| 公開(公告)號(hào) | CN1786154A |
| 公開(公告)日 | 2006.06.14 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200510015492.2 |
| 申請(qǐng)日期 | 2005.10.18 |
| 專利名稱 | 人胎盤、臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞庫(kù)及其構(gòu)建方法 |
| 主分類號(hào) | C12N5/08(2006.01)I |
| 分類號(hào) | C12N5/08(2006.01)I |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 天津昂賽細(xì)胞基因工程有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 韓忠朝;劉擁軍 |
| 地址 | 300457天津市泰達(dá)開發(fā)區(qū)第四大街天大科技園B3-B4 |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 天津市北洋有限責(zé)任專利代理事務(wù)所 |
| 代理人 | 陸 藝 |
| 國(guó)省代碼 | 天津;12 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種人胎盤、臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞庫(kù)，其特征是由下述步驟建成： (1)取人胎盤、臍帶進(jìn)行ABO/Rh血型檢測(cè)、HLA分型的檢測(cè)、微生物免疫檢測(cè)，用磷酸緩沖液沖洗去除殘留血液，粉碎，加入1～1.5倍于粉碎物體積的磷酸緩沖液稀釋； (2)加入步驟(1)所獲得溶液體積的1/2～1/3的質(zhì)量/體積比為0.05％～0.2％的膠原酶磷酸緩沖液溶液消化，溫度為37℃，消化40～70分鐘，過(guò)100-200目篩，將濾過(guò)的細(xì)胞混懸液與未消化組織分開； (3)向未消化組織中，加入1～1.5倍于未消化組織體積的磷酸緩沖液稀釋； (4)加入步驟(3)所獲得溶液體積的1/2～1/3的質(zhì)量/體積比為0.05％～0.2％的胰酶磷酸緩沖液溶液消化，消化溫度為37℃，消化時(shí)間為10～30分鐘，在此100ml溶液中加入1-2g的血清終止胰酶作用，過(guò)100-200目篩，濾過(guò)液為細(xì)胞混懸液； (5)將步驟(2)及步驟(4)所獲得的細(xì)胞混懸液混合，離心，棄去上清液，用磷酸緩沖液洗滌1～3次去除殘余酶，再離心，棄去上清液，即獲得間充質(zhì)干細(xì)胞； (6)將間充質(zhì)干細(xì)胞置液氮冷凍，按其ABO/Rh分型和HLA分型進(jìn)行保存，建立可供檢索的細(xì)胞信息檔案，即構(gòu)建出人胎盤、臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞庫(kù)。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種人胎盤、臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞庫(kù)及其構(gòu)建方法，本發(fā)明的構(gòu)建步驟包括：(1)取人胎盤、臍帶進(jìn)行檢測(cè)，用磷酸緩沖液沖洗滌后粉碎，加磷酸緩沖液稀釋；(2)加入膠原酶消化；(3)加入磷酸緩沖液稀釋；(4)加入胰酶消化；(5)將步驟(2)及步驟(4)所獲得的細(xì)胞混合，離心，棄去上清液，用磷酸緩沖液洗滌，再離心，棄去上清液，即獲得間充質(zhì)干細(xì)胞；(6)將間充質(zhì)干細(xì)胞置液氮冷凍，按其ABO/Rh分型和HLA分型進(jìn)行保存，建立可供檢索的細(xì)胞信息檔案，即構(gòu)建出人胎盤、臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞庫(kù)。本發(fā)明為新生兒儲(chǔ)存胎盤及臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞，為其本人、家屬和他人提供間充質(zhì)干細(xì)胞治療疾病及其他應(yīng)用。 |
| 國(guó)際公布 |
