公開(公告)號
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CN1824327A
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公開(公告)日
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2006.08.30
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申請(專利)號
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CN200510134964.6
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申請日期
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2005.12.27
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專利名稱
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一種用雞MHC恒定鏈基因片段引導的核酸疫苗制備方法
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主分類號
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A61K48/00(2006.01)I
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分類號
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A61K48/00(2006.01)I;A61P37/04(2006.01)I
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權
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申請(專利權)人
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安徽農業(yè)大學
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發(fā)明(設計)人
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余為一;仲大蓮;李槿年
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地址
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230036安徽省合肥市長江西路130號
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構
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合肥誠興知識產權代理有限公司
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代理人
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宣圣義
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國省代碼
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安徽;34
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主權項
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一種用雞MHC恒定鏈基因片段引導的核酸疫苗制備方法,其特征在于: (1)用含連接真核表達質粒酶切位點和雞MHC恒定鏈基因片段起始區(qū)核苷酸序列的一對引物,經PCR從雞脾細胞mRNA克隆雞恒定鏈基因片段5’端1至83核苷酸序列,作為引導片段,并經過DNA序列測定鑒定: (2)用含雞MHC恒定鏈基因片段終止區(qū)、特定病原體保護性抗原或抗原表位基因片段起始區(qū)及終止區(qū)及真核表達質粒的酶切位點核苷酸序列的引物,經過PCR從病原體mRNA克隆并獲得抗原或抗原表位基因片段; (3)用含連接真核表達質粒酶切位點和抗原表位基因片段起始區(qū)核苷酸序列和病原保護性抗原或抗原表位基因片段終止區(qū)、真核表達質粒的酶切位點核苷酸序列的引物,經過PCR從已制備的雞MHC恒定鏈基因片段和特定病原體抗原或抗原表位基因片段獲得融合基因片段; (4)應用限制性內切酶使雞MHCII恒定鏈基因片段的-5′端與保護性抗原融合基因片段的的-3′端成粘性末端,經連接酶作用定向插入真核表達載體。
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摘要
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一種用雞MHC恒定鏈基因片段引導的核酸疫苗制備方法屬疫苗制備技術領域。其所要解決的技術問題是:通過制備含編碼雞MHC恒定鏈和特定病原體保護性抗原表位核苷酸序列的核酸疫苗,提供一種既安全、又高效的新型疫苗型。其技術要點是:先制備雞MHC定鏈基因片段,再制備特定病原體保護性抗原或抗原表位基因片段;再制備含雞MHC恒定鏈與特定病原體保護性抗原或抗原表位的融合基因片段;最后將雞MHC恒定鏈與特定病原體保護性抗原融合基因片段定向插入真核表達載體,即得到本發(fā)明的核酸疫苗。與現(xiàn)有的疫苗相比較,本發(fā)明的核酸疫苗由于不存在病原返祖和變異的可能,所以安全可靠;且可提高免疫應答效果。
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國際公布
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