| 公開(公告)號 | CN1232644C |
| 公開(公告)日 | 2005.12.21 |
| 申請(專利)號 | CN98127178.2 |
| 申請日期 | 1998.12.01 |
| 專利名稱 | 細胞內生基因活性化的優(yōu)化方法 |
| 主分類號 | C12N15/63 |
| 分類號 | C12N15/63;C12N15/65;C12N15/79;C12N15/85;C12N5/22 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | 1997.12.1 EP 97121075.2 |
| 申請(專利權)人 | 羅切診斷學有限公司 |
| 發(fā)明(設計)人 | K·豪諾德;T·浩特史克;A·斯特恩 |
| 地址 | 聯(lián)邦德國曼海姆--沃爾德霍夫 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構 | 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所 |
| 代理人 | 黃澤雄 |
| 國省代碼 | 德國;DE |
| 主權項 | 改變內生于真核細胞中的核酸序列表達的方法，其特征是，(a)將載體轉入該細胞，其中包括(i)至少一種選自異源表達控制序列與擴增標記基因的序列，(ii)一個正的選擇標記基因，(iii)用于部位特異重組酶的，至少兩個位于序列(i)與序列(ii)兩側的目標序列，(iv)在序列(i)、(ii)與(iii)兩側的DNA序列，它們與細胞基因組中的核酸片段同源，以便可形成同源的重組，(b)在一定條件下培養(yǎng)該被轉入的細胞，在該條件下可形成載體的同源重組，(c)獲得根據(jù)步驟(b)制得的細胞。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及細胞內生基因表達的優(yōu)化方法。首先，涉及一種改變內生存在于真核細胞中的目標基因的表達的方法，其中，借助于同源重組作用，把一種異源表達控制序列引入到細胞的基因組中，而且該方法中還包括使插入的外來DNA的、部位特異重組酶介導的切除，以及用其他的異源表達控制序列或/和擴增標記基因代替之；本發(fā)明還涉及把一個或多個在其上結合存在一個激活因子蛋白質或一個激活蛋白質復合物例如一個缺氧誘導因子(HIF)上的核酸序列通過同源重組引入到一個真核細胞的基因組內，以便改變目標基因的表達。本發(fā)明還涉及一個通過對報道基因表達的確定，測定在5’部位或3’部位上未編碼的核酸片段對目標基因表達的影響的方法。此外，本發(fā)明還涉及一種含有重組酶-目標序列的、DHFR-負真核細胞的制備方法，以及插入在該重組酶-目標序列中的核酸序列的表達。 |
| 國際公布 |
