臨床上可根據(jù)酶濃度的變化用以輔助診斷。若酶濃度變化由細(xì)胞壞死或細(xì)胞膜通透性變化引起,表示臟器或組織損傷;若為細(xì)胞內(nèi)酶合成增加所致,提示組織再生、修復(fù)、成骨或異位分泌,或提示有惡性腫瘤的可能;若為酶排泄障礙引起者說(shuō)明有梗阻存在。同工酶的分析與醫(yī)學(xué)網(wǎng)鑒定則能反應(yīng)疾病的部位、性質(zhì)和程度。
一、轉(zhuǎn)氨酶及其同工酶
(一)生物化學(xué)特性
轉(zhuǎn)氨酶或稱(chēng)氨基轉(zhuǎn)移酶是一組催化氨基在氨基酸與a-酮酸間轉(zhuǎn)移的酶類(lèi),丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)和(天)門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)是其中最重要的兩種,前者俗稱(chēng)為谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT),后者為谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)。
(二)體內(nèi)分布
AST廣泛存在于多種器官中,按含量多少順序?yàn)樾、肝、骨骼肌和腎等,肝中70%存在于肝細(xì)胞線(xiàn)粒體中。AST有兩種同工酶ASTs 和ASTm,分別存在于可溶性的細(xì)胞質(zhì)和線(xiàn)粒體。細(xì)胞輕度損傷時(shí)ASTs 升高顯著,而嚴(yán)重?fù)p傷時(shí),則ASTm大量出現(xiàn)于血清中。正常血清所含AST的同工酶主要為ASTs,但在病理狀態(tài)下,如細(xì)胞壞死,則血清中以ASTm為主。
ALT大量存在于肝臟組織中,其次為腎、心、骨骼肌等。血清ALT活性升高,通常表示肝臟損傷。ALT有兩種不同活性的同工酶a(ALTs)、b(ALTm),分別存在于細(xì)胞質(zhì)及線(xiàn)粒體,后者的活性為前者的16倍。肝細(xì)胞壞死血清中以ALTm為主。
(三)測(cè)定方法
轉(zhuǎn)氨酶的測(cè)定方法有許多種,其中以賴(lài)氏法最常用,由于此法操作簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì),一些小型實(shí)驗(yàn)室仍在使用。目前,國(guó)內(nèi)外實(shí)驗(yàn)室多采用連續(xù)監(jiān)測(cè)法進(jìn)行測(cè)定。
ALT速率法測(cè)定中酶偶聯(lián)反應(yīng)式為:
ALT
L-丙氨酸 + a-酮戊二酸 L-谷氨酸 + L-丙酮酸
LD
丙酮酸 + NADH + H+ L-乳酸 + NAD+
AST速率法測(cè)定中酶偶聯(lián)反應(yīng)式為:
ASTL-門(mén)冬氨酸 + a-酮戊二酸 草酰乙酸 + L-谷氨酸
MD草酰乙酸 +NADH + H+ L-蘋(píng)果酸 + NAD+
上述偶聯(lián)反應(yīng)中,NADH的氧化速率與標(biāo)本中酶活性呈正比,可在340nm檢測(cè)吸光度下降速率。根據(jù)線(xiàn)性反應(yīng)期吸光度下降速率(-DA/min),計(jì)算出ALT、AST的活力單位。
(四)臨床意義
ALT是反映肝損傷的一個(gè)很靈敏的指標(biāo),臨床上主要用于肝臟疾病的診斷。
各種急性病毒性肝炎、藥物或酒精中毒引起的急性肝損害時(shí),血清ALT 水平可在臨床癥狀(如黃疸)出現(xiàn)之前就急劇升高,且ALT>AST。一般而言,急性肝炎時(shí)血清ALT高低與臨床病情輕重相平行,且往往是肝炎恢復(fù)期最后降至正常的酶,是判斷急性肝炎是否恢復(fù)的一個(gè)很好指標(biāo)。假如能同時(shí)測(cè)定AST,并計(jì)算DeRitis比值,即AST/ALT之比,則對(duì)于急、慢性肝炎的診斷和鑒別診斷以及判斷肝炎的轉(zhuǎn)歸也特別有價(jià)值。急性肝炎是時(shí)DeRitis比值<1,肝硬化時(shí)DeRitis比值≥2,肝癌時(shí)DeRitis比值≥3。
重癥肝炎時(shí)由于大量肝細(xì)胞壞死,血中ALT逐漸下降,而膽紅素卻進(jìn)行性升高,出現(xiàn)所謂“酶膽分離”現(xiàn)象,常是肝壞死的前兆。
AST主要存在于心肌,以往多用于AMI的診斷。AMI發(fā)病6~8h即升高,48~60h達(dá)到高峰,4d~5d恢復(fù)正常。但由于AST在AMI 時(shí)升高遲于CK,恢復(fù)早于LD,故診斷AMI價(jià)值不大。在急性肝炎時(shí),AST雖亦顯著升高,但升高程度不及ALT,而在慢性肝炎,特別是肝硬化時(shí),AST升高程度超過(guò)ALT。膽道疾患時(shí)AST亦可升高。