復方左炔諾孕酮滴丸—左炔諾孕酮和炔雌醇的測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定復方左炔諾孕酮滴丸中左炔諾孕酮和炔雌醇的含量。

本方法適用復方左炔諾孕酮滴丸。

將供試品內(nèi)精密加入內(nèi)標溶液，經(jīng)水浴攪拌溶解，于冰水中冷卻使基質(zhì)凝固，濾過，再向基質(zhì)中加甲醇，濾液置于50mL量瓶中并加甲醇稀釋至刻度，冷凍2小時以上，快速過濾后，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長220nm處檢測左炔諾孕酮（C₂₁H₂₈O₂)和炔雌醇（C₂₀H₂₄O₂)和內(nèi)標醋酸甲地孕酮的吸收值，計算出其含量。

乙腈

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數(shù)按左炔諾孕酮峰計算應不低于 5000。左炔諾孕酮峰與內(nèi)標峰的分離度應符合要求。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：乙腈 水= 60 40

2.2 檢測波長：220nm

2.3 柱溫：室溫

1. 稱取供試品

取本品20丸，精密稱定，研細，精密稱取適量（約相當于左炔諾孕酮0.75mg)，置10mL量瓶中。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取左炔諾孕酮和炔雌醇對照品適量，用乙腈溶解并定量稀釋制成每1mL中約含有左炔諾孕酮0.75mg與炔雌醇0.15mg的溶液，精密量取此溶液與內(nèi)標溶液各1mL，置10mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。

3. 內(nèi)標溶液的制備

取醋酸甲地孕酮適量，加乙腈稀釋每1mL含1mg的溶液，即得。

4. 供試品溶液的制備

上述供試品置10mL量瓶中，精密加入內(nèi)標溶液1mL，加流動相適量，超聲處理使溶解，放冷，用流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取上述對照品溶液和供試品溶液的續(xù)濾液20μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長220nm處測定左炔諾孕酮和炔雌醇及內(nèi)標醋酸甲地孕酮的吸收值，按內(nèi)標法以峰面積分別計算左炔諾孕酮和炔雌醇的含量，即得。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005年版，二部，p424。