| 公開(公告)號 | CN1318443C |
| 公開(公告)日 | 2007.05.30 |
| 申請(專利)號 | CN01812855.6 |
| 申請日期 | 2001.05.16 |
| 專利名稱 | 含游離半胱氨酸殘基的蛋白重折疊的方法 |
| 主分類號 | C07K1/113(2006.01)I |
| 分類號 | C07K1/113(2006.01)I;C07K14/535(2006.01)I;C07K14/505(2006.01)I;C07K14/515(2006.01)I;C07K14/56(2006.01)I;C07K14/61(2006.01)I;C07K14/78(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | 2000.5.16 US 60/204,617 |
| 申請(專利權(quán))人 | 博爾德生物技術(shù)公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 瑪麗·S·羅森達(dá)爾;喬治·N·考克斯;丹尼爾·H·多爾蒂 |
| 地址 | 美國科羅拉多州 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | 2001-05-16 PCT/US2001/016088 |
| 進(jìn)入國家日期 | 2003.01.15 |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 北京市柳沈律師事務(wù)所 |
| 代理人 | 巫肖南;封新琴 |
| 國省代碼 | 美國;US |
| 主權(quán)項 | 制備不溶或聚集蛋白的重折疊可溶形式的方法，其中所述蛋白是生長激素超基因家族成員且含一個或多個添加的游離半胱氨酸殘基，所述方法包括步驟：a.使宿主細(xì)胞表達(dá)含一個或多個添加的游離半胱氨酸殘基的蛋白，所述蛋白是不溶或聚集形式的生長激素超基因家族成員；b.用化學(xué)方法、酶學(xué)或物理方法裂解細(xì)胞；c.使不溶或聚集的蛋白接觸變性試劑、還原劑和半胱氨酸阻斷劑而溶解和還原不溶或聚集的蛋白；和d.通過使變性試劑和還原劑的濃度降低到足以允許蛋白復(fù)性為可溶的生物活性形式的水平而重折疊蛋白，其中所述半胱氨酸阻斷劑與該蛋白中的至少一個游離半胱氨酸殘基形成可逆混合二硫化物。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及制備具有游離半胱氨酸的重折疊不溶或聚集蛋白的新方法，其中宿主細(xì)胞表達(dá)的蛋白接觸半胱氨酸阻斷劑。然后，可修飾該新方法制備的可溶重折疊蛋白以增加它們的效力。這種修飾包括連接PEG部分以形成PEG化蛋白。 |
| 國際公布 | 2001-11-22 WO2001/087925 英 |
