| 公開(公告)號(hào) | CN101144080A |
| 公開(公告)日 | 2008.03.19 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200710129894.4 |
| 申請(qǐng)日期 | 2007.08.01 |
| 專利名稱 | 重組人VIP-Humanin融合蛋白制備方法 |
| 主分類號(hào) | C12N15/09(2006.01)I |
| 分類號(hào) | C12N15/09(2006.01)I;C07K19/00(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 北京化工大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 陳勁春;常 婧 |
| 地址 | 100029北京市朝陽(yáng)區(qū)北三環(huán)東路15號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | |
| 代理人 | |
| 國(guó)省代碼 | 北京;11 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種重組人VIP-HN融合蛋白的制備方法，其特征在于，采用基因工程菌發(fā)酵法生產(chǎn)，而不是從天然存在的生物材料中制備。 |
| 摘要 | 發(fā)明專利名稱：重組人VIP-Humanin融合蛋白制備方法 技術(shù)領(lǐng)域：本發(fā)明涉及生物工程、食品工程、保健品領(lǐng)域。本發(fā)明采用DNA重組技術(shù)，根據(jù)大腸桿菌偏爰密碼，設(shè)計(jì)、合成了串聯(lián)共表達(dá)人VIP-Humanin融合蛋白的編碼基因并由BamHI和SaCI定向克隆進(jìn)pET28a(+)；篩出陽(yáng)性克隆之后，挑取一個(gè)單菌落對(duì)其發(fā)酵條件和產(chǎn)物分離純化工藝進(jìn)行優(yōu)化處理。發(fā)酵3h左右OD600達(dá)到0.6～0.7時(shí)，加入誘導(dǎo)劑至終濃度1mmol/mL，誘導(dǎo)表達(dá)4h目標(biāo)蛋白合成達(dá)到高峰，粗蛋白采用Ni-螯合親和層析進(jìn)行初分，DEAE-sepherose離子交換柱純化，經(jīng)重組腸激酶酶切純化后獲得rhVIP-Humanin融合蛋白。采用Tricine-SDS-PAGE，RP-HPLC和MALDI-TOF-TOF-MS等表征確認(rèn)所制備的蛋白是rhVIP-Humanin。它將用于防治老年癡呆癥。 |
| 國(guó)際公布 |
