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川貝母類藥材聚合酶鏈反應(yīng)-限制性酶切圖譜鑒定方法

公開(公告)號 CN1227358C  
公開(公告)日 2005.11.16  
申請(專利)號 CN03131798.7  
申請日期 2003.07.30  
專利名稱 貝母類藥材聚合酶鏈反應(yīng)-限制性酶切圖譜鑒定方法  
主分類號 C12N15/10  
分類號 C12N15/10;C12Q1/68  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 中國藥科大學  
發(fā)明(設(shè)計)人 李 萍;王沖之  
地址 210038江蘇省南京市神農(nóng)路1號  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構(gòu) 南京知識律師事務(wù)所  
代理人 胡錫瑜  
國省代碼 江蘇;32  
主權(quán)項 用于鑒別川貝母的PCR擴增引物對,其特征在于:該引物對為P1:5’-CGTAACAAGGTTTCCGTAGGTGAA-3’;P2:5’-GCTACGTTCTTCATCGAT-3’。  
摘要 本發(fā)明屬于中藥材種質(zhì)的品質(zhì)鑒定技術(shù)領(lǐng)域,目的是提供一種準確鑒別川貝母與非川貝母類藥材的聚合酶鏈反應(yīng)-限制性酶切圖譜分子鑒定方法(PCR-RFLP)。PCR擴增所用引物序列為:P1:5’-CGT AAC AAG GTT TCC GTA GGTGAA-3’,P2:5’-GCT ACG TTC TTC ATC GAT-3’;川貝母的特征DNA堿基序列為:5’-TGCCCGCCCT GCCCGGGACC TCGC-3’;限制性內(nèi)切酶Sma I及其同切酶可識別并切割該序列。鑒定過程如下:提取藥材DNA;用引物P1、P2進行PCR擴增;用限制性內(nèi)切酶Sma I或其同切酶消化PCR產(chǎn)物;瓊脂糖凝膠電泳分析結(jié)果;通過與川貝母PCR-RFLP特征結(jié)果相比較,即可判斷供試品是否川貝母藥材。  
國際公布  
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