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主要為組織細(xì)胞，另可見(jiàn)多核巨細(xì)胞、漿細(xì)胞，偶見(jiàn)中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、壞死細(xì)胞(Fig2).組織細(xì)胞及多核巨細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)見(jiàn)大量溶酶體樣結(jié)構(gòu)(Fig3).
圖2 多核巨細(xì)胞(MN)、組織細(xì)胞(H)、淋巴細(xì)胞(L)、漿細(xì)胞(P)、壞死細(xì)胞(D)，壞死的細(xì)胞內(nèi)有殘留細(xì)胞器.Fig2c中有可疑的球菌(C)及桿菌(B)(略)
Fig2 Pictures show multinuclear giant cells(MN)，histocytes(H)，lymphocyte(L)，plasmocyte(P)，necrosis cell(D).There are organelles in the necrosis cell.The coccus(C)and bacilli(B)can be seen in the Fig2c
圖3 多核巨細(xì)胞(a)及組織細(xì)胞(b)內(nèi)均有大量溶酶體樣結(jié)構(gòu)(略)
Fig3 There are a lot of lysosome-like structures in the multinuclear giant cells(a)and histocytes(b)
圖4 典型的球菌(a)及桿菌(b)Fig4 Coccus(a)and bacilli(b)(略)
2.2 細(xì)菌
第一次觀察時(shí)主要注意到少數(shù)細(xì)胞內(nèi)有典型的球菌(Fig4a)，并發(fā)現(xiàn)一典型的細(xì)胞外桿菌(Fig4b)，未發(fā)現(xiàn)真菌、病毒顆粒及其他病原體.對(duì)多核巨細(xì)胞及組織細(xì)胞中的溶酶體樣結(jié)構(gòu)反復(fù)觀察分析，發(fā)現(xiàn)大部分具有桿菌的特點(diǎn)，多為雙層膜結(jié)構(gòu)，有空泡，大小0.3μm×1μm(Fig5a～g)，少數(shù)直徑約2μm(Fig5m～o)，有缺少界膜呈空泡狀的核區(qū);細(xì)胞質(zhì)膜多較清楚(Fig5a～p)，由二個(gè)電子致密層與一個(gè)電子透明層構(gòu)成，厚度5～10nm(Fig6);細(xì)胞壁僅見(jiàn)于一個(gè)細(xì)菌中，基本結(jié)構(gòu)為二個(gè)電子致密層與一個(gè)電子透明層，厚度不均，約30～60nm(Fig6).
圖5 多核巨細(xì)胞及組織細(xì)胞內(nèi)的溶酶體樣結(jié)構(gòu)中，部分具有典型的細(xì)菌形態(tài)，有核區(qū);細(xì)胞質(zhì)膜多較清楚(略)
Fig5 Part of lysosomoid structures in the multinuclear giant cells and histocytes show typical bacilli form.There are nuclear area and clear cytoplasmic membrane in most of them
3 討論
對(duì)于懷疑由病原體所致的疾患，電鏡下發(fā)現(xiàn)損害中的病原體是最具說(shuō)服力的證據(jù).此類病例中，多位學(xué)者曾認(rèn)真進(jìn)行過(guò)細(xì)菌分離等探討，但一直未能找到病因及挽救患者的生命.我們第一次采用透射電鏡對(duì)該病進(jìn)行觀察，找到了病原菌，雖然第一例患者仍未能被救活，但電鏡下觀察到當(dāng)時(shí)認(rèn)為的“桿菌”，并依據(jù)此發(fā)現(xiàn)推斷以往反復(fù)細(xì)菌培養(yǎng)均未獲得成功可能是該菌為嚴(yán)格厭氧菌，為此進(jìn)行嚴(yán)格的厭氧培養(yǎng)并分離出病原及救活了患者，即電鏡觀察為該病確定奠定了非常重要的基礎(chǔ).
行電鏡觀察的兩個(gè)病例中，均找到了球菌，細(xì)菌分離培養(yǎng)第1例每次均為表皮葡萄球菌，第2例為頭狀葡萄球菌.表皮葡萄球菌及頭狀葡萄球菌均系凝固酶陰性的葡萄球菌，易于分離培養(yǎng).以往的研究者均未獲結(jié)果，其失敗原因有三種可能:一是細(xì)菌培養(yǎng)前應(yīng)用抗生素使其被殺滅;二是我們的兩例患者均碰巧伴有混合感染，其他的為單一感染或伴有另外的細(xì)菌感染;三是此類葡萄球菌為最常見(jiàn)的污染菌，檢驗(yàn)人員將其視為污染菌未予報(bào)告，因?yàn)槲覀兊牡谝焕性l(fā)生過(guò)此種情況.各種凝固酶陰性的葡萄球菌在患者抵抗力低下時(shí)可以作為一種條件致病菌造成化膿性感染，因其對(duì)多數(shù)抗菌素敏感，易于治療.本病的皮損從不發(fā)生化膿，使用對(duì)分離出的葡萄球菌敏感的抗菌素未能挽救患者的生命，提示致患者死亡的細(xì)菌不是它，而是厭氧性放線菌.葡萄球菌或許在本病中的作用只是消耗氧，為厭氧菌的生長(zhǎng)創(chuàng)造條件.
圖6 Fig5局部放大，示細(xì)胞壁(空十字)有2個(gè)電子致密層與1個(gè)電子透明層，厚度不均，約30～60nm.細(xì)胞質(zhì)膜(彎箭頭)也由2個(gè)很薄的電子致密層與1個(gè)電子透明層構(gòu)成，總厚度約10nm(略)
Fig6 It is local magnification of Fig5to show cell wall(empty cross)，which consists of2electron-dense layers and1electron-lucent layer.It is uneven in thickness.Cytoplas-mic membrane(curve arrow)also consists of2electron-dense layers and1electron-lucent layer but much thin
