同種異體移植物(allograft)移植后常發(fā)生免疫排斥反應(yīng),引起這種排斥反應(yīng)的抗原稱為移植抗原或組織兼容性抗原。動物和人具有多種組織兼容性抗原,根據(jù)引起排斥反應(yīng)的移植抗原的強度將組織兼容性抗原分為:(1)主要組織兼容性抗原系統(tǒng),編碼這一組抗原的是一組連鎖基因,稱為主要組織兼容性復(fù)合體(majorhistocompatibility complex,MHC),或主要組織兼容性系統(tǒng)(minorhistocompatibility complex);(2)次要組織兼容性抗原,由次要組織兼容性復(fù)合體(minor histocompatibility comples)或次要組織相容性系統(tǒng)(minorhistocompatibility system)所編碼。
MHC指某一物種的某一號染色體(如人HLA在第6號染色體,小鼠H-2在17號染色體)上一組密切連鎖的基因,它在主要組織相容性抗原識別以及清除外來和內(nèi)在抗原起重要作用。人的MHC稱為HLA,在小鼠稱為H-2。其余靈長類和某些非靈長類動物的MHC有了新的命名規(guī)定與建議,原MHC的后兩個字母HC改為小寫,即Mhc(表6-2和6-3)。
表6-2 靈長類動物主要組織相容性復(fù)合體的新、舊命名
動 物 種 名 | Mhc 名 稱 | ||
普 通 | 科 學(xué) | 新 名 | 舊 名 |
Chimpanzee(小黑猩猩) | Pan troglodytes | Patr | ChLA |
Gorilla(大黑猩猩) | Gorilla gorilla | Gogo | GoLA |
Orang-utan(猩猩) | Pongo pygmaeus | Popy | OrLA |
Rhesus macaque(monkey)(獼猴,恒河猴,短尾小猴) | Macaca mulanta | Mamu | RhLA |
Pigtail macaque(發(fā)辮猴) | Macaca nemestrina | Mane | |
Crab-eating macaque(cynomolgus monkey)(食蟹猴) | Macaca fascicularis | Mafa | |
Olive Baloon(橄欖狒狒) | Papioanubis | Paan | |
Northern night(owl)monkey(貓頭鷹猴) | Antus trivirgans | Aotr | OMLA |
Black spider monkey(黑蜘蛛猴) | Ateles paniscus | Atpa | |
Common squirrel monkey(普通松鼠猴) | Saimiri sciureus | Sasc | |
Cotton-top tamarin(絨頂檉柳猴) | Saguinus oedipus | Saoe | |
Common marmoset(絹猴) | Callithrix jaccus | Caja | MaLA |
表6-3 某些非靈長類動物主要組織相容性復(fù)合體的建議名稱
動 物 種 名 | Mhc名稱 | ||
普 通 | 科 學(xué) | 現(xiàn)用 | 建議 |
Deer mouse(鹿鼠) | Peromyscus maniculatus | Pema | |
Cotton mouse(棉鼠) | Peromyscus gossypinus | Pego | |
Field vole(棉鼠) | Microtus agrestis | Miag | |
Montane vole(田鼠) | Microtus montanus | Mimo | |
Wood vole(山鼠) | Apodemus sylvaticus | Apsy | |
Golden(Syrian)hamster(木鼠) | Mesocricetus auratus | Hm-1 | Meau |
Mole rat(金倉鼠) | Spalax ehrenbergi | Smh | Speh |
Guinea pig(豚鼠) | Cauia porcellus | GPLA | Capo |
Europea rebbit(歐洲兔) | Oryctolagus cuniculus | RLA | Orcu |
Domestic dog(家犬) | Canis familiaris | DLA | Cafa |
Domestic cat(家貓) | Felis canus | FLA | Feca |
Domestic cattle(家牛) | Bos taurus | BOLA | Bota |
Domestic pig(家豬) | Sus domesticus | SLA | Sudo |
Domestic horse(家馬) | Equus caballus | ELA | Eqca |
Domestic sheep(家綿羊) | Ovis aries | OLA | Ovar |
Domestic goat(家山關(guān)) | Capra hircus | GLA | Cahi |
各種動物MHC的作用基本相似,包括:(1)MHC編碼的抗原廣泛頒布于淋巴細胞和其它有核細胞的表面,與同種內(nèi)移植排斥有關(guān),也是刺激混合淋巴細胞反應(yīng)(MLR)和移植物抗宿主反應(yīng)(GVHR)的主要刺激抗原;(2)控制機體對抗原的免疫應(yīng)答或免疫抑制,以及免疫活性細胞之間相互作用;(3)編碼補體系統(tǒng)中的某些組分;(4)MHC中某些抗原出現(xiàn)的頻率與對某些疾病的易感性有關(guān)。
小鼠的組織兼容性抗原有幾十種以上,由常染色體H-1、H-2、H-3……、H-30等基因編碼(H表示組織兼容性histocompatibility),此外,還受小鼠性染色體基因(雄性為XY,雌性為XX)控制。其中H-2抗原為小鼠主要組織相竄性抗原系統(tǒng),而其他抗原均系次要組織兼容性抗原系統(tǒng)。MHC在小鼠即為H-2,目前對H-2系統(tǒng)研究得較為清楚,位于第17對染色體,長度約占0.5分摩。H-2抗原具有高度q多態(tài)性。用血清學(xué)方法檢出H-2I類抗原特異性在100個以上,可分為入有抗原(private antigen)和公有抗原(public antigen)。私有抗原是某一近交系(inbred strain)小鼠特有的抗原標志,在某一特定近交系小鼠只能檢出一個K區(qū)和一個D區(qū)的私有抗原。公有抗原是在不同品系小鼠中都可檢出的一些交叉抗原,每一品系小鼠通常都可檢出多個公有抗原特異性。根據(jù)血清學(xué)檢定抗原的反應(yīng)格局,可將近交系小鼠分為不同單體型的品系,用H-2右上方小寫的英文字母表示,如H-2x、H-2d和H-2b等。
H-2基因群中可分為K、I、S和D四個區(qū),I區(qū)又可分為I-A、I-E等亞區(qū)。按其編碼抗原結(jié)構(gòu)和功能不同,又可將H-2復(fù)合體分為三類基因:(1)I類基因,位于K和D區(qū),包括K、D基因座,最近又增加了K2、L和L2(?)新的基因座;(2)Ⅱ類基因,位于I區(qū),包括Aα、Eβ和Eα等基因座;(3)Ⅲ類基因,包括補體C4、C2、Bf和編碼雄性激素結(jié)合蛋白性限蛋白(sex limited protein Slp)基因座(圖6-1)。由于小鼠H-2基因群含有I(羅馬字)類基因,不同區(qū)中有I(因文大寫)區(qū),應(yīng)注意鑒別,切勿混淆。此外,H-2中有些基因位于Qa和TL區(qū),可能參與H-2多態(tài)性的形成以及TCRγδ T細胞識別抗原時的遺傳限制。
在人類MHC稱為HLL(human leucocyte antigen),是迄今為止所知的人類最復(fù)雜的基因族。除成熟的紅細胞外,HLA抗原幾科分布于人體的各種有核細胞以及血小板。由于此組抗原首先在人外周血白細胞上發(fā)現(xiàn),同時表達抗原水平較高,目前多采用外周血淋巴細胞來檢測這類抗原的型別,故稱為人類白細胞抗原(HLA)。
HLA基因群定位于第6號染色體的短臂(圖6-2)。
圖6-2 人類第6對染色體上已知的基因(或基因群)
至1991年底,HLA基因座位已確定確定近60個,正式命名的等位基因278個。這些基因分類的方式主要有以下兩種。(1)傳統(tǒng)的分類法,即把HLA分為與小鼠H-2相似的I類、Ⅱ類和Ⅲ基因,(2)1991年Bodmer建議將它重劃分的三類:第一類包括傳統(tǒng)分類中的HLA-Ⅰ類和Ⅱ類,還包括一對DMA和DMB;第二類稱為免疫功能相關(guān)基因,包括C4、Bf、C2、TNFA、TNFB、HSP70、TAP1、TAP2和TAP7等;第三類是一些與上述無關(guān)的基因。本章仍按傳統(tǒng)分類法進行介紹。
HLA占第6號染色體很窄的一個區(qū)帶,估計占人體整個基因組的1/3000,長約3500kb(圖6-3、6-4)。
圖6-3 人MHC基因圖(根據(jù)WHO HLA命名委員會1991年修正)
圖6-4 人HLA基因簡圖
圖6-5 小鼠H-2和人HLA中基因座位排列的比較
利用交換率越大基因座位距離越遠,交換率越小基因座位距離越近的原理,可以通過交換率的計算作基因圖,經(jīng)過家譜分析和交換率的計算作基因圖,A-B座位的交換率為0.8分摩(centiMorgan,cM。是基因交換率在基因圖上的圖距單位,重組頻率在1%的兩個連鎖基因之間的距離為1cM),A-C為0.6cM,B-C為0.2cM,B-D為0.8cM,HLA基因群全長距離約為4cM。
自1964年以來,每隔3-4年召開一次國際組織相容性工作討論會(InternationalHistocompatibility Workshop,IHW),最近一次于1991年11月在日本橫濱召開,并預(yù)定于1995年在法國召開第12次IHW。經(jīng)過這些會議陸續(xù)報告了HLA的許多基因及大量的行裝位基因。現(xiàn)知在HLA-I類基因區(qū)中,除已知的HLA-A、-B、-C座位外,還發(fā)現(xiàn)了-E、-F、-G、-H和-J,新發(fā)現(xiàn)的這些I因基因座大多數(shù)偽基因,F(xiàn)A座位已發(fā)現(xiàn)等位基因41個,B座位61個,C座位18個,E座位4個。在HLA-A與-E之間可能存在著重組熱點。在HLA-Ⅱ基因中,已發(fā)現(xiàn)了近30個基因座位,等位基因更多,其中DR、DQ、DP均由一條A鏈與一條B鏈組成異源二降體分子(參后述),而A鏈基因與B鏈基因及其等位基因為數(shù)甚多,后者如DRB1座位60個,DRB3座位4個,DRB5座位4個,DRB6座位3個;DQA1座位14個,DQB1座位19個;DPA1座位8個,DPB1座位38等等。DDRA編碼DRα鏈;DRB1編碼β1鏈,決定的特異性為DR1、DR2、DR3、DR4、DR5等;DRB2為偽基因;DRB3編碼DRβ3鏈,決定DR52及Dw24、Dw25、Dw26等特異性;DRB4編碼DRβ4鏈,決定DR53特異性;DRB5編碼DRβ5鏈,決定DR51特異性;DRB6、B7、B8、B9均為偽基因。DQA1編碼DQα鏈;DQB1編碼DQβ鏈;DQA2、B2尚末得知其表達;DQB3為偽基因。DOB編碼DOβ鏈DMA編碼DMα鏈;DMB編碼DMβ鏈。DNA編碼DNα鏈、DPA1編碼DPα鏈;DPB1編碼DPβ鏈;DPA2和DPB2為偽基因。此外與肽運轉(zhuǎn)至內(nèi)質(zhì)網(wǎng)有關(guān)的基因TAP1(transporter of antigen peptides)、TAP2和與抗原加工有關(guān)的基因稱之為低分子量多肽或稱大的多功能蛋白酶LMP2(low molecular weight polypeptides or large multifunctionalprotease-2)、LMP7也位于Ⅱ類基因區(qū)。Ⅲ類基因區(qū)包括補體C2、C4、B因子,此外,21羥化酶A與B、HSP70(heat shockprotein70,熱休克蛋白70)和腫瘤壞死因子α、β基因也在這里。21A是假基因,21B具有編碼21羥化酶功能。21羥化酶是腎上腺皮質(zhì)合成皮質(zhì)醇和醛固醇必不可少的酶,如酶缺乏,可導(dǎo)致先天性腎上腺皮質(zhì)增生癥。
HLA和H-2基因的比較見圖6-5。小鼠H-2的 Tla為存在于胸腺細胞和某些胸腺白血病細胞上的抗原(thymus-leukemia antigen);Tla與H-2D之間還有Qa區(qū)。Qa區(qū)中有17個Qa基因,還有12個Qa基因在Tla區(qū),但大部分Qa基因是靜息基因(silent gene)。目前已測得6個Q基因有表達,其中Qa2、Qa3、Qa4、Qa5由Qa區(qū)基因編碼,Qa1和Qa6由Tla區(qū)編碼。
目前已確定的HLA敵國清學(xué)抗原共有161個,其中A有27個,B有59個,C有10個,D有26個,DR有24個,DQ有9個,DP有6個。C座位上的抗原編號是公認的,為了避免與補體C相混淆特標以“W”。某些抗原數(shù)字后帶有括號的抗原編號,表示括號前的抗原為括號內(nèi)抗原的裂解產(chǎn)物,如A23和A24是A9抗原的裂解產(chǎn)物(表6-4)。
表6-4 HLA血清學(xué)抗原特異性總表(1991)
A | B | C | D | DR | DQ | DP | |
A1 | B5 | B49(21) | Cw1 | Dw1 | DR1 | DQ1 | DPw1 |
A2 | B7 | B50(21) | Cw2 | Dw2 | DR103 | DQ2 | DPw2 |
A203 | B703 | B51(5) | Cw3 | Dw3 | DR2 | DQ3 | DPw3 |
A210 | B8 | B5102 | Cw4 | Dw4 | DR3 | DQ4 | DPw4 |
A3 | B12 | B5103 | Cw5 | Dw5 | DR4 | DQ5(1) | DPw5 |
A9 | B13 | B52(5) | Cw6 | Dw6 | DR5 | DQ6(1) | DPw6 |
A10 | B14 | B53 | Cw7 | Dw7 | DR6 | DQ7(3) | |
A11 | B15 | B54(22) | Cw8 | Dw8 | DR7 | DQ8(3) | |
A19 | B16 | B55(22) | Cw9(w3) | Dw9 | DR8 | DQ9(3) | |
A23(9) | B17 | B56(22) | Cw10(w3) | Dw10 | DR9 | ||
A24(9) | B18 | B57(17) | Dw11(w7) | DR10 | |||
A2403 | B21 | B58(17) | Dw12 | DR11(5) | |||
A25(10) | B22 | B59 | Dw13 | DR12(5) | |||
A26(10) | B27 | B60(40) | Dw14 | DR13(6) | |||
A28 | B35 | B61(40) | Dw15 | DR14(6) | |||
A29(19) | B37 | B62(15) | Dw16 | DR1403 | |||
A30(19) | B38(16) | B63(15) | Dw17(w7) | DR1404 | |||
A31(19) | B39(16) | B64(14) | Dw18(w6) | DR15(2) | |||
A32(19)Dw | B3901Dw | B65(14) | Dw19(w6) | DR16(2) | |||
A33(19) | B3902 | B76 | Dw20 | DR17(3) | |||
A34(10) | B40 | B70 | Dw21 | DR18(3) | |||
A36 | B4005 | B(70) | Dw22 | ||||
A43 | B41 | B72(70) | Dw23 | DR51 | |||
A66(10) | B42 | B73 | |||||
A68(28) | B44(12) | B75(15) | Dw24 | Dm.52667788.cn/pharm/R52 | |||
A69(28) | B45(12) | B76(15) | Dw25 | ||||
A74(19) | B46 | B77(15) | Dw26 | DR53 | |||
B47 | B7801 | ||||||
B48 | |||||||
Bw4 | |||||||
Bw6 |
1.HLA的家系遺傳 HLA單體型可作為一個單位遺傳給子代,其遺傳示意圖見圖6-6。a、b、c、d是雙親或子代HLA單體型的代號;1、2、3是HLA-A抗原,?為末檢出HLA-A抗原;5、7、8、12是HLA-B抗原。
基因頻率和基因平衡定律基因頻率指在群體中某一等位基因出現(xiàn)在機率與該群體全部等位基因可以世代維持不變。HLA基因頻率亦符合這一定律。在群全中,一個抗原頻率反映了控制這一抗原的基因頻率。
HLA中的基因之間也有一定的交換和重組機率,一般取決于兩個基因之間的距離。但HLA多基因座組成的單體型并非完全隨機,有些基因比其它基因更多地連鎖在一起,稱為連鎖不平衡(linkage disequilibrium)。換名話說,實際觀察到睥兩個或更多基因出現(xiàn)在同一條單倍體上的頻率大于按照獨立分配規(guī)律所預(yù)期的頻率。如在白種人中A1的基因頻率為0.12,B8的基因頻率為0.17,A1和B8基因出現(xiàn)在同一條單倍體上的預(yù)期頻率為0.12*0.17=0.02,但實際觀察到的頻率為0.09。HLA的連鎖不平衡與對某些疾病的易感有關(guān)。
已被檢出的眾多的HLA抗原在不同人種甚至不同地區(qū)的人群中的分布存在著很大的差別。如白種人HLA-A1、A3、D8檢出率較高;黃種人以A24、B46、B54的檢出率較高,黑種人以HLA-A36、A43、B53檢出率最高。在單體型的栓出率也同樣有情況,如北歐人以HLA-A1、B8、HLA-A8、B7兩個單體型最常見,黃種人以HLA-A9、B15HLA-A2、B空白抗原的單體型較常見,我國漢族人以HLA-A2、B46、HLA-111、B40和HLA-A2、B40單體型最常見。在研究HLA系統(tǒng)與疾病之間的關(guān)系時必須以所研究同一地區(qū)正常人群作為對照。
表6-5 MHC三類基因產(chǎn)物特征及其功能
Ⅰ類 | Ⅱ類 | Ⅲ類 | |
基因產(chǎn)物 | H-2 K、D | 1區(qū)(Aα、Aβ、Eα、Eβ) | C4、C2、Bf、Slp |
HLA A、B、C | D/DP、DQ、DR | C4、C2、Bf | |
分 布 | 幾乎所有細胞表面 | B細胞m.52667788.cn/job/、活化T細胞巨噬細胞、樹突狀細胞、郎罕氏細胞、精子等 | 血清及體液中 |
多肽鏈組成 | α44kDa | α34kDa | C4α 90kDa |
β12kDa | β29kDa | β 70kDa | |
γ 30kDa | |||
C2 100kDa | |||
Bf 90kDa | |||
檢出方法 | 血清學(xué)方法 | HLA-DR、DQ血清學(xué)方法 | 血清學(xué)方法 |
DNA分型法 | DNA分型法 | 化學(xué)方法 | |
高壓電泳 | |||
等電聚焦 | |||
功 能 | 為同種異體抗原,誘導(dǎo)同種異體排斥反應(yīng),誘導(dǎo)抗體和Tc形成;Tc殺傷病毒感染靶細的MHC限制 | 為同種異體抗原,誘導(dǎo)同種異體排斥反應(yīng),誘異抗體產(chǎn)生及Th細胞增殖,體外刺激Mφ、LC提呈抗原作用;免疫調(diào)節(jié)(Ir基因),約束Mφ-T、T-B間相互作用。 | 形成C3轉(zhuǎn)化酶。–4b2a,C3bBb)激活C3 |
2.HLA的多態(tài)性(polymorphism)現(xiàn)象多態(tài)性指在同一相互交配的群體中,同一基因座可編兩種以上的基因產(chǎn)物。HLA的多態(tài)性主要是由于復(fù)等位基因和共顯性所致:(1)復(fù)等位基因(multiple alleles),位于一對同源染色體上對應(yīng)位置的一對基因叫等位基因。由于群體的突變,同一基因座的基因系列稱為復(fù)等位基因,對某一個體來說一個基因座只有一對等位基因,復(fù)等位基因是群體的概念。HLA存在為數(shù)眾多的復(fù)等位基因。(2)共顯性(codominant),共顯性狀態(tài)是雜合狀態(tài),這一對等位基因所控制的性狀都表現(xiàn)出來,HLA每個基因座上的等位基因都是共顯性。
圖6-6 HLA單體型的家系遺傳