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酶解法生產(chǎn)肝素鈉

醫(yī)藥數(shù)據(jù)庫中心 藥學(xué)論壇 灌云縣金瑞生物制品有限公司/樊永金
公開(公告)號 CN1137998C  
公開(公告)日 2004.02.11  
申請(專利)號 CN01108278.X  
申請日期 2001.02.28  
專利名稱 酶解法生產(chǎn)肝素鈉  
主分類號 C12P19/04  
分類號 C12P19/04  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 灌云縣金瑞生物制品有限公司  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 樊永金  
地址 222200 江蘇省灌云縣伊山鎮(zhèn)伊東片鄧莊工業(yè)園區(qū)  
頒證日 2004.02.11  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 南京眾聯(lián)專利代理有限公司  
代理人 沈;兵  
國省代碼 江蘇;32  
主權(quán)項(xiàng) 一種生物催化法生產(chǎn)肝素鈉的方法,其特征在于所采用的催化劑為2709蛋白酶,且生產(chǎn)過程依次包括以下幾個(gè)步驟:(1)按照1∶2.3-4重量比向豬小腸粘膜中加入水,加入氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值至9-10,升溫至50-55℃,并按每公斤小腸1.5克的比例加入2709蛋白酶,保溫?cái)嚢?5分鐘后,按豬小腸粘膜重量每公斤加入0.12-0.15千克粗鹽,升溫至60-70℃;(2)催化反應(yīng)產(chǎn)物用150-180目棉布篩過濾,分離除去雜質(zhì)蛋白質(zhì),得到過濾液;(3)在每公斤豬小腸粘膜獲得的濾液中加入0.1-0.13公斤D204強(qiáng)堿性陰離子交換樹脂,反應(yīng)2-3小時(shí),分離母液得到離子交換后的樹脂;(4)以完全浸沒離子交換后的樹脂為量,分別用濃度為每升0.04-0.06摩爾的氯化鈉、每升0.4-0.6摩爾的氯化鈉溶液洗滌攪拌15-20分鐘,分離母液,得到洗滌后的樹脂;(5)分兩次以完全浸沒洗滌后的樹脂為量,加入每升3-4摩爾的氯化鈉反應(yīng)20-30分鐘,分離樹脂,收集合并兩次反應(yīng)液體產(chǎn)物;(6)用每升2摩爾的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)上述反應(yīng)液體產(chǎn)物的pH值至11-12,升溫至60-80℃,用150-180目多層棉布篩過濾,濾液在攪拌下加入重量濃度為85-95%的乙醇,調(diào)節(jié)液體比重為乙醇比重計(jì)計(jì)量35-45度,室溫下靜置2-4小時(shí),分離液體,得到沉淀物;(7)按重量比1∶2比例,將沉淀物用重量濃度95-99%的乙醇脫水2-3次,60-80℃溫度下干燥即得肝素鈉。  
摘要 本發(fā)明公開了一種利用生物發(fā)酵工藝生產(chǎn)肝素鈉的方法。該方法采用2709蛋白酶作為催化劑,D204強(qiáng)堿性陰離子交換樹脂作為離子交換樹脂,并采用150-180目多層布篩進(jìn)行過濾,有效克服了原生產(chǎn)工藝生產(chǎn)周期長、水解不完全、收率低、所得產(chǎn)品純度低、產(chǎn)生的廢水嚴(yán)重污染環(huán)境等缺陷,采用此工藝生產(chǎn)1億國際單位肝素鈉只需豬小腸粘膜1800-2000根,產(chǎn)品純度達(dá)80效價(jià)/毫克以上。  
國際公布  
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