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包含基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)特性的DNA序列及檢測(cè)和應(yīng)用這些DNA序列的方法

公開(kāi)(公告)號(hào) CN1266282C  
公開(kāi)(公告)日 2006.07.26  
申請(qǐng)(專(zhuān)利)號(hào) CN02813571.7  
申請(qǐng)日期 2002.06.14  
專(zhuān)利名稱(chēng) 包含基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)特性的DNA序列及檢測(cè)和應(yīng)用這些DNA序列的方法  
主分類(lèi)號(hào) C12Q1/68(2006.01)I  
分類(lèi)號(hào) C12Q1/68(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 2001.7.4 EP 01202581.3;2001.7.5 US 60/303,199  
申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 科羅邁吉尼科斯公司  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 阿里·彼得·奧特;阿圖爾·萊奧·克魯克貝格  
地址 荷蘭阿姆斯特丹  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng) 2002-06-14 PCT/NL2002/000390  
進(jìn)入國(guó)家日期 2004.01.05  
專(zhuān)利代理機(jī)構(gòu) 永新專(zhuān)利商標(biāo)代理有限公司  
代理人 林曉紅  
國(guó)省代碼 荷蘭;NL  
主權(quán)項(xiàng) 一種具有基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)特性的分離的和/或重組的DNA序列,其中所述序列由選自以下一組的一種序列組成:(a)選自圖26的SEQID:1-119的一種序列;(b)選自圖26的SEQID:1-119的一種序列的功能性片段,衍生物或同源物,所述序列具有通過(guò)包括以下步驟的一種方法確定的基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)特性:細(xì)胞在存在250g/ml的zeocin和0.1ng/ml的強(qiáng)力霉素下生長(zhǎng)5周;挑選5周后還在生長(zhǎng)的菌落;在從所述菌落中分離的質(zhì)粒中檢驗(yàn)具有基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)特性的DNA序列的存在;其中所述細(xì)胞是U-2OS人骨肉瘤細(xì)胞系,其表達(dá)在Tet-Off轉(zhuǎn)錄調(diào)控系統(tǒng)控制下的含有LexADNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域和HP1或HPC2的編碼區(qū)的LexA-阻抑物融合蛋白,和其中所述細(xì)胞包含一個(gè)質(zhì)粒,其包含克隆到所述質(zhì)粒中的多接頭序列中的具有轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)特性的DNA片段,所述多接頭序列位于4個(gè)LexA操縱子位點(diǎn)和控制zeocin抗性基因的SV40啟動(dòng)子之間,且其中如果不是存在所述具有轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)特性的DNA片段,所述zeocin抗性基因?qū)?huì)因?yàn)長(zhǎng)exA-阻抑物融合蛋白的表達(dá)而被抑制。  
摘要 本發(fā)明涉及調(diào)節(jié)序列的系統(tǒng)說(shuō)明及鑒別。本發(fā)明提供了可以鑒別調(diào)節(jié)序列的篩選和檢測(cè)方法。本發(fā)明還提供了調(diào)節(jié)序列及其在各種領(lǐng)域中的應(yīng)用,例如但不限于蛋白質(zhì)生產(chǎn)、診斷、轉(zhuǎn)基因植物及動(dòng)物,及治療領(lǐng)域。  
國(guó)際公布 2003-01-16 WO2003/004704 英  
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