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重組人白細(xì)胞介素-1受體拮抗劑的純化方法

公開(公告)號(hào) CN1273484C  
公開(公告)日 2006.09.06  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN02125806.6  
申請(qǐng)日期 2002.07.29  
專利名稱 重組人白細(xì)胞介素-1受體拮抗劑的純化方法  
主分類號(hào) C07K14/435(2006.01)I  
分類號(hào) C07K14/435(2006.01)I;C07K1/18(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 北京北醫(yī)聯(lián)合生物工程公司  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 馬大龍;狄春輝;朱仁英;楊 璐;韓 普  
地址 100083北京市海淀區(qū)學(xué)院路38號(hào)北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部  
頒證日  
國際申請(qǐng)  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 北京三友知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司  
代理人 黃 健  
國省代碼 北京;11  
主權(quán)項(xiàng) 重組人白細(xì)胞介素-1受體拮抗劑的純化方法,其特征在于,將含有目的蛋白的樣品順序進(jìn)行陰離子交換液相層析和陽離子交換液相層析; 其中,陰離子交換液相層析過程的層析介質(zhì)為DEAEFastFlow; 使用的緩沖液包括:A液:pH8.550mMTris-HCl緩沖液 B液:pH6.820mMPB 樣品在A液中上樣,上樣完畢后,先以A液沖洗已載有目的蛋白的層析柱,然后采用B液進(jìn)行梯度洗脫,B液的洗脫梯度為0%-80%;當(dāng)B液梯度為80%時(shí),收集洗脫峰; 陽離子交換液相層析過程的層析介質(zhì)為CMFastFlow; 使用的緩沖液包括:A液:pH5.550mMHAc-NaAc緩沖液 B液:2MNaCl 以陰離子交換液相層析過程的收集組份上樣,上樣完畢后,先以A液沖洗已載有目的蛋白的層析柱,然后采用B液進(jìn)行梯度洗脫,B液的洗脫梯度為0%-80%;當(dāng)B液梯度為10%時(shí),收集洗脫峰。  
摘要 本發(fā)明公開了一種分離純化蛋白,尤其是重組人白細(xì)胞介素-1受體拮抗劑的方法,采用二步液相層析法,首先進(jìn)行陰離子交換液相層析,然后再進(jìn)行陽離子交換層析。本發(fā)明利用簡單的方法替代繁瑣的傳統(tǒng)方法獲得了意想不到的效果,即,只使用簡單的二步液相層析法就得到了高純度,高活性的重組人白細(xì)胞介素-1受體拮抗劑,對(duì)于其它的蛋白質(zhì)純化工藝也提供了新的思路。  
國際公布  
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