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來自有蹄動(dòng)物胚胎的培養(yǎng)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞系

公開(公告)號(hào) CN100335625C  
公開(公告)日 2007.09.05  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN97194755.4  
申請(qǐng)日期 1997.03.24  
專利名稱 來自有蹄動(dòng)物胚胎的培養(yǎng)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞系  
主分類號(hào) C12N15/00(2006.01)I  
分類號(hào) C12N15/00(2006.01)I;C12N5/00(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 1996.4.1 US 08/626,054  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 馬薩諸塞大學(xué)馬薩諸塞州高等教育公立研究所  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 S·L·斯蒂克;P·J·戈盧克  
地址 美國馬薩諸塞州  
頒證日  
國際申請(qǐng) 1997-03-24 PCT/US1997/004736  
進(jìn)入國家日期 1998.11.19  
專利代理機(jī)構(gòu) 中國國際貿(mào)易促進(jìn)委員會(huì)專利商標(biāo)事務(wù)所  
代理人 黃革生  
國省代碼 美國;US  
主權(quán)項(xiàng) 用于產(chǎn)生有蹄類培養(yǎng)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)CICM細(xì)胞的方法,該方法包括以下步驟:(i)由有蹄類胚泡獲取內(nèi)細(xì)胞團(tuán)ICM或由有蹄類前胚泡期胚胎獲取ICM祖細(xì)胞;(ii)在可保證形成多層細(xì)胞集落的條件下,于飼養(yǎng)層培養(yǎng)物上培養(yǎng)所說的ICM或ICM祖細(xì)胞;(iii)從包含于培養(yǎng)的ICM或ICM祖細(xì)胞集落內(nèi)的細(xì)胞中鑒別出具有以下特性的細(xì)胞:(a)細(xì)胞質(zhì)/細(xì)胞核的體積比例較小,為大約10/90-50/50;(b)具有胞質(zhì)小泡;(c)單個(gè)細(xì)胞較小,直徑為大約10-20μm;(iv)將一個(gè)或一群所說的鑒定好的細(xì)胞與細(xì)胞集落的余下部分分離開;和(v)在可使飼養(yǎng)細(xì)胞層與分離細(xì)胞或細(xì)胞群之間至少存在一些物理接觸的條件下,將所說的已分離的ICM細(xì)胞或ICM祖細(xì)胞傳代到另一飼養(yǎng)層培養(yǎng)物上,以產(chǎn)生CICM細(xì)胞。  
摘要 本發(fā)明提供了來自有蹄動(dòng)物尤其是豬和牛的新的培養(yǎng)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞和細(xì)胞系,以及它們的制備方法。在延長培養(yǎng)期間,本發(fā)明中的培養(yǎng)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)(CICM)具有與未分化的發(fā)育中胚胎的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)相似的形態(tài),還與其相同或基本相似地表達(dá)細(xì)胞標(biāo)記。可將異源DNA導(dǎo)入本發(fā)明的培養(yǎng)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)(CICM)細(xì)胞和細(xì)胞系中以產(chǎn)生對(duì)轉(zhuǎn)基因胚胎、胎兒和/或后代生產(chǎn)有用的轉(zhuǎn)基因細(xì)胞,例如,通過核移植方法。  
國際公布 1997-10-09 WO1997/037009 英  
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