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免疫學和免疫學檢驗:第四節(jié) 血清IgE的檢測

IgE和IgG4(以下只用IgE代表)是介導Ⅰ型變態(tài)反應的抗體,因此檢測血清總IgE和特異性IgE對Ⅰ型變態(tài)反應的診斷和過敏原的確定很有價值。一m.52667788.cn/shiti/、總IgE的測定(一)測定方法正常情況下血清IgE僅在ng/ml水平,用常規(guī)測定IgG或IgM的凝膠擴散法檢測不出IgE,…

IgE和IgG4(以下只用IgE代表)是介導Ⅰ型變態(tài)反應的抗體,因此檢測血清總IgE和特異性IgE對Ⅰ型變態(tài)反應的診斷和過敏原的確定很有價值。

m.52667788.cn/shiti/、總IgE的測定

(一)測定方法

正常情況下血清IgE僅在ng/ml水平,用常規(guī)測定IgG或IgM的凝膠擴散法檢測不出IgE,必須用高度敏感的放射免疫測定法及酶聯(lián)免疫測定法進行檢測。

1.放射免疫吸附劑試驗(radioimmunosorbenttest,IRST)是將抗IgE吸附到固相載體上用以檢測血清IgE的方法,故又稱固相放射免疫測定(SPRIA);臨床常用雙抗體夾心法,多以濾紙為載體。將抗IgE抗體偶聯(lián)到經溴化氟活化的濾紙上,使其與待檢血清及IgE參考標準進行反應;洗滌后加入125I標記的抗人IgE,再經洗滌后測定濾紙片的放射活性,其測定值與標本中的IgE含量呈正相關。

2.酶聯(lián)免疫測定法測定血清IgE時也常用雙抗體夾心ELISA法(詳見第十五章),操作方便,敏感性也很高,在臨床上經常應用。

3.間接血凝試驗用抗IgE至敏紅細胞,將標本血清做系列稀釋后與致敏紅細胞反應。此法更加簡便易行,便于普及,但敏感性比上兩法稍低。

(二)臨床意義

血清總IgE水平一般用國際單位(IU)或ng表示,1IU=2.4ng,相當于WHO標準凍干血清制劑0.00928mg內所含的IgE量。正常人群IgE水平受環(huán)境、種族、遺傳、年齡、檢測方法及取樣標準等因素的影響,以致各家報道的正常值相差甚遠。嬰兒臍帶血IgE水平小于0.5IU/ml,出生后隨年齡增長而逐漸升高,12歲時達成人水平。成人血清IgE水平約在20~200IU/ml之間,一般認為大于333IU/ml(800ng/ml)時為異常升高。

IgE升高相關的常見疾病有:過敏性哮喘、季節(jié)性過敏性鼻炎、特應性皮炎、藥物性間質性肺炎、支氣管肺曲菌病、麻風、類天皰瘡及某些寄生蟲感染等。上述疾病時IgE升高的程度并不一致,在過敏性支氣管肺曲菌病時最為顯著,其值可達5000~20000ng/ml,除了此病和特應性皮炎以及在花粉季節(jié)之外,任何血清總IgE水平大于5000ng/ml的患者均應考慮寄生蟲感染的可能性。

二、特異性IgE的測定

(一)測定方法

特異性IgE是指能與某種過敏原特異性結合的IgE,因此需要用純化的變應原代替抗IgE進行檢測;常用的方法仍然是放射免疫技術和酶標免疫技術。

1.放射變應原吸附劑試驗(radioallergosorbenttest,RAST)將純化的變m.52667788.cn/rencai/應原與固相載體結合,加入待檢血清及參考對照,再與同位素標記的抗IgE抗體反應,然后測定固相的放射活性,通過標準曲線求出待檢血清中特異性IgE的含量,或在標本放射活性高于正常人均數(shù)加3S時判為陽性。

2.酶聯(lián)免疫測定法試驗原理及步驟基本同RAST,僅是最后加入酶標記的抗IgE,利用酶底物進行顯色。測定結果的表示也與RAST相同。

(二)臨床意義及評價

RAST是目前公認的檢測型變態(tài)反應的有效方法之一,具有特異性強、敏感性高、影響因素少、對患者絕對安全等優(yōu)點;不但有助于過敏性哮喘的診斷,對尋找變應原也有重要價值。RAST與皮膚試驗和支氣管激發(fā)試驗的符合率在80%左右,但不能完全代替后兩種試驗,因為活體試驗還能反映嗜堿性粒細胞和靶細胞的反應性。

但是RAST也有許多缺點:費用昂貴、花費時間長、放射性同位素易過期而且污染環(huán)境、不同來源試劑盒的參比血清不同而不易相互比較、待檢血清含有相同特異性IgG時可干擾正常結果。因此一般只在下列情況下才做RAST:①皮試結果難以肯定、但需提供進一步的診斷證據(jù)者;②不適宜做皮試或激發(fā)試驗者,例如老年、幼兒、妊娠婦女、患有皮膚病、對變應原有嚴重過敏史或正服用抗過敏藥物以及重病者;③觀察脫敏治療效果或研究變態(tài)反應機制。

ELISA法與RAST有相似的優(yōu)點,而且還有獨特的長處,如沒有同位素污染、酶標抗體可長期保存,因此在國內應用較多。用ELISA測試屋塵和一些花粉的結果與RAST符合率較高,且與臨床也較符合,但與皮膚試驗的符合率可能不夠理想。

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