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醫(yī)學微生物學:第二節(jié) 沙眼衣原體

《伯氏系統(tǒng)手冊》(1984)的記載,將沙眼衣原體Chlamydia trachomatis 分為3個生物型,即小鼠生物型(biovar mouse)、沙眼生物型(biovar trachoma)和性病淋巴肉芽腫生物型(biovarlymphogranulomavenereum,LGV)。后二者與人類疾病有關(guān)。用間接微量免疫熒光試驗,沙眼生物型…

《伯氏系統(tǒng)手冊》(1984)的記載,將沙眼衣原體Chlamydia trachomatis 分為3個生物型,即小鼠生物型(biovar mouse)、沙眼生物型(biovar trachoma)和性病淋巴肉芽腫生物型(biovarlymphogranulomavenereum,LGV)。后二者與人類疾病有關(guān)。用間接微量免疫熒光試驗,沙眼生物型又分A、B、Ba、C、D、Da、E、F、G、H、I、Ia、J、K14個血清型,LGV生物型又有L1、L2、L2a、L34個血清型。

一、生物學特性

(一)形態(tài)與染色

將雞胚卵黃囊或細胞培養(yǎng)的沙眼衣原體高度提純,于電鏡下檢查,可見原體呈球形或類球形,胞漿膜外有剛性細胞壁,壁外有平滑表層。始體的體積較大,形狀不甚規(guī)則,其包膜富有韌性,無剛性的細胞壁,原體和始體內(nèi)皆含有DNA與RNA。

沙眼衣原體具有特殊的染色性狀,不同的發(fā)育階段其染色有所不同。成熟的原體以Giemsa 染色為紫色,與監(jiān)色的宿主細胞漿呈鮮明無比。始體以 Giemsa 染色呈藍色。沙眼衣原體對革蘭氏染色雖然一般反應(yīng)為陰性,但變化不恒定。沙眼包涵體在上皮細胞漿內(nèi),很致密,如以Giemsa染色,則呈深紫色,由密集的顆粒組成。其基質(zhì)內(nèi)含有糖原,以Lugol液染色呈棕褐色斑塊。

(二)培養(yǎng)

人類是沙眼衣原體的自然宿主。它主要寄生于機體粘膜上皮細胞。猴和猩猩的眼及泌尿系可實驗感染各型沙眼衣原體(包括LGV在內(nèi))。靈長類外的動物,對LGV之外的其他沙眼衣原體均無致病性。雞胚只對大多數(shù)沙眼衣原體敏感,但禽類則對各型沙眼衣原均不敏感。小白鼠對LGV衣原體是敏感的,尤其是腦內(nèi)感染,病死率可達30%。此外,大白鼠、豚鼠和家對LGV衣原體的敏感性幼齡高于成年。所有沙眼衣原體都能在雞胚卵黃囊內(nèi)生長繁殖,并致死雞胚。將沙眼衣原體懸液接種6~8天胚齡卵黃囊內(nèi),置35℃溫箱,一般于6~8天后死亡。剖檢時胚體及卵黃囊膜充血。卵黃囊膜涂片可散在衣原體,病理切片則可見卵黃囊膜細胞內(nèi)包涵體。

所有沙眼衣原體均可在細胞培養(yǎng)中生長,現(xiàn)多采用McCoy或HeLa229細胞株,在接種衣原體前,以X線照射細胞,或于細胞培養(yǎng)中加入代謝抑制如細胞松弛素B、DEAE葡聚糖呈放線菌酮,其目的在于細胞生長代謝緩慢,以利于衣原體的寄生性生長。

二、所致疾病

(一)沙眼:由衣原體沙眼生物變種A、B、Ba、C血清型引起。主要經(jīng)直接或間接接觸傳播,即眼~眼或眼~手~眼的途經(jīng)傳播。當沙眼衣原體感染結(jié)膜上皮細胞后,在其中增殖并在胞漿內(nèi)形成散在型、帽型、桑椹型或填塞型包涵體。該病發(fā)病緩慢,早期出現(xiàn)眼瞼結(jié)膜急性或亞急性炎癥,表現(xiàn)流淚、有粘液膿性分泌物、結(jié)膜充血等癥狀與體征。后期移行為慢性,出現(xiàn)結(jié)膜瘢痕、眼瞼內(nèi)翻、倒睫、角膜血管翳引起的角膜損害,以致影響視力,最后導致失明。據(jù)統(tǒng)計沙眼居致病因的首位。1956年我國學者湯飛凡等人用雞胚卵黃囊接種法,在世界上首次成功地分離出沙眼衣原體,從而促進了有關(guān)原體的研究。

(二)包涵體包膜炎:由沙眼生物變種D~Km.52667788.cn/rencai/血清型引起。包括嬰兒及成人兩種。前者系嬰兒經(jīng)產(chǎn)道感染,引起急性化膿性結(jié)膜炎(包涵體膿漏眼),不侵犯角膜,能自愈。成人感染可因兩性接觸,經(jīng)手至眼的的途徑或者來自污染的游泳池水,引起濾泡性結(jié)膜炎又稱游泳池結(jié)膜炎。病變類似沙眼,但不出現(xiàn)角膜血管翳,亦無結(jié)膜瘢痕形成,一般經(jīng)數(shù)周或數(shù)月痊愈,無后遺癥。

(三)泌尿生殖道感染:經(jīng)性接觸傳播,由沙眼生物變種D~K血清型引起。男性多表現(xiàn)為尿道炎,不經(jīng)治療可緩解,但多數(shù)轉(zhuǎn)變成慢性,周期性加重,并可合并副睪炎、直腸炎等。女性能引起尿道炎、宮頸炎等,輸卵管炎是較嚴重并發(fā)癥。該血清型有時也能引起沙眼衣原體性肺炎。

(四)性病淋巴肉芽腫:由沙眼衣原體LGV生物變種引起。LGV要通過兩性接觸傳播,是一種性病。男性侵犯腹股溝淋巴結(jié),引起化膿性淋巴結(jié)炎和慢性淋巴肉芽腫。女性可侵犯會陰、肛門、直腸,出現(xiàn)會陰~肛門~直腸組織狹窄。

三、免疫性

機體感染衣原體后,能誘導產(chǎn)生型特異性細胞免疫和體液免疫。但通常免疫力不強,且為時短暫,因而常造成持續(xù)性感染、隱性感染和反復(fù)感染。此外,也可能出現(xiàn)免疫病理損傷,由遲發(fā)型超敏反應(yīng)引起,如性病淋巴肉芽腫等。

四、微生物學診斷

多數(shù)衣原體引起的疾病可根據(jù)臨床癥狀和體征確診。但對早期或經(jīng)癥患者,須行實驗室檢查來幫助診斷。

(一)直接涂片鏡檢

沙眼急性期患者取結(jié)膜刮片,Giemsa或碘液及熒光抗體染色鏡檢,查上皮細胞漿內(nèi)有無包涵體。包涵體結(jié)膜炎及性病淋巴肉芽腫,也可從病損局部取材涂片,染色鏡檢,觀察有無衣原體或包涵體。

(二)分離培養(yǎng)

用感染組織的滲出液或刮取物,接種雞胚卵黃囊或傳代細胞,分離衣原體,再用免疫學方法鑒定。

(三)血m.52667788.cn/zhuyuan/清學試驗

主要用于性病淋巴肉芽腫的輔助診斷。常用補體結(jié)合試驗,若雙份血清抗體效價升高4倍或以上者,有輔助診斷價值。也可用ELISA、凝集試驗。

(四)PCR試驗

設(shè)計不同的特異性引物,應(yīng)用多聚酶鏈式反應(yīng)可特異性診斷沙眼衣原體,具有敏感性高,特異性強的特點,現(xiàn)被廣泛應(yīng)用。

五、防治原則

沙眼無特異的預(yù)防方法,疫苗在試用,效果不肯定。注意個人衛(wèi)生,不使用公共毛巾和臉盆,避免直接或間接接觸傳染,是預(yù)防沙眼的重要措施。生殖道衣原體感染的預(yù)防同其他性病一樣。

治療一般用利福平、四環(huán)素、氯霉素、強力霉素及磺胺等藥物。

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