方法名稱： |
黃柏-小檗堿的含量測定-HPLC-UV5 |
應(yīng)用范圍： |
用于黃柏中小檗堿的含量測定 |
方法原理： |
本品細(xì)粉加甲醇超聲提取，經(jīng)液相色譜分離，在345nm處測定峰面積，外標(biāo)法計(jì)算含量。 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件： |
儀器設(shè)備 10A-VP 高效液相色譜儀：LC-10A Tvp 泵；SPD-M10Avp 二極管陣列檢測器(日本島津公司)；CLASS-VP 色譜工作站(日本島津公司)。 色譜條件 色譜柱：Hypersil BDS C18 (150mm×416mm，5μm)；美國THERMO 有限公司)；流動相：乙腈-33mmol/L磷酸二氫鉀溶液-三乙胺(20∶72∶0.1，用磷酸調(diào)pH值為4.50)；檢測波長：345nm；柱溫：25℃；流速：1.0ml/min。 |
試樣制備： |
對照品溶液的制備 準(zhǔn)確稱取鹽酸小檗堿對照810mg，置100ml容量瓶中，加甲醇溶解，并稀釋至刻度，搖勻，即得。 供試品溶液的制備 準(zhǔn)確稱定黃柏藥材粉末0.5g，置于25ml容量瓶中，加甲醇25ml，超聲處理30min，放至室溫，加甲醇至刻度，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取續(xù)濾液，即得；測定樣品溶液的制備：按原處方中各味藥的比例，準(zhǔn)確稱取黃柏2g、甘草2g、桑寄生2g，按以下各組方案進(jìn)行配比試驗(yàn)：黃柏單煎(Ⅰ)，黃柏與甘草(Ⅱ)，黃柏與桑寄生(Ⅲ)，黃柏與甘草、桑寄生(Ⅳ)，甘草與桑寄生(Ⅴ)，即分別加10倍量水煎煮2 次，每次1.5h，合并煎液，濃縮，水浴蒸干，用甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至10ml容量瓶中，稀釋至刻度，精密吸取2ml，用5g堿性氧化鋁吸附，裝柱，并用50ml甲醇洗脫，收集洗脫液，水浴蒸干，再用甲醇溶解轉(zhuǎn)移至10ml容量瓶，定容，用微孔濾膜(0.45μm) 濾過，取續(xù)濾液，即得。 |
操作步驟： |
在選定的色譜條件下，分別吸取對照品和供試品溶液各5μl進(jìn)樣，測定峰面積值，按外標(biāo)法計(jì)算含量。 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
李巧如，張鵬，陳世虎等. 黃柏與甘草及桑寄生共煎對小檗堿提取率影響的研究. 中國藥房. 2005，16(3)：235～236 |
