公開(公告)號
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CN1262659C
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公開(公告)日
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2006.07.05
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申請(專利)號
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CN200410000794.8
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申請日期
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2004.01.19
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專利名稱
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一種人蛋白C的表達方法及其專用引物與表達載體
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主分類號
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C12N15/81(2006.01)I
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分類號
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C12N15/81(2006.01)I;C12P19/34(2006.01)I
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院野戰(zhàn)輸血研究所
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發(fā)明(設(shè)計)人
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章金剛;賈莉瑋;呂茂民
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地址
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100850北京市太平路27號
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構(gòu)
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北京紀凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司
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代理人
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魯 兵
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國省代碼
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北京;11
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主權(quán)項
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一種人蛋白C的表達載體,是含有人蛋白C基因的重組畢赤酵母表達載體pPIC9-hPC。
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摘要
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本發(fā)明公開了一種人蛋白C的表達方法及其專用引物與表達載體。本發(fā)明所提供的擴增人蛋白C基因的專用引物為序列表中的SEQ ID №:1和SEQ ID №:2。人蛋白C的表達載體是含有人蛋白C基因的重組畢赤酵母表達載體pPIC9-hPC。表達人蛋白C的方法,是將重組畢赤酵母表達載體pPIC9-hPC轉(zhuǎn)化到畢赤酵母中,得到陽性克隆,誘導(dǎo)培養(yǎng)所述陽性克隆,表達人蛋白C。本發(fā)明采用基因克隆技術(shù),成功構(gòu)建了酵母表達載體pPIC9-hPC;利用電穿孔轉(zhuǎn)化方法,得到具有外源基因的酵母轉(zhuǎn)化子,表達的人蛋白C經(jīng)APTT法測定表明可延長血液凝固時間,起到了抗凝血的作用。本發(fā)明的方法在人蛋白C的生產(chǎn)中具有廣闊的工業(yè)前景。
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國際公布
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