羊沙門氏菌病的熒光抗體檢查法是怎樣的
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應用炎光抗體技術(shù)對疑為沙門氏菌的病料或增菌液進行鑒定,是快速篩選沙門氏菌的方法之一。操作方法如下：1. 試驗準備 ⑴熒光顯微鏡(2) 多價熒光抗體:由生物藥廠提供。(3) 被檢樣品:用各種組織或臟器培養(yǎng)的單個菌落。2. 操作方法用接種環(huán)取經(jīng)過增菌培養(yǎng)的被檢樣品一鉬環(huán)，制 成薄薄的涂片，置37<C溫箱或室溫涼干后，用固定液(
乙醇60毫升、 三氯甲烷30毫升、甲醛10毫升混合)固定5 ~ 10分鐘，再用95%乙 醇浸洗后涼干。將沙門氏菌突光抗體滴加于標本涂片上，放置盒內(nèi)，在371經(jīng) 30分鐘后取出，用0.01M PH9.0磷酸鹽緩沖液沖去多余的熒光抗 體;再用相同的磷酸鹽緩沖液浸洗10分鐘，然后用蒸餾水沖洗，涼 干，再滴加PH9.0碳酸鹽緩沖
甘油后，加蓋玻片封片。在熒光顯微鏡 下觀察，沙門氏菌呈發(fā)亮的黃綠色桿菌，其他雜菌和雜質(zhì)發(fā)橙黃色熒 光。每一個涂片至少要檢査10個視野。結(jié)果判定:“+ + + +”表示貪綠色閃亮熒光，菌體周圍及中心輪 廓清晰�！� + + + ”表示有黃綠色焚光，菌體周圍及中心輪廓清 晰�！� ”表示有黃綠色熒光較弱，菌體周圍及中心輪廓清晰。“ + ”表示有暗淡的熒光，菌體尚可見�！� ”表示無熒光，菌體形狀不清晰。菌體熒光亮度達+ + ~ + + + + ,菌體形態(tài)符合沙門氏菌，并在 多數(shù)視野中査出沙門氏菌，判為陽性。'熒光亮度在++以下，判為陰性。凡焚光陽性，培養(yǎng)不典型的菌體，應用原來的增菌液重新進行純 培養(yǎng)和檢査，根據(jù)分離培養(yǎng)的結(jié)果，再確定是否為沙門氏菌。
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