29(2006.01)I
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分類號
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C12N15/29(2006.01)I;C12N15/82(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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上海交通大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計)人
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唐克軒;龔一富;廖志華;苗志奇;孫小芬
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地址
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200240上海市閔行區(qū)東川路800號
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機構(gòu)
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上海交達(dá)專利事務(wù)所
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代理人
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王錫麟;王桂忠
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國省代碼
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上海;31
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主權(quán)項
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一種用轉(zhuǎn)錄因子提高長春花毛狀根萜類吲哚生物堿含量的方法，其特征在于，從長春花中克隆orca3和g10h基因，構(gòu)建含所述DNA分子的植物表達(dá)載體，用發(fā)根農(nóng)桿菌介導(dǎo)，將orca3和g10h基因同時導(dǎo)入長春花細(xì)胞并再生出毛狀根，PCR和熒光定量PCR檢測外源目的基因orca3和g10h的整合和表達(dá)情況，液相色譜測定長春花毛狀根中生物堿含量。
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摘要
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本發(fā)明是一種生物技術(shù)領(lǐng)域的用轉(zhuǎn)錄因子提高長春花毛狀根萜類吲哚生物堿含量的方法。本發(fā)明從長春花中克隆str和g10h基因，構(gòu)建含str和g10h基因的植物表達(dá)載體，遺傳轉(zhuǎn)化長春花獲得轉(zhuǎn)基因長春花毛狀根，液相色譜法測定長春花毛狀根中生物堿含量，熒光定量PCR測定長春花毛狀根生物堿生物合成相關(guān)基因的表達(dá)。本發(fā)明獲得的轉(zhuǎn)基因長春花毛狀根中重要生物堿的含量顯著提高，其中長春堿含量比非轉(zhuǎn)化對照根提高了234倍，從而提供了一種提高長春花毛狀根生物堿的方法，也為生產(chǎn)具重要臨床需求的抗癌藥物長春堿和長春新堿提供了一種新方法。
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國際公布
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