| 公開(公告)號 | CN1233848C |
| 公開(公告)日 | 2005.12.28 |
| 申請(專利)號 | CN03132412.6 |
| 申請日期 | 2003.05.30 |
| 專利名稱 | 突變型雞Myostatin基因的檢測方法在雞育種中的應(yīng)用 |
| 主分類號 | C12Q1/68 |
| 分類號 | C12Q1/68 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 哈爾濱工業(yè)大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 朱大海;顧志良;李 暉;李 寧 |
| 地址 | 150001黑龍江省哈爾濱市南崗區(qū)西大直街92號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 哈爾濱市松花江專利商標(biāo)事務(wù)所 |
| 代理人 | 畢志銘 |
| 國省代碼 | 黑龍江;23 |
| 主權(quán)項 | 突變型雞Myostatin基因的檢測方法在雞育種中的應(yīng)用，其特征在于第一步：PCR引物的設(shè)計：根據(jù)本實驗室克隆的雞Myostatin基因組全序列設(shè)計了3對引物如下：P605′-TCCTATCAGGAAAACCTATC-3′P615′-ACCTCAAGGAAAATTCTGAG-3′P935′-CAACTTTCAGTAATAATGGAA-3′P945′-TGATAGGTTTTCCTGATAGGTA-3′P805′-CTAAACGTAGTAAAACAAAAGGCAGC-3′P815′-AACATTTATTTACAAAATATTGATG-3′第二步：雞基因組DNA的提��；第三步：PCR擴(kuò)增，PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系為10×PCRbuffer2.5μl，10mmol/LdNTPs2μl，20μmol/L上游引物1μl，20μmol/L下游引物1μl，Taq酶1.0U，15ng/μlDNA模板4.0μl，ddH2O13.3μl；PCR程序為94℃5min1個循環(huán)；94℃40s，57℃40s，72℃40s共35個循環(huán)；72℃8min1個循環(huán)；4℃保溫；第四步：SSCP分析，1μlPCR產(chǎn)物和5μlLoadingbuffer混合，98℃變性10min，冰浴5min，經(jīng)14％非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳分析后銀染顯色；第五步驟：(1)、用引物P80/P81進(jìn)行PCR-SSCP分析Mostatin基因是否是以下基因型：AAATGGATTCCTCGTGTTTGCAATGTATTTATTACGTATTBBATAGATTCCTCGTGTTTGCAGTGTATTTATTATGTATTABATA/GGATTCCTCGTGTTTGCAA/GTGTATTTATTAC/TGTATT(2)、用引物P93/P94進(jìn)行PCR-SSCP分析Mostatin基因是否是以下基因型：EEATTTTGATACTAAAGGGTCCAATAGTTAFFATTTTGATACTAGAGGGTCCAATAGTTAEFATTTTGATACTAA/GAGGGTCCAATAGTTA(3)、用引物P80/P81進(jìn)行PCR-SSCP分析Mostatin基因是否是以下基因型：CCTTGCTACAGAAATTGTTAAAAAACDDTTGCTACAGATATTGTTAAAAAACCDTTGCTACAGAA/TATTGTTAAAAAAC第六步驟：根據(jù)各基因型的以下特性選擇需要的種雞，腹脂重、腹脂率、初生重、胸肌率：AA＞AB＞BB胸肌重：EF＞FF＞EE胸肌重、胸肌率：CC＞CD＞DD。 |
| 摘要 | 突變型雞Myostatin基因的檢測方法在雞育種中的應(yīng)用，它涉及雞遺傳育種改良的生物技術(shù)。該突變型雞的Myostatin基因的核苷酸多態(tài)性為：G→A(304位)，A→G(322位)，C→T(334位)，G→A(167位)，7263A→A。本發(fā)明的育種方法按照如下步驟進(jìn)行：一、PCR引物的設(shè)計，二、雞基因組DNA的提��；三、PCR擴(kuò)增；四、SSCP分析；五、對被提取基因進(jìn)行分析；六、根據(jù)各基因型的特性選擇種雞。本發(fā)明是一種準(zhǔn)確、簡單、迅速、直接檢測Myostatin基因單核苷酸多態(tài)性方法，利用該方法可以對種雞進(jìn)行遺傳標(biāo)記輔助選擇育種，從而可以從根本上解決傳統(tǒng)遺傳育種中由于對肉雞生長速度過高追求，帶來的問題。 |
| 國際公布 |
