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用發(fā)根農(nóng)桿菌遺傳轉(zhuǎn)化獲得產(chǎn)鬼臼毒素的西藏桃兒七毛狀根的方法及產(chǎn)物

公開(公告)號(hào) CN1769444A  
公開(公告)日 2006.05.10  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN200510057282.X  
申請(qǐng)日期 2005.09.21  
專利名稱 用發(fā)根農(nóng)桿菌遺傳轉(zhuǎn)化獲得產(chǎn)鬼臼毒素的西藏兒七毛狀根的方法及產(chǎn)物  
主分類號(hào) C12N15/09(2006.01)I  
分類號(hào) C12N15/09(2006.01)I;C12N15/82(2006.01)I;C12N5/04(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;A01H5/00(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 蘭小中;鮑隆友;廖志華;李春燕  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 蘭小中;鮑隆友;廖志華;李春燕  
地址 860000西藏自治區(qū)林芝地區(qū)八一鎮(zhèn)學(xué)院路8號(hào)西藏農(nóng)牧學(xué)院林學(xué)系  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 重慶華科專利事務(wù)所  
代理人 海燕  
國(guó)省代碼 西藏;54  
主權(quán)項(xiàng) 一種獲得產(chǎn)鬼臼毒素西藏桃兒七毛狀根的方法,特征在于采用轉(zhuǎn)基因技術(shù),用發(fā)根農(nóng)桿菌遺傳轉(zhuǎn)化西藏桃兒七的細(xì)胞、組織、器官、植株; 其步驟如下: (1)西藏桃兒七無(wú)菌外植體的獲得; (2)采用轉(zhuǎn)基因方法轉(zhuǎn)移發(fā)根農(nóng)桿菌的Ri質(zhì)粒的T-DNA到西藏桃兒七細(xì)胞、組織、器官、植株中,轉(zhuǎn)基因方法選擇發(fā)根農(nóng)桿菌Ri質(zhì)粒介導(dǎo)遺傳轉(zhuǎn)化、基因槍法介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化、花粉管通道介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)化或生殖細(xì)胞浸泡法介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)化,步驟如下: A、活化發(fā)根農(nóng)桿菌; B、發(fā)根農(nóng)桿菌浸染西藏桃兒七無(wú)菌外植體; C、發(fā)根農(nóng)桿菌與西藏桃兒七無(wú)菌外植體的共培養(yǎng); D、西藏桃兒七的除菌培養(yǎng); (3)西藏桃兒七毛狀根的獲得與繼代培養(yǎng); (4)西藏桃兒七毛狀根的分子檢測(cè); (5)西藏桃兒七毛狀根中鬼臼毒素的檢測(cè)。  
摘要 本發(fā)明提供了一種利用基因工程技術(shù)遺傳轉(zhuǎn)化西藏桃兒七,獲得生產(chǎn)鬼臼毒素的西藏桃兒七的毛狀根的方法。涉及包含發(fā)根農(nóng)桿菌遺傳轉(zhuǎn)化西藏桃兒七的方法,遺傳轉(zhuǎn)化獲得可生產(chǎn)鬼臼毒素的西藏桃兒七毛狀根。其過程是用發(fā)根農(nóng)桿菌遺傳轉(zhuǎn)化西藏桃兒七,獲得了西藏桃兒七毛狀根,經(jīng)分子檢測(cè)確為遺傳轉(zhuǎn)化的毛狀根,HPLC檢測(cè)表明遺傳轉(zhuǎn)化獲得的西藏桃兒七毛狀根能夠生產(chǎn)鬼臼毒素。本方法可以為鬼臼毒素的生產(chǎn)提供一種新型可持續(xù)的新型藥源。  
國(guó)際公布  
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