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非酰胺化ω-芋螺毒素MⅦA及其制備方法和應(yīng)用

公開(公告)號 CN1304422C  
公開(公告)日 2007.03.14  
申請(專利)號 CN200510060781.4  
申請日期 2005.09.15  
專利名稱 非酰胺化ω-芋螺毒素M A 及其制備方法和應(yīng)用  
主分類號 C07K14/435(2006.01)I  
分類號 C07K14/435(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;A61K38/17(2006.01)I;A61P29/00(2006.01)I;A61P25/04(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 浙江大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計)人 詹金彪;王 峰  
地址 310027浙江省杭州市西湖區(qū)浙大路38號  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構(gòu) 杭州求是專利事務(wù)所有限公司  
代理人 張法高;趙杭麗  
國省代碼 浙江;33  
主權(quán)項 非酰胺化ω-芋螺毒素M VIIA,其特征是:具有SEQ ID NO:1的基酸序列,分子量為2639,該多肽分子中Cys1與Cys16、Cys8與Cys20、Cys15與Cys25分別形成三對二硫鍵,C-端為非酰胺化Cys。  
摘要 本發(fā)明提供非酰胺化ω-芋螺毒素M ⅦA(ω-CTX M ⅦA),是根據(jù)已知的ω-CTX M ⅦA氨基酸序列,設(shè)計并合成編碼非酰胺化ω-CTX M ⅦA的DNA片段,對表達載體pPIC9進行Xho I/EcoR I雙酶切,經(jīng)連接構(gòu)建成重組表達質(zhì)粒pPIC9-CTX,用電穿孔法轉(zhuǎn)化畢赤酵母,經(jīng)篩選得到高產(chǎn)菌株,并由甲醇誘導(dǎo)表達。本發(fā)明在畢赤酵母中成功表達了非酰胺化的ω-CTX M ⅦA,生產(chǎn)新型的非酰胺化的ω-CTX M ⅦA,制備工藝簡單穩(wěn)定,生產(chǎn)成本較低。動物實驗證明具有很高的鎮(zhèn)痛活性,其鎮(zhèn)痛效力是嗎啡的900倍,可用于鎮(zhèn)痛藥物的開發(fā)。  
國際公布  
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