公開(公告)號 | CN1208466C |
公開(公告)日 | 2005.06.29 |
申請(專利)號 | CN03138975.9 |
申請日期 | 2003.08.04 |
專利名稱 | 一種具有抗腫瘤活性的硫酸半乳低聚糖的制備方法 |
主分類號 | C12P19/00 |
分類號 | C12P19/00;A61P35/00;C07H3/06 |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權 | |
申請(專利權)人 | 中國海洋大學 |
發(fā)明(設計)人 | 牟海津;江曉路;管華詩 |
地址 | 266003 山東省青島市魚山路5號 |
頒證日 | |
國際申請 | |
進入國家日期 | |
專利代理機構 | 青島海昊知識產(chǎn)權事務所有限公司 |
代理人 | 崔清晨 |
國省代碼 | 山東;37 |
主權項 | 一種具有抗腫瘤活性的硫酸半乳低聚糖的制備方法,包括配制κ-卡拉膠底物,加入κ-卡拉膠酶粉,進行酶解反應,反應后用沸水浴加熱使酶失活,離心去除酶解抗性片段,用乙醇沉淀收集可溶性酶解低聚糖,濃縮干燥,磺化修飾后,經(jīng)乙醇反復洗滌和真空抽濾并干燥,其特征是所用的κ-卡拉膠酶由海洋噬纖維菌產(chǎn)生,在所述的濃縮干燥后對酶解低聚糖進行磺化修飾;所述的酶解反應條件為5單位κ-卡拉膠酶粉加入到含2gκ-卡拉膠的100ml蒸餾水中,于32℃150r/min振蕩反應12h,沸水浴加熱并冷卻后,3000r/min離心7min,向上清液加入1倍體積的乙醇去除分子量大的組分,可溶性組分于60℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮,然后加入3倍體積的乙醇使低聚糖得到沉淀,經(jīng)70℃烘干后得到卡拉膠酶解片段;所述的磺化修飾條件為冰鹽浴條件下加5ml甲酰胺與15ml氯磺酸反應,于水浴中加入5g烘干的卡拉膠低聚糖制品,升溫至68℃,反應2-4h。 |
摘要 | 一種具有抗腫瘤活性的硫酸半乳低聚糖的制備方法,包括配制κ-卡拉膠底物,加入κ-卡拉膠酶粉,反應后用沸水浴加熱使酶失活,離心去除酶解抗性片段,用乙醇沉淀收集可溶性酶解低聚糖,濃縮干燥,磺化衍生后,經(jīng)乙醇反復洗滌和真空抽濾并干燥,其特征是所用的κ-卡拉膠酶由海洋微生物產(chǎn)生,在所述的濃縮干燥后對酶解低聚糖進行化學修飾。本發(fā)明將酶法降解和化學修飾相結合,其優(yōu)點是制備過程簡單、產(chǎn)物得率高、質(zhì)量穩(wěn)定、在制備過程中活性基團不受破壞,并且該產(chǎn)品具有抗腫瘤活性,具備抗腫瘤藥物的開發(fā)潛力。 |
國際公布 |