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1.2 方法 標(biāo)本離體后分成腎癌組織組、癌旁組織組、正常腎組織組，每組8例，均用10%的甲醛固定48 h，石蠟包埋5 μm切片，同時(shí)應(yīng)用免疫組織化學(xué)(immunohistochemistry)方法觀察細(xì)胞增殖標(biāo)記物增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)的表達(dá)變化，探討PCNA的表達(dá)與腎癌的關(guān)系。所有標(biāo)本均在Motic Med 6.0數(shù)碼醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng)內(nèi)在相同的放大倍數(shù)(400)下，每個(gè)組計(jì)數(shù)30個(gè)視野中的總細(xì)胞數(shù)和陽性細(xì)胞數(shù)，計(jì)算增殖細(xì)胞的百分比，作為增殖指數(shù)(proliferation indx，PI)。
1.3 腫瘤分期標(biāo)準(zhǔn) Ⅰ期:腫瘤局限在腎包膜內(nèi)。Ⅱ期:腫瘤穿破腎包膜侵犯腎周圍脂肪組織，但局限在腎周圍筋膜以內(nèi)。Ⅲ期:腫瘤侵及區(qū)域淋巴結(jié)，或(和)腎靜脈、腔靜脈。Ⅳ期:腫瘤侵犯附近器官或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 計(jì)量資料以±s表示，采用t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié)果
PCNA免疫組化染色: 正常腎組織內(nèi)的細(xì)胞核有弱陽性表達(dá)，細(xì)胞核內(nèi)有弱棕黃色顆粒顏色，癌旁陽性表達(dá)輕度增加，細(xì)胞核內(nèi)的棕黃色顆粒顏色高于正常腎組織，腎癌組織陽性表達(dá)明顯增多，細(xì)胞核內(nèi)棕黃色顆粒顏色明顯加深, 明顯高于癌旁組織(圖1～3)，正常腎組織組與腎癌組、癌旁組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見表1。腎癌4個(gè)期之間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)�！”�1 PCNA在腎癌組織、癌旁組織和正常腎組織表達(dá)比較注：與對(duì)照組比較，^P<0.01
3 討論
PCNA是DNA聚合酶δ的輔助蛋白，其合成明顯與細(xì)胞周期有關(guān)：靜止期細(xì)胞內(nèi)含量很少，G1晚期開始大幅度增加，S期達(dá)到高峰，G2M期明顯下降，其量的變化與DNA合成一致[3]。PCNA是反應(yīng)細(xì)胞增殖分?jǐn)?shù)和所處周期的客觀指標(biāo)[4]。目前也是腎癌標(biāo)記物熱點(diǎn)研究之一[5]醫(yī).學(xué)全.在.線網(wǎng)站m.52667788.cn。
腎癌細(xì)胞的生物學(xué)行為與癌細(xì)胞的增殖活性密切相關(guān)，PCNA是一種僅在增殖狀態(tài)細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)的非組蛋白型核蛋白。PCNA的表達(dá)越高說明DNA復(fù)制活躍程度增加，它是反映細(xì)胞增生的一項(xiàng)重要指標(biāo)。我們的實(shí)驗(yàn)顯示：PCNA在正常腎組織、癌旁組織和腎癌組織中陽性表達(dá)不同，3組兩兩比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明PCNA在腎透明細(xì)胞癌發(fā)生過程中起著重要作用，并且可以作為腎透明細(xì)胞癌診斷的一種參考指標(biāo)。另外PCNA的活躍程度也反映了腎透明細(xì)胞癌的發(fā)生狀態(tài)。
關(guān)于PCNA在腎透明細(xì)胞癌不同分期表達(dá)差異性的研究，目前還不完全一致，多數(shù)認(rèn)為PCNA表達(dá)顯著相關(guān)于高分期[6]，但少數(shù)研究結(jié)果認(rèn)為PCNA表達(dá)與分期無相關(guān)關(guān)系[7]，我們的數(shù)據(jù)顯示PCNA在正常腎組織、癌旁組織及腎癌組織之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而在腎癌組織4個(gè)分期之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
實(shí)驗(yàn)表明，腎癌組織PCNA表達(dá)增加，癌旁組織輕度增加，正常腎組織也有一定表達(dá)，但明顯少于腎癌組織，表明增殖過度可能導(dǎo)致腎癌病變的發(fā)生。
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