豬細(xì)胞巨化病毒性感染
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細(xì)胞巨化病毒感染是豬細(xì)胞巨化病毒引起仔豬一種常見傳染病。在易感豬群中可引起胚胎死亡和仔豬鼻炎、
肺炎及生長發(fā)育不良、增重差等臨床癥狀。 Done(1955)在豬鼻甲骨黏膜黏液腺中巨細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)有大量嗜堿性核內(nèi)包涵體，首次從英格蘭分離獲得皰疹樣病毒粒子；這是繼偽
狂犬病病毒之后發(fā)現(xiàn)的第二個(gè)豬的皰疹病毒。因患豬臨床上以鼻炎為特征，并在感染的鼻甲骨黏膜黏液腺中巨細(xì)胞可見到大量嗜堿性核內(nèi)包涵體，因而將PCMV引起的這種疾病稱為包涵體鼻炎。據(jù)電鏡觀察，病毒的性質(zhì)及其所致病變與人的細(xì)胞巨化病毒和豚鼠的唾液腺病毒類似，而本病毒的感染動(dòng)物的范圍僅限于豬，故又將該病毒稱為豬細(xì)胞巨化病毒(PCMV)。本病毒分布相當(dāng)廣泛。從近年的報(bào)道看，常規(guī)條件下飼養(yǎng)的大多數(shù)豬群均存在PCMV感染，PCMV抗體陽性率都很高，但大多數(shù)為亞臨床型，臨床發(fā)病則很少見。歐洲很多國家都發(fā)現(xiàn)有本病。德國用PCR方法，調(diào)查豬的流行率要高于50%。在英國進(jìn)行的血清學(xué)檢查的結(jié)果表明：90%以上的豬群曾受到過感染，通過ELISA或IFA檢測，發(fā)現(xiàn)98%以上的
豬血清呈陽性。在日本自1972年就有本病病理學(xué)方面的報(bào)道，1981年6～11月，對441例肥育豬血清用間接熒光抗體法做了抗體調(diào)查，有434例(98.4%)為陽性。用ELISA所作的調(diào)查，436份樣品有433份(99.4%)為強(qiáng)陽性，并于1985年首次分離到病毒。北美和澳大利亞也有報(bào)道，其中美國發(fā)病率甚高，豬群的抗體保有率為90%。說明凡飼養(yǎng)豬只的地區(qū)，都可能有本病毒的感染�！ �1病原學(xué) 1.1形態(tài)結(jié)構(gòu) PCMV屬于皰疹病毒科，β皰疹病毒亞科、巨細(xì)胞病毒屬的成員；近來有人認(rèn)為將本病毒劃在玫瑰疹病毒屬中更為恰當(dāng)［3］?。PCMV在形態(tài)上屬于典型的皰疹病毒，中央為電子致密的芯髓，芯髓常為卵圓形、也有長方形到啞鈴狀，其直徑為45～70nm。在芯髓外圍為正十二面體核衣殼，其直徑約80～100nm，最外圍為囊膜，多為單層，偶爾也有雙層，有囊膜的病毒顆粒直徑為120～150nm。囊膜上還有纖突。核衣殼與囊膜之間似乎有一圈半透明帶包圍著電子致密外套相分隔。感染病毒后的細(xì)胞體積極度增大，可達(dá)正常細(xì)胞的6倍，線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體也出現(xiàn)腫脹，超薄切片可見巨大的核內(nèi)包涵體，常呈結(jié)晶體樣排列。在病毒復(fù)制后期的細(xì)胞裂解過程中，在細(xì)胞漿中也可看到晶體樣排列的病毒。與所見到的其他皰疹病毒中一樣，也常常見到?jīng)]有芯髓或無囊膜僅有核衣殼的病毒粒子。最近日本學(xué)者Goltz等(2000)采用PCR方法擴(kuò)增了PCMV的DNA聚合酶基因，并進(jìn)行測序。對德國株的DNA聚合酶(DPOL)位點(diǎn)進(jìn)行了擴(kuò)增，測定了2個(gè)完整開放性閱讀框(ORF)及包括完全DPOL基因和糖蛋白gB3′端的2個(gè)部分ORF序列。推導(dǎo)的
氨基酸序列與β?皰疹病毒的各個(gè)蛋白有很高的同源性，特別是與人皰疹病毒6型和7型的ORF?36～39同源性更高。與日本株、西班牙株、英國株的DPOL基因比較，僅有0.4%～1%的差異。對PCMV的主要衣殼蛋白(MCP)基因也得以鑒定。序列分析表明，PCMV的MCP基因全長4026個(gè)核苷酸，編碼1341個(gè)氨基酸的蛋白，據(jù)預(yù)計(jì)MCP的分子量為151，456Da，系統(tǒng)發(fā)育分析認(rèn)為，PCMV與人皰疹病毒6型或7型的同源性高于與人或鼠細(xì)胞巨化病毒的同源性。人工感染PCMV的血清不能與細(xì)菌表達(dá)的MCP反應(yīng)，表明POMV的MCP可能與感染后體液免疫應(yīng)答無關(guān)�！ �1.2病毒培養(yǎng) PCMV在體外增殖有一定難度，用豬的腎或睪丸原代細(xì)胞、末梢血液中的巨噬細(xì)胞以及
豬腎細(xì)胞系培養(yǎng)，均不能增殖，但直接用已感染了病毒的豬腎或睪丸，作細(xì)胞帶毒培養(yǎng)，病毒則可充分增殖，并出現(xiàn)細(xì)胞病變。在原代細(xì)胞中只有3～5周齡仔豬的肺泡巨噬細(xì)胞最適宜于病毒的首次分離和連續(xù)傳代。PCMV在
豬肺泡巨噬細(xì)胞培養(yǎng)物上增殖很慢，接種后3～14天才可看到巨細(xì)胞形成和核內(nèi)包涵體，偶爾還可見細(xì)胞漿內(nèi)包涵體，但其大小比核內(nèi)包涵體要小。在接種11～14天后，PCMV的最高滴度可達(dá)5.5TCID50/ml。然而，肺泡巨噬細(xì)胞自身不能繁殖，因此，必須用原代細(xì)胞培養(yǎng)物進(jìn)行病毒的傳代。由于肺泡巨噬細(xì)胞經(jīng)常受到包括PCMV和PRRSV在內(nèi)的病毒污染，故在細(xì)胞使用之前要對這些病毒進(jìn)行監(jiān)測，確保安全可靠、無污染。較可靠的辦法是使用無菌豬或SPF豬肺泡巨噬細(xì)胞。據(jù)KawamuraH等報(bào)道，豬輸卵管細(xì)胞可支持該病毒復(fù)制，Bouillant等建立了輸卵管類上皮和輸卵管類成纖維細(xì)胞，可以用于病毒培養(yǎng)。其細(xì)胞病變不明顯，必須用姬姆薩染色或標(biāo)記抗體染色后觀察。另有報(bào)道，十四烷酰佛波醇乙酸酯(120tertadecanoylphorbol13?acetate)能增強(qiáng)病毒的復(fù)制。
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加強(qiáng)管理
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引起胚胎死亡和仔豬鼻炎、
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