公開(kāi)(公告)號(hào)
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CN1895289A
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公開(kāi)(公告)日
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2007.01.17
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN200610016927.X
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申請(qǐng)日期
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2006.06.07
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專利名稱
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中草藥的鑒別方法
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主分類號(hào)
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A61K36/00(2006.01)I
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分類號(hào)
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A61K36/00(2006.01)I;G01N27/447(2006.01)I
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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中國(guó)科學(xué)院長(zhǎng)春應(yīng)用化學(xué)研究所
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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由天艷;周曉光
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地址
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130022吉林省長(zhǎng)春市人民大街5625號(hào)
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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長(zhǎng)春科宇專利代理有限責(zé)任公司
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代理人
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馬守忠
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國(guó)省代碼
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吉林;22
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主權(quán)項(xiàng)
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一種中草藥的鑒別方法,其特征在于通過(guò)毛細(xì)管電泳電化學(xué)分析方法指紋鑒別中草藥,其步驟和條件如下: 1)、分離毛細(xì)管和電極的處理 (1)毛細(xì)管處理: 毛細(xì)管在第一次使用前,通0.1mol L-1NaOH水溶液過(guò)夜,在操作過(guò)程中,為了保證分析結(jié)果的重現(xiàn)性,每次進(jìn)樣間,用1-3min二次水、4-6min緩沖溶液沖洗毛細(xì)管; (2)電極的處理: 當(dāng)分析標(biāo)準(zhǔn)品溶液時(shí),操作前將碳纖維微盤電極(CFE)超聲0.5-1.5min;每次操作前將電極超聲外,還要將電極在緩沖溶液中循環(huán)掃描10-30周(-0.2V-1.2V)進(jìn)行活化; 2)、緩沖溶液的配制 pH≥9.5的磷酸鹽緩沖溶液(PBS)用1.0mol L-1NaOH調(diào)pH值,pH值<9.5的PBS緩沖溶液的配制是直接混合Na2HPO4和NaH2PO4的水溶液即可; 3)、中草藥中活性成分標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備及其循環(huán)伏安實(shí)驗(yàn) 活性成分標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備: 將活性成分標(biāo)準(zhǔn)品用甲醇溶解配制成3-8mol L-1的溶液; 活性成分標(biāo)準(zhǔn)品溶液的循環(huán)伏安實(shí)驗(yàn): 將33μm CFE在含有標(biāo)準(zhǔn)品的PBS溶液中循環(huán)掃描,考察其循環(huán)伏安行為; 4)、檢測(cè)條件的優(yōu)化,并在此優(yōu)化條件下進(jìn)行重現(xiàn)性、檢測(cè)限和線性范圍的考察 檢測(cè)條件的優(yōu)化: 在1.0-1.3V間變化檢測(cè)電位、5-50mmol L-1間變化緩沖溶液濃度、7-11間變化緩沖溶液pH值、5-40s間變化進(jìn)樣時(shí)間和5-22.5kV間變化分離電壓考察對(duì)峰電流、遷移時(shí)間、分離度和分離效率的影響; 5)、中草藥樣品溶液的制備 用帶有20-80目篩子的植物粉碎機(jī)粉碎草藥樣品,稱取0.3-0.8g的草藥樣品用甲醇浸泡10-18h,然后水浴超聲30-60min,之后2000-3500rpm離心5-10min,此萃取過(guò)程再重復(fù)1-3次,最后,萃取液定容于5-10mL的甲醇中;進(jìn)樣前,所有的樣品溶液均用0.22μm的纖維素酯膜過(guò)濾并稀釋到所需要的濃度進(jìn)行分析; 6)、中草藥CE-ED指紋圖譜的獲得 中草藥CE-ED指紋圖譜的獲得是在步驟4)中所獲得的最佳條件下進(jìn)行電泳分析得到的; 7)、對(duì)比標(biāo)準(zhǔn)混合溶液和實(shí)際樣品中活性成分的峰高確定實(shí)際樣品中活性成分的含量; 8)、對(duì)比所獲得的CE-ED指紋圖譜,分別從幾個(gè)不同的指紋片段鑒別同種植物的不同部位以及不同種植物,從而鑒別中草藥及其混淆品。
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摘要
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本發(fā)明涉及一種中草藥的鑒別方法,其特征在于通過(guò)毛細(xì)管電泳電化學(xué)分析方法指紋鑒別中草藥。步驟為:配制緩沖溶液;進(jìn)行中草藥中活性成分標(biāo)準(zhǔn)品溶液的配制及其循環(huán)伏安實(shí)驗(yàn);對(duì)檢測(cè)條件進(jìn)行優(yōu)化,并在此優(yōu)化條件下進(jìn)行重現(xiàn)性、檢測(cè)限和線性范圍考察;中草藥樣品溶液的制備;中草藥CE-ED指紋圖譜的獲得;通過(guò)對(duì)比標(biāo)準(zhǔn)混合溶液和實(shí)際樣品中活性成分的峰高確定實(shí)際樣品中活性成分的含量;通過(guò)對(duì)比活性成分的含量及所獲得的CE-ED指紋圖譜,鑒別中草藥。本發(fā)明能夠建立中草藥的標(biāo)準(zhǔn)CE-ED指紋圖譜,同時(shí)進(jìn)行活性成分的定量檢測(cè),具有高的分離效率、低的檢測(cè)限、成本低、重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn),是控制及評(píng)價(jià)中草藥質(zhì)量的先進(jìn)方法。
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國(guó)際公布
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