| 公開(公告)號 | CN1743457A |
| 公開(公告)日 | 2006.03.08 |
| 申請(專利)號 | CN200410073165.8 |
| 申請日期 | 2004.10.11 |
| 專利名稱 | 人骨形成蛋白-4成熟肽的大腸桿菌高表達載體和制備方法 |
| 主分類號 | C12N15/70(2006.01)I |
| 分類號 | C12N15/70(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | |
| 申請(專利權)人 | 中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學 |
| 發(fā)明(設計)人 | 陳蘇民;秦 云;陳南春 |
| 地址 | 710049陜西省西安市長樂西路15號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構 | 西安通大專利代理有限責任公司 |
| 代理人 | 孫 楓 |
| 國省代碼 | 陜西;61 |
| 主權項 | 一種人骨形成蛋白-4成熟肽的大腸桿菌表達載體，其特征在于：所述的人骨形成蛋白-4成熟肽的大腸桿菌表達載體是指用分子克隆技術將從人體組織cDNA文庫中擴增得到人骨形成蛋白-4成熟肽的cDNA序列，再克隆重組獲得的大腸桿菌表達載體pDH2-hB4m，該載體能夠在大腸桿菌中高水平表達出人骨形成蛋白-4成熟肽，載體DNA全長4,014個核苷酸對，全部核苷酸序列如下： 1AGATCTCTCTCACCTACCAAACAATGCCCCCCTGCAAAAAATAAATTCATATAAAAAACA TCTAGAGAGAGTGGATGGTTTGTTACGGGGGGACGTTTTTTATTTAAGTATATTTTTTGT 61TACAGATAACCATCTGCGGTGATAAATTATCTCTGGCGGTGTTGACATAAATACCACTGG ATGTCTATTGGTAGACGCCACTATTTAATAGAGACCGCCACAACTGTATTTATGGTGACC 121CGGTGATACTGAGCACATCAGCAGGACGCACTGACCACCATGAAGGTGACGCTCTTAAAA GCCACTATGACTCGTGTAGTCGTCCTGCGTGACTGGTGGTACTTCCACTGCGAGAATTTT 181ATTAAGCCCTGAAGAAGGGCAGCATTCAAAGCAGAAGGCTTTGGGGTGTGTGATACGAAA TAATTCGGGACTTCTTCCCGTCGTAAGTTTCGTCTTCCGAAACCCCACACACTATGCTTT 241CGAAGCATTGGTTAAAAATTAAGGAGAATTCATGAAGCATCACTCACAGCGGGCCAGGAA GCTTCGTAACCAATTTTTAATTCCTCTTAAGTACTTCGTAGTGAGTGTCGCCCGGTCCTT 301GAAGAATAAGAACTGCCGGCGCCACTCGCTCTATGTGGACTTCAGCGATGTGGGCTGGAA CTTCTTATTCTTGACGGCCGCGGTGAGCGAGATACACCTGAAGTCGCTACACCCGACCTT 361TGACTGGATTGTGGCCCCACCAGGCTACCAGGCCTTCTACTGCCATGGGGACTGCCCCTT ACTGACCTAACACCGGGGTGGTCCGATGGTCCGGAAGATGACGGTACCCCTGACGGGGAA 421TCCACTGGCTGACCACCTCAACTCAACCAACCATGCCATTGTGCAGACCCTGGTCAATTC AGGTGACCGACTGGTGGAGTTGAGTTGGTTGGTACGGTAACACGTCTGGGACCAGTTAAG 481TGTCAATTCCAGTATCCCCAAAGCCTGTTGTGTGCCCACTGAACTGAGTGCCATCTCCAT ACAGTTAAGGTCATAGGGGTTTCGGACAACACACGGGTGACTTGACTCACGGTAGAGGTA 541GCTGTACCTGGATGAGTATGATAAGGTGGTACTGAAAAATTATCAGGAGATGGTAGTAGA CGACATGGACCTACTCATACTATTCCACCATGACTTTTTAATAGTCCTCTACCATCATCT 601GGGATGTGGGTGCCGCTGATAATCTAGAGTCGACCTGCAGGCATGCAAGCTTCTGTTTTG CCCTACACCCACGGCGACTATTAGATCTCAGCTGGACGTCCGTACGTTCGAAGACAAAAC 661GCGGATGAGAGAAGATTTTCAGCCTGATACAGCTTAAATCAGAACGCAGAAGCGGTCTGA CGCCTACTCTCTTCTAAAAGTCGGACTATGTCGAATTTAGTCTTGCGTCTTCGCCAGACT 721TAAAACAGAATTTGCCTCCCGGCAGTAGCGCGGTGGTCCCACCTGACCCCATGCCGAACT ATTTTGTCTTAAACGGAGGGCCGTCATCGCGCCACCAGGGTGGACTGGGGTACGGCTTGA 781CAGAAGTGAAACGCCGTAGCGCCGATGGTAGTGTGGGGTCTCCCCATGCGAGAGTAGCCA GTCTTCACTTTGCGGCATCGCGGCTACCATCACACCCCAGAGGGGTACGCTCTCATCGGT 841ACTGCCAGGCATCAAATAAAACGAAAGGCTCAGTCGAAAGACTGGGCCTTTCGTTTTATC TGACGGTCCGTAGTTTATTTTGCTTTCCGAGTCAGCTTTCTGACCCGGAAAGCAAAATAG 901TGTTGTTTGTCGGTGAACGCTCTCCTGAGTAGGACAAATCCGCCGGGAGCGGATTTGAAC ACAACAAACAGCCACTTGCGAGAGGACTCATCCTGTTTAGGCGGCCCTCGCCTAAACTTG 961GTTGCGAAGCAACGGCCCGGAGGGTGGCGGGCAGGACGCCCGCCATAAACTGCCAGGCAT CAACGCTTCGTTGCCGGGCCTCCCACCGCCCGTCCTGCGGGCGGTATTTGACGGTCCGTA 1021CAAATTAAGCAGAAGGCCATCCTGACGGATGGCCTTTTTGCGTTTCTACAAACTCTTTGT GTTTAATTCGTCTTCCGGTAGGACTGCCTACCGGAAAAACGCAAAGATGTTTGAGAAACA 1081TTATTTTTCTAAATACATTCAAATATGTATCCGCTCATGAGACAATAACCCTGATAAATG AATAAAAAGATTTATGTAAGTTTATACATAGGCGAGTACTCTGTTATTGGGACTATTTAC 1141CTTCAATAATATTGAAAAAGGAAGAGTATGAGTATTCAACATTTCCGTGTCGCCCTTATT GAAGTTATTATAACTTTTTCCTTCTCATACTCATAAGTTGTAAAGGCACAGCGGGAATAA 1201CCCTTTTTTGCGGCATTTTGCCTTCCTGTTTTTGCTCACCCAGAAACGCTGGTGAAAGTA GGGAAAAAACGCCGTAAAACGGAAGGACAAAAACGAGTGGGTCTTTGCGACCACTTTCAT 1261AAAGATGCTGAAGATCAGTTGGGTGCACGAGTGGGTTACATCGAACTGGATCTCAACAGC TTTCTACGACTTCTAGTCAACCCACGTGCTCACCCAATGTAGCTTGACCTAGAGTTGTCG 1321GGTAAGATCCTTGAGAGTTTTCGCCCCGAAGAACGTTTTCCAATGATGAGCACTTTTAAA CCATTCTAGGAACTCTCAAAAGCGGGGCTTCTTGCAAAAGGTTACTACTCGTGAAAATTT 1381GTTCTGCTATGTGGCGCGGTATTATCCCGTATTGACGCCGGGCAAGAGCAACTCGGTCGC CAAGACGATACACCGCGCCATAATAGGGCATAACTGCGGCCCGTTCTCGTTGAGCCAGCG 1441CGCATACACTATTCTCAGAATGACTTGGTTGAGTACTCACCAGTCACAGAAAAGCATCTT GCGTATGTGATAAGAGTCTTACTGAACCAACTCATGAGTGGTCAGTGTCTTTTCGTAGAA 1501ACGGATGGCATGACAGTAAGAGAATTATGCAGTGCTGCCATAACCATGAGTGATAACACT TGCCTACCGTACTGTCATTCTCTTAATACGTCACGACGGTATTGGTACTCACTATTGTGA 1561GCGGCCAACTTACTTCTGACAACGATCGGAGGACCGAAGGAGCTAACCGCTTTTTTGCAC CGCCGGTTGAATGAAGACTGTTGCTAGCCTCCTGGCTTCCTCGATTGGCGAAAAAACGTG 1621AACATGGGGGATCATGTAACTCGCCTTGATCGTTGGGAACCGGAGCTGAATGAAGCCATA TTGTACCCCCTAGTACATTGAGCGGAACTAGCAACCCTTGGCCTCGACTTACTTCGG |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及人骨形成蛋白-4成熟肽的大腸桿菌表達載體及其所表達的人骨形成蛋白4成熟肽的制備方法。所述的載體是指用分子克隆技術重組獲得的大腸桿菌表達載體pDH2-hB4m，載體全長4,014個核苷酸對；所述利用表達載體pDH2-hB4m制備具有生物學活性人骨形成蛋白-4成熟肽的方法，包括宿主菌轉化表達、培養(yǎng)、純化、復性、活性鑒定步驟。本發(fā)明所提供的大腸桿菌高表達載體和用該載體轉化宿主菌表達人骨形成蛋白-4成熟肽的制備方法，可以作為新的基因工程產(chǎn)品及其方法推向臨床治療、診斷和科學研究應用，并推向市場。 |
| 國際公布 |
