1.形態(tài)與結(jié)構(gòu) 中等大小的革蘭陰性桿菌,無芽胞,多數(shù)有鞭毛和菌毛。
2.培養(yǎng)特性 營養(yǎng)要求不高。
3.生化反應(yīng) 活潑,常用生化反應(yīng)區(qū)別菌屬和菌種。乳糖發(fā)酵試驗在鑒別腸桿菌科中致病菌和非致病菌上有重要意義,致病菌多數(shù)不分解乳糖,而非致病菌一般能分解乳糖。
4.抗原構(gòu)造 復(fù)雜,分為菌體(O)抗原、鞭毛(H)抗原、莢膜(K)或包膜抗原等,為鑒別菌種和型的依據(jù)。
5.抵抗力 因無芽胞,對理化因素抵抗力不強。易產(chǎn)生耐藥性變異。
6.致病性 主要通過糞—口途徑傳播。大多為人體正常菌群,少數(shù)為條件致病菌或致病菌。
埃希菌屬是人類和動物腸道的正常菌群,以大腸埃希菌(E.coli,簡稱大腸桿菌)最重要。
(一)致病性
1.腸道外感染 多數(shù)大腸埃希菌在腸道內(nèi)不致病。但當宿主免疫力下降或細菌侵入腸外組織或器官時,可引起腸外感染,以泌尿系統(tǒng)感染為主,還可引起腹膜炎、膽囊炎、肺炎等,全身感染可致敗血癥。大腸桿菌是醫(yī)院感染的最常見的條件致病菌。
2.腹瀉 有些菌株有致病性,可引起腹瀉,根據(jù)致病機制不同,分為五類:
①腸產(chǎn)毒型大腸埃希菌(ETEC):作用于小腸,引起旅行者和嬰幼兒腹瀉。致病物質(zhì)是不耐熱腸毒素(heat labile enterotoxin,LT)、耐熱腸毒素(heatstabm.52667788.cn/zhicheng/le enterotoxin,ST)和定居因子(colonization factor)。LT是霍亂樣腸毒素,刺激胞內(nèi)cAMP增加,致小腸腸腔粘膜細胞內(nèi)水、鈉、氯等過度分泌至腸腔,引起霍亂樣腹瀉。ST使細胞內(nèi)cGMP增高,致體液平衡紊亂而腹瀉。定居因子使細菌粘附小腸粘膜上。
②腸侵襲型大腸埃希菌(EIEC):生物學(xué)特性與志賀菌相似,作用于大腸,引起菌痢樣腹瀉。細菌侵襲破壞腸粘膜上皮細胞,以及內(nèi)毒素對細胞的破壞作用,形成炎癥和潰瘍。多見于發(fā)展中國家,主要侵犯較大兒童和成人。
③腸致病型大腸埃希菌(EPEC):作用于小腸,主要引起<1歲嬰兒嚴重腹瀉。不產(chǎn)腸毒素。病菌依靠緊密粘附素(intimin)粘附于小腸微絨毛,導(dǎo)致AE損傷,即刷狀緣被破壞,微絨毛脫落,上皮細胞排列紊亂和功能受損。
④腸出血型大腸埃希菌(EHEC) 作用于大腸,引起出血性結(jié)腸炎,嚴重腹痛和血便,可并發(fā)溶血性尿毒綜合征。毒力因子主要是質(zhì)粒編碼的菌毛和噬菌體基因編碼的Vero毒素或志賀樣毒素(shiga-liketoxin,SLT)。O157∶H7為常見血清型。
⑤腸集聚型大腸埃希菌(EAEC):引起嬰兒持續(xù)性水腹,脫水,偶有血便。不侵襲細胞。可產(chǎn)生毒素和粘附素(P菌毛)。
此外,大腸桿菌某些血清型可引起泌尿系統(tǒng)感染。
(二)大腸桿菌與衛(wèi)生細菌學(xué)檢查的關(guān)系
國家衛(wèi)生部規(guī)定的飲用水的衛(wèi)生細菌學(xué)標準是:每1000ml飲水不得超過3個大腸菌群,每ml飲水細菌總數(shù)不得超過100個。飲料每100ml不得超過5個大腸菌群。
志賀菌屬(shigella)是人類細菌性痢疾最為常見的病原菌。
1.分類 志賀菌屬是無鞭毛革蘭陰性桿菌。按O抗原構(gòu)造分為痢疾志賀菌、福氏志賀菌、鮑氏志賀菌和宋內(nèi)志賀菌四個血清群。
2.致病物質(zhì)與所致疾病 主要有:①侵襲力:由質(zhì)粒編碼的ipaB、ipac和ipaD基因介導(dǎo)。菌毛粘附于回腸末端和結(jié)腸粘膜的上皮細胞上,繼而穿入上皮細胞生長繁殖,在粘膜固有層內(nèi)形成感染灶;②內(nèi)毒素:破壞結(jié)腸粘膜細胞形成潰瘍,呈現(xiàn)典型膿血便。
傳染源是病人和帶菌者,無動物宿主。主要通過糞—口途徑傳播。細菌性痢疾可分為急性菌痢、慢性菌痢、中毒性菌痢。中毒性菌痢以小兒為多見,無明顯的消化道癥狀,主要表現(xiàn)為高熱和全身中毒癥狀。
3.微生物學(xué)檢查法 挑取粘液血便接種于選擇鑒別培養(yǎng)基,挑取不發(fā)酵乳糖的半透明菌落,做生化反應(yīng)和血清學(xué)鑒定其菌群(種)和型。
1.致病物質(zhì) ①侵襲力:傷寒沙門菌(Salmonella)侵入小腸粘膜后,菌毛先粘附至M細胞表面,引發(fā)細胞肌動蛋白重排、內(nèi)在化,之后被吞噬細胞所吞噬。Vi抗原有抗吞噬作用,故沙門菌能在吞噬細胞內(nèi)生長,為胞內(nèi)寄生菌;②內(nèi)毒素:沙寒沙門菌兩次入血引起菌血癥,細菌死亡后釋放出內(nèi)毒素,引起持續(xù)高熱、全身中毒癥狀。因變態(tài)反應(yīng)的發(fā)生可導(dǎo)致腸道局部炎癥、壞死和潰瘍,以及腸出血。鼠傷寒沙門菌可產(chǎn)生類似大腸桿菌的腸毒素。
2.所致疾病 人類沙門菌感染有4種類型:①腸熱癥,包括傷寒和副傷寒:由傷寒和副甲、乙、丙沙門菌引起,只對人類致;②胃腸炎(食物中毒):是最常見的沙門菌感染,多由鼠傷寒沙門菌引起;③敗血癥:多由豬霍亂沙門菌引起;④無癥狀帶菌者。
3.免疫性 病后有牢固免疫性,以細胞免疫為主。
4.微生物學(xué)檢查法 腸熱癥因病程不同采取不同標本。第1周做血培養(yǎng),第2周起取糞便和尿液培養(yǎng),第1~3周取骨髓液。血液和骨髓液先行增菌后,接種選擇鑒別培養(yǎng)基做分離培養(yǎng)。選取不發(fā)酵乳糖的半透明菌落做生化試驗和血清學(xué)試驗進行鑒定。
肥達(Widal)試驗是用已知傷寒桿菌O、H抗原和副傷寒桿菌H抗原與不同稀釋度的待檢病人血清作定量凝集試驗,根據(jù)抗體含量和動態(tài)變化以輔助診斷的血清學(xué)試驗。
【A型題】
1.區(qū)分腸桿菌科中致病菌與非致病菌最有價值的試驗是:
A.葡萄糖發(fā)酵試驗 B.乳糖發(fā)酵試驗
C.動力試驗 D.革蘭染色法
E.血清學(xué)試驗
2.大腸桿菌O157∶H7屬于:
A.腸產(chǎn)毒型大腸桿菌 B.腸侵襲型大腸桿菌
C.腸致病型大腸桿菌 D.腸出血型大腸桿菌
E.腸集聚型大腸桿菌
3.能產(chǎn)生志賀樣毒素的細菌是:
A.腸產(chǎn)毒型大腸桿菌 B.腸侵襲型大腸桿菌
C.腸致病型大腸桿菌 D.腸出血型大腸桿菌
E.腸集聚型大腸桿菌
4.腸產(chǎn)毒型大腸桿菌不耐熱腸毒素的致病機制是:
A.抑制蛋白質(zhì)的合成 B.抑制神經(jīng)介質(zhì)的釋放
C.激活腺苷環(huán)化酶 D.作用于腸壁植物神經(jīng)
E.侵襲和破壞腸粘膜上皮細胞
5.大腸桿菌O157∶H7:
A.是嬰幼兒和旅游者腹瀉的重要病原菌
B.主要引起類似菌痢的腹瀉
C.不產(chǎn)生腸毒素,是嬰兒腹瀉的主要病原菌
D.引起出血性結(jié)腸炎、嚴重腹痛和血便
E.引起嬰兒持續(xù)性水瀉
6.我國衛(wèi)生部規(guī)定:飲用水標準是,每1升飲用水中:
A.細菌總數(shù)不得超過3個 B.細菌總數(shù)不得超過100個
C.細菌總數(shù)不得超過3000個 D.大腸菌群數(shù)不得超過100個
E.大腸菌群數(shù)不得超過3個
7.痢疾志賀菌:
A.為革蘭陰性桿菌,有鞭毛B.大多能分解乳糖
C.能引起敗血癥 D.易產(chǎn)生多重耐藥菌株
E.在外界生存時間甚短
8.志賀菌屬:
A.在我國目前流行的主要是鮑氏志賀菌
B.具有O、H、K抗原
C.儲存宿主是人和動物
D.目前尚無有效的疫苗預(yù)防
E.不易產(chǎn)生耐藥性
9.急性中毒性菌痢主要臨床表現(xiàn)為:
A.全身性中毒癥狀B.劇烈上吐下瀉
C.粘液膿血便 D.相對緩脈
E.腹痛、腹瀉
10.下列哪一種疾病不宜取血做微生物學(xué)檢查。
A.細菌性心內(nèi)膜炎 B.流腦
C.傷寒 D.菌痢
E.布魯菌病
11.兩次進入血流并以內(nèi)毒素引起臨床癥狀的細菌是:
A.霍亂弧菌 B.腦膜炎球菌
C.傷寒沙門菌 D.痢疾桿菌
E.結(jié)核桿菌
12.傷寒病后,帶菌者最常見的帶菌部位是:
A.血液 B.膽囊
C.腸系膜淋巴結(jié) D.小腸上皮細胞
E.吞噬細胞
13.腸熱癥第2~3周腸壁淋巴結(jié)壞死,形成潰瘍的原因是:
A.內(nèi)毒素作用B.腸毒素作用
C.Ⅳ型變態(tài)反應(yīng) D.Ⅲ型變態(tài)反應(yīng)
E.細菌直接侵犯
14.發(fā)燒一周疑似傷寒病人,陽性率最高的微生物學(xué)檢查法是:
A.糞便培養(yǎng) B.血培養(yǎng)
C.膽汁培養(yǎng) D.尿液培養(yǎng)
E.肥達反應(yīng)
15.發(fā)熱2天患者肥達反應(yīng)結(jié)果:TH-,TO1:40,PA-,PB1:80,1周后再次檢查,
TH1:80,TO1:160,PA640,PB1:80,最合理的解釋是:
A.確診為傷寒B.非特異性回憶反應(yīng)
C.甲型副傷寒D.乙型副傷寒
E.傷寒沙門菌、甲型副傷寒沙門菌混合感染
16.肥達反應(yīng),僅O抗體增高,且隨病程逐漸升高,而H不高,這表明:
A.傷寒早期 B.傷寒帶菌者
C.傷寒病晚期D.非特異性回憶反應(yīng)
E.感染了與傷寒沙門菌有共同抗原的其它沙門菌
17.診斷腸熱癥有價值的肥達反應(yīng)的結(jié)果是:
A.TO1:40 TH1:1280 PA1:1280 PB1:1280
B.TO1:320 TH1:40 PA1:40 PB1:40
C.TO1:40 TH1:320 PA1:40 PB1:40
D.TO1:40 TH1:160 PA1:40 PB1:40(第一周)
TO1:160 TH1:320 PA1:40 PB1:40(第二周)
E.TO1:40 TH1:80 PA1:40 PB1:40
18.在發(fā)病第一周血培養(yǎng)是陽性結(jié)果,該患者所患疾病很可能是:
A.痢疾志賀菌引起的菌痢B.腸產(chǎn)毒性大腸桿菌引起的腹瀉
C.鼠傷寒沙門菌引起的腸炎 D.傷寒沙門菌引起的傷寒
E.空腸彎曲菌引起的腸炎
19.鑒定腸桿菌科致病菌最確切的根據(jù)是:
A.革蘭染色性B.SS培養(yǎng)基上菌落特征
C.雙糖培高級職稱考試網(wǎng)養(yǎng)基上的生長現(xiàn)象D.抗原結(jié)構(gòu)
E.檢測患者血清中的抗體
20.不能引起食物中毒的細菌是:
A.金黃色葡萄球菌 B.肉毒梭菌
E.鼠傷寒沙門菌
21.不能引起腹瀉的細菌是:
A.鼠傷寒沙門菌 B.金黃色葡萄球菌
C.幽門螺桿菌 D.腸出血型大腸桿菌
E.霍亂弧菌
22.腸桿菌科的微生物學(xué)檢查中,哪一項無意義:
A.涂片革蘭染色鏡檢B.血清學(xué)反應(yīng)
C.生化反應(yīng) D.細菌分離培養(yǎng)
E.動力試驗
23.能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的是:
A.傷寒沙門菌B.痢疾桿菌
C.大腸桿菌 D.變形桿菌
E.鼠傷寒沙門菌
【A型題】
24.腸桿菌科細菌:
A.均不形成芽胞 B.均為G-菌
C.均有鞭毛 D.鑒別依據(jù)是生化反應(yīng)和抗原結(jié)構(gòu)
E.易產(chǎn)生耐藥性
25.大腸桿菌:
A.能分解乳糖,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣B.是腸道內(nèi)正常菌群,不致病
C.能引起腸道外感染D.大多數(shù)菌株動力試驗陰性
E.是水的衛(wèi)生細菌學(xué)檢查的指標菌
26.志賀菌屬的分群依據(jù)是:
A.產(chǎn)生毒素不同 B.溶血性不同
C.抗原結(jié)構(gòu)不同 D.生化反應(yīng)不同
E.所致疾病不同
27.細菌性痢疾愈后不能獲得牢固免疫,其原因包括:
A.細菌停留在腸壁局部 B.菌型多
C.型別之間缺乏交叉免疫性D.尚無有效的疫苗
E.易產(chǎn)生耐藥性菌株
28.傷寒沙門菌:
A.在小腸引起病變 B.為胞內(nèi)寄生菌
C.侵入人體引起二次菌血癥D.有病后長期帶菌者
E.不能分解乳糖
29.有關(guān)“傷寒沙門菌”的敘述,哪幾項是錯誤的:
A.由消化道侵入
B.發(fā)生全身性感染(病菌在肝、脾、骨髓、腎中增殖)
C.病菌僅從糞便中排出
D.病后不能獲得牢固的免疫
E.可引起Ⅳ型變態(tài)反應(yīng)
30.腸桿菌科感染的微生物學(xué)檢查中,哪幾項是正確的:
A.傷寒病人發(fā)病1~2周可取血液
B.快速診斷細菌性痢疾可用熒光菌球法
C.分離培養(yǎng)應(yīng)選用選擇鑒別性培養(yǎng)基
D.可用血清學(xué)試驗作出最后鑒定
E.形態(tài)染色在鑒定中有重要意義
31.不能引起尿路感染的細菌是:
A.空腸彎曲菌B.表皮葡萄球菌
C.奇異變形桿菌 D.銅綠假單胞菌
E.大腸桿菌
[思考題]
32.大腸桿菌是醫(yī)院感染最常見的病原菌。簡述其致病特點。
33.治療傷寒患者應(yīng)注意哪些問題?為什么?
【A型題】
1.C* 2.D 3.D 4.C 5.D
6.E 7.D* 8.D 9.A10.D*
11.C12.B* 13.C* 14.B15.C*
16.E*17.D*18.D* 19.E20.D
21.C22.A 23.C
【X型題】
24.A B D E25.C* E* 26.C D
27.A* B* C* D* 28.AB C D E 29.C D
30.A* B* C* D* 31.BC D E
【題1】 糞便標本中的致病菌通常是指傷寒、副傷寒沙門菌、志賀菌等,非致病菌通常是指大腸桿菌。致病菌與非致病菌的主要生化反應(yīng)差異在于分解乳糖。一般非致病菌能分解乳糖,產(chǎn)酸產(chǎn)氣,而致病菌除宋內(nèi)痢疾桿菌能遲緩發(fā)酵乳糖外,其他腸道致病菌均不能分解乳糖。
【題7】 志賀菌屬僅宋內(nèi)志賀菌遲緩分解乳糖,痢疾志賀菌不分解乳糖。痢疾志賀菌無鞭毛,通常不侵入血液。在37℃水中存活20天,冰塊中96天。由于R質(zhì)粒的傳遞,痢疾志賀菌易產(chǎn)生耐藥性。
【題10】 痢疾志賀菌感染病灶局限于腸道,細菌很少擴散至粘膜外,或進入血液,不引起敗血癥。因此,細菌性痢疾應(yīng)挑取糞便的膿血粘液部分作微生物學(xué)檢查。而其他疾病的病原菌可入血引起菌血癥或敗血癥,能在發(fā)病早期從患者血中分離到細菌。
【題12】 傷寒病愈后,有部分患者成為恢復(fù)期帶菌者,少數(shù)可排菌1年以上。傷寒沙門菌主要隱匿在帶菌者的膽囊中,間歇地隨膽汁進入腸腔后,經(jīng)糞便排出體外。在傷寒病流行時,帶菌者是最重要的傳染源。
【題13】 傷寒發(fā)病2~3周,膽囊中的傷寒沙門菌通過膽汁進入腸道,再次侵入腸壁淋巴組織,使已致敏的組織發(fā)生Ⅳ變態(tài)反應(yīng),導(dǎo)致局部壞死和潰瘍,嚴重的有出血或腸穿孔等并發(fā)征。
【題15,16,17】 肥達試驗判定結(jié)果時應(yīng)考慮以下幾點:①因沙門菌隱性感染或預(yù)防接種,人體血清中可含有一定量的有關(guān)抗體,故一般O抗體凝集價≥1∶80,H抗體凝集價≥1∶160才有診斷意義;②若兩次試驗效價效價≥4倍則更有意義;③如O高H不高,可能是沙門菌早期感染或交叉反應(yīng);如H高O不高,則可能是接種疫苗后的非特異回憶反應(yīng)。
【題18】 僅傷寒沙門菌感染可引起菌血癥,其他的感染僅限于腸粘膜和粘膜下層,很少進入血液。傷寒發(fā)病第4周,僅25%病人仍有菌血癥,此時,細菌很可能從糞便、尿液或骨髓中分離到。
【題25】 大腸桿菌能分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣,有鞭毛,即動力試驗陽性。大腸桿菌是人體腸道正常菌群,一般不致病,但當發(fā)生定位轉(zhuǎn)移時,可引起腸道外感染。有些菌株為致病菌,可引起腹瀉,尤其是大腸桿菌O157:H7可引起暴發(fā)流行。大腸桿菌寄居在腸道,不斷隨糞便排出,污染周圍環(huán)境和水源、食品等。因此,飲水、食品的衛(wèi)生細菌學(xué)檢查常以大腸菌群作為被糞便污染的指標。但空氣衛(wèi)生細菌學(xué)檢查常以鏈球菌作為指示菌。
【題27】 痢疾志賀菌感染病灶局限在腸道,細菌一般不進入血液,故其抗感染免疫主要為腸粘膜表面的分泌型IgA。該抗體免疫力不強,維持時間短。此外,志賀菌型別多,型別之間少有交叉免疫性,因此,在感染某些菌型后,仍可被其他不同型別的志賀菌感染。
【題30】 糞便標本中常見的病原菌有志賀菌屬、致病性大腸桿菌、弧菌屬、沙門菌、金黃色葡萄球菌、艱難梭菌等。糞便標本中因各種正常菌群含量甚多,僅以染色性和形態(tài)無法分辯是否為病原菌,因此,糞便標本一般不作直接涂片檢查,只有檢查霍亂弧菌、結(jié)核桿菌、疑似葡萄球菌或艱難梭菌引起的偽膜性腸炎時,才作直接涂片檢查。