| 公開(公告)號 | CN1244694C |
| 公開(公告)日 | 2006.03.08 |
| 申請(專利)號 | CN00113802.2 |
| 申請日期 | 2000.04.28 |
| 專利名稱 | 牦牛血超氧化物歧化酶制備方法 |
| 主分類號 | C12N9/08(2006.01)I |
| 分類號 | C12N9/08(2006.01)I;C07K1/36(2006.01)I;A61K38/44(2006.01)I;A61K8/66(2006.01)I;A23L1/30(2006.01)I;A61P25/28(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 蘇 普 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 蘇 普 |
| 地址 | 730050甘肅省蘭州市小西湖鹼溝沿211號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 蘭州中科華西專利代理有限公司 |
| 代理人 | 王玉雙 |
| 國省代碼 | 甘肅;62 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種牦牛血超氧化物歧化酶的制備方法，其特征在于包括下述工藝步驟：①將牦牛血除去血漿得紅血球，用紅血球體積的2-4倍、0.5-1.5％的鹽液清洗紅血球2-6次，再往紅血球內(nèi)加入體積比為1∶(0.5-1.5)的水，攪拌后使其溶血；②將溶血液冷卻至-4-4℃，攪拌加入溶血液體積的0.15-0.35倍、溫度為至少-10℃、90-98％的醇和溶血液體積的0.1-0.2倍、90-98％的氯仿，混合攪拌，再加入溶血液體積的0.2倍的水稀釋，離心去除雜蛋白，得蛋黃色上清液，測定其SOD總活力；③將乙醇相上清液升至室混，加入上清液體積的0.5-1.5倍的固體磷酸氫二鉀溶解，靜置分離得上清液，上相液含有氯仿、醇和少量鹽，離心上相液得淡藍(lán)色上清液；④將③步中最后的上清液冷卻至至少0℃，邊攪邊加入上清液體積的0.5-1倍、溫度為至少-10℃的丙酮，離心后得藍(lán)綠色沉淀，然后往沉淀物中加入沉淀物體積的0.5-1.5倍的水溶解；溶解液放透析袋中相對于2.5mM、pH7.6的KH2PO4-K2HPO4緩沖液透析，離心透析液得淡綠色清液；⑤將淡綠色清液超濾即得牦牛血紅胞超氧化物歧化酶。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種牦牛血超氧化物歧化酶及其提取純化工藝和應(yīng)用，所述的超氧化物歧化酶是將牦牛血經(jīng)去血漿、洗滌、溶血、抽提去雜蛋白、分離、沉淀、透析、超濾濃縮后得到牦牛血SOD；本發(fā)明的酶總活力高達(dá)90萬單位/l，平均酶比活為13000u/mg，本發(fā)明的工藝可減少SOD的酶總活損失，得率高、生產(chǎn)周期短、使用試劑省、操作簡單；本發(fā)明可作藥品、保健品和食品、化妝品添加劑用。 |
| 國際公布 |
