| 公開(公告)號 | CN1298734C |
| 公開(公告)日 | 2007.02.07 |
| 申請(專利)號 | CN200510042587.3 |
| 申請日期 | 2005.03.25 |
| 專利名稱 | 一種聚乙二醇修飾蛋白質(zhì)α-氨基的方法 |
| 主分類號 | C07K1/107(2006.01)I |
| 分類號 | C07K1/107(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 山東格蘭百克生物制藥有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 張雪山;徐宜鐵 |
| 地址 | 250014山東省濟南市歷下區(qū)漿水泉路中段 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | 濟南舜源專利事務(wù)所有限公司 |
| 代理人 | 袁春鵑 |
| 國省代碼 | 山東;37 |
| 主權(quán)項 | 一種聚乙二醇修飾蛋白質(zhì)α-氨基的方法，其特征在于采用氨基保護劑將處于蛋白質(zhì)活性位點及受體結(jié)合部位易于反應(yīng)的賴氨酸氨基封閉和選用具有氮端優(yōu)勢反應(yīng)的聚乙二醇活化形式相結(jié)合的方式對蛋白質(zhì)氮端不處于活性位點或受體結(jié)合部位的蛋白質(zhì)進行特異性修飾；其步驟如下：(A)用二甲基馬來酸酐封閉處于蛋白質(zhì)活性位點及受體結(jié)合部位的ε氨基，二甲基馬來酸酐的用量為蛋白質(zhì)α-氨基與ε氨基mol數(shù)之和的8～12倍；(B)用醛基化的單甲氧基聚乙二醇對未封閉的蛋白質(zhì)氮端α-氨基進行修飾，醛基化的單甲氧基聚乙二醇得用量為蛋白質(zhì)α-氨基mol數(shù)的3～12倍，修飾反應(yīng)需要有與聚乙二醇等量的NaBH3CN存在；(C)采用0.1mol/L的HCl調(diào)節(jié)pH至5.5-6.5，去除氨基保護劑；(D)提純。 |
| 摘要 | 本發(fā)明提供了一種聚乙二醇修飾蛋白質(zhì)α-氨基的方法。利用氨基保護劑將蛋白質(zhì)中能與PEG反應(yīng)的賴氨酸ε氨基封閉，以活化的具有與α氨基優(yōu)勢反應(yīng)的PEG進行氨基修飾，再將氨基保護劑去除，得到氮端特異性PEG修飾的蛋白質(zhì)衍生物。該方法所得產(chǎn)品轉(zhuǎn)化率高，90％～95％；分子量與結(jié)構(gòu)均一，均為蛋白質(zhì)α-氨基N末端連接一個PEG分子，沒有一個蛋白連接幾個PEG的產(chǎn)物，也沒有其他位點連接PEG的異構(gòu)現(xiàn)象；體外活性降低很少，基本保持不變；體內(nèi)活性實驗明顯長效，ANC升高幅度明顯。 |
| 國際公布 |
