| 公開(公告)號(hào) | CN1724677A |
| 公開(公告)日 | 2006.01.25 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200510084355.4 |
| 申請(qǐng)日期 | 2005.07.19 |
| 專利名稱 | 一種體外培養(yǎng)骨骼肌表達(dá)體系 |
| 主分類號(hào) | C12N15/85(2006.01)I |
| 分類號(hào) | C12N15/85(2006.01)I;C12N15/09(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;C12N15/65(2006.01)I;C12N15/79(2006.01)I |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 北京市腫瘤防治研究所 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 張志謙;宋 琳 |
| 地址 | 100034北京市西城區(qū)大紅羅廠街1號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 北京中北商標(biāo)專利事務(wù)所有限公司 |
| 代理人 | 吳 立 |
| 國(guó)省代碼 | 北京;11 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種體外培養(yǎng)骨骼肌表達(dá)體系，主要包括含目的基因的表達(dá)載體的構(gòu)建、表達(dá)載體轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞群及篩選、目的基因在宿主細(xì)胞中的表達(dá)和表達(dá)產(chǎn)物的分離純化、表達(dá)產(chǎn)物的活性檢測(cè)的步驟，其特征在于所述的表達(dá)載體是在pcDNA3.0基礎(chǔ)上，構(gòu)建的帶有myc10檢測(cè)標(biāo)簽及6×his純化標(biāo)簽的表達(dá)載體；且在所述的表達(dá)載體中插入人基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)信號(hào)序列(見序列1)。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及了一種體外培養(yǎng)骨骼肌表達(dá)體系，包括含目的基因的表達(dá)載體的構(gòu)建、表達(dá)載體轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞群及篩選、目的基因在宿主細(xì)胞中的表達(dá)和表達(dá)產(chǎn)物的分離純化等步驟，其特征在于所述的表達(dá)載體是在pcDNA3.0基礎(chǔ)上，構(gòu)建的帶有myc10檢測(cè)標(biāo)簽及6×his純化標(biāo)簽的表達(dá)載體；且在所述的表達(dá)載體中插入人基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)信號(hào)序列。本發(fā)明在表達(dá)載體中插入了基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)信號(hào)序列，增大了蛋白的分泌量；采用了QM7細(xì)胞作為宿主細(xì)胞表達(dá)蛋白，增大了蛋白的表達(dá)量；篩選出適合QM7細(xì)胞分化的無(wú)血清分化培養(yǎng)基，培養(yǎng)基造價(jià)低并且利于后期純化工作，且為PEX作為重組蛋白藥物進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)奠定了前期基礎(chǔ)。 |
| 國(guó)際公布 |
