公開(公告)號 | CN1171991C |
公開(公告)日 | 2004.10.20 |
申請(專利)號 | CN02134313.6 |
申請日期 | 2002.07.08 |
專利名稱 | 人神經干細胞的培養(yǎng)方法 |
主分類號 | C12N5/00 |
分類號 | C12N5/00 |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權 | |
申請(專利權)人 | 徐如祥;姜曉丹 |
發(fā)明(設計)人 | 徐如祥;姜曉丹 |
地址 | 510282 廣東省廣州市工業(yè)大道253號珠江醫(yī)院神經外科 |
頒證日 | |
國際申請 | |
進入國家日期 | |
專利代理機構 | 廣州知友專利代理有限公司 |
代理人 | 宣國華 |
國省代碼 | 廣東;44 |
主權項 | 一種人神經干細胞的培養(yǎng)方法,其特征在于由以下步驟組成:(1)配制人神經干細胞培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基的配制步驟為:a、取DMEM和F12按1∶1混合而成的基礎培養(yǎng)液,加純凈水至濃度為10~25g/L,并充分攪拌溶解,制得細胞的一般基礎培養(yǎng)液;b、再取胰島素、L-谷氨酰胺、鹽酸丁二胺、硒化鈉、人轉鐵蛋白、氫化可的松、黃體酮依次加入基礎培養(yǎng)液中,充分攪拌均勻;c、以1~10當量濃度的氫氧化鈉調pH為7.4~8.0;d、層流細胞培養(yǎng)室抽濾消毒,4℃儲存?zhèn)溆茫?2)取步驟1配制出的人神經干細胞培養(yǎng)基,取新鮮血清加入培養(yǎng)基中,血清的含量為培養(yǎng)基的5~20%;將加入血清的培養(yǎng)基置于培養(yǎng)箱,在35℃~38℃、加3~7%的CO2溫箱孵育11~21天。 |
摘要 | 本發(fā)明公開了一種人神經干細胞的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:1、配制由DMEM和F12以1∶1混合而成的基礎培養(yǎng)液、胰島素、鹽酸丁二胺、硒化鈉、氫化可的松、L-谷氨酰胺、人轉鐵蛋白和黃體酮組成的人神經干細胞培養(yǎng)基;2、即時采集病員本人自體血清;3、將采集的病員本人自體血清加入配制出的人神經干細胞培養(yǎng)基中,在35℃~38℃、加3~7%的CO2溫箱孵育。本發(fā)明方法簡單,可重復性強,操作簡便易行;為有關神經干細胞及其應用的科研、教學、臨床應用等能起到不可估量的作用,同時也孕育著巨大的社會效益和經濟效益。 |
國際公布 |