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組織型纖溶酶原激活劑的組合突變體

公開(公告)號 CN1441056A  
公開(公告)日 2003.09.10  
申請(專利)號 CN03112037.7  
申請日期 2003.03.26  
專利名稱 組織型纖溶酶原激活劑的組合突變體  
主分類號 C12N9/48  
分類號 C12N9/48;C12N15/81  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 王革  
發(fā)明(設(shè)計)人 王革  
地址 250100山東省濟南市濟南高新技術(shù)開發(fā)區(qū)華陽路69號留學(xué)人員創(chuàng)業(yè)園山東元  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構(gòu)  
代理人  
國省代碼 山東;37  
主權(quán)項 組織型纖溶酶原激活劑(簡稱t-PA)的組合突變體(簡稱rPA)。其特征在于將t-PA分子中的EGF區(qū)、Finger區(qū)和Kringle I區(qū)刪除,保留了具有溶栓作用的Kringle II和蛋白酶二個功能區(qū)(176-527位基酸),同時將t-PA分子中的126-128位氨基酸HRR突變?yōu)锳AA。  
摘要 本發(fā)明從改造組織型纖溶酶原激活劑(簡稱t-PA)的天然分子結(jié)構(gòu)入手,通過蛋白質(zhì)工程改造,得到了t-PA的重組衍生物-組合突變體(簡稱rPA)。將t-PA分子中的EGF區(qū)、Finger區(qū)和Kringle I區(qū)刪除,保留了具有溶栓作用的Kringle II和蛋白酶二個功能區(qū)(176-527位氨基酸),同時將t-PA分子中的126-128位氨基酸HRR突變?yōu)锳AA,構(gòu)建成新的t-PA組合突變體rPA。將rPA的cDNA插入酵母表達質(zhì)粒中,轉(zhuǎn)化畢赤酵母后經(jīng)篩選得到高表達酵母工程菌,再經(jīng)過表達和一系列純化步驟,可以制備得到高純度、高比活性的rPA。rPA在具有天然t-PA的優(yōu)點,如血栓特異性的同時,還表現(xiàn)出顯著增強的血纖蛋白刺激性,延長的半衰期,增加的酶原性以及提高的對PAI-1抑制的耐受性。因而可能成為具有諸多臨床優(yōu)勢的新一代溶栓藥物。  
國際公布  
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