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人羊膜間充質(zhì)干細胞的分離及培養(yǎng)方法及醫(yī)用組合物

公開(公告)號 CN1810959A  
公開(公告)日 2006.08.02  
申請(專利)號 CN200610033007.9  
申請日期 2006.01.13  
專利名稱 人羊膜間充質(zhì)干細胞的分離及培養(yǎng)方法及醫(yī)用組合物  
主分類號 C12N5/08(2006.01)I  
分類號 C12N5/08(2006.01)I;A61K35/50(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權  
申請(專利權)人 深圳市北科生物科技有限公司  
發(fā)明(設計)人 胡 祥;楊 波  
地址 518057廣東省深圳市南山區(qū)科技園深港產(chǎn)學研基地大樓西座W400座  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構 深圳市中知專利商標代理有限公司  
代理人 宋湘紅  
國省代碼 廣東;44  
主權項 一種人羊膜間充質(zhì)干細胞的分離及培養(yǎng)方法,其特征在于包括如下順序的步驟: (1)取人羊膜先用胰蛋白酶消化,然后用膠原酶、脫核糖核酸酶消化,得到細胞懸液; (2)將上一步所得的細胞懸液過濾,制成單細胞懸液; (3)將第(2)步所得細胞接種于培養(yǎng)基中,置于37℃、飽和濕度、體積分數(shù)為5%的CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng),并通過換液和傳代,使人羊膜間充質(zhì)干細胞逐漸得到擴增和純化,所述培養(yǎng)基采用VDMEM∶VF12=1∶1的DMEM/F12培養(yǎng)基,其中含有體積百分含量為10%-20%的胎牛血清和終濃度為10-20ng/ml的堿性成纖維生長因子。  
摘要 本發(fā)明為一種人羊膜間充質(zhì)干細胞的分離及培養(yǎng)方法及醫(yī)用組合物,分離及培養(yǎng)方法是將人羊膜用胰蛋白酶、膠原酶、脫氧核糖核酸酶相繼消化,然后過濾制成單細胞懸液,再采用加有體積百分含量為10%-20%的胎牛血清和終濃度為10-20ng/ml的堿性成纖維生長因子的VDMEM∶VF12=1∶1的DMEM/F12培養(yǎng)基,置于37℃、飽和濕度、體積分數(shù)為5%的CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng),通過換液和傳代,使人羊膜間充質(zhì)干細胞逐漸得到擴增和純化。本發(fā)明方法具有來源廣泛,不受倫理限制等優(yōu)越性,具有廣闊的應用前景,本發(fā)明的醫(yī)用組合物可用于神經(jīng)替代治療、用于心肌梗塞的治療、用于糖尿病的治療、用于骨組織工程、應用于整形外科等。  
國際公布  
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