減毒水痘-帶狀皰診病毒在制備用于預(yù)防水痘的藥物中的應(yīng)用
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公開(公告)號(hào)
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CN1227031C
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公開(公告)日
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2005.11.16
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN00133104.3
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申請(qǐng)日期
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1993.06.03
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專利名稱
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減毒水痘-帶狀皰診病毒在制備用于預(yù)防水痘的藥物中的應(yīng)用
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主分類號(hào)
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A61K39/25
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分類號(hào)
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A61K39/25;C12N7/00
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
93106673.5
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優(yōu)先權(quán)
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1992.6.4 US 893295;1992.6.4 US 894039
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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麥克公司
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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P·J·普羅沃斯特;D·L·克拉;P·A·弗里曼
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地址
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美國新澤西州
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頒證日
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國際申請(qǐng)
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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中國專利代理(香港)有限公司
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代理人
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譚明勝
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國省代碼
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美國;US
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主權(quán)項(xiàng)
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減毒水痘-帶狀皰疹病毒在制備用于預(yù)防水痘的藥物中的應(yīng)用，其中水痘-帶狀皰疹病毒縮寫為VZV，所述減毒病毒是用如下方法制備的：a.培養(yǎng)選自人二倍體細(xì)胞的VZV易感染細(xì)胞，使之匯合成單層培養(yǎng)物，并供給不能脂代謝的二糖；b.在接近匯合點(diǎn)時(shí)，感染步驟a培養(yǎng)的細(xì)胞，得到高感染復(fù)數(shù)的VZV感染細(xì)胞；c.將VZV感染培養(yǎng)物在高營養(yǎng)狀態(tài)下維持22-96小時(shí)，并在感染性VZV產(chǎn)量達(dá)到峰值時(shí)收集；d.在收集VZV感染細(xì)胞前，用含有或不含有溶酶體營養(yǎng)劑的生理溶液洗滌VZV感染培養(yǎng)物；e.將VZV感染細(xì)胞收集到穩(wěn)定溶液中，并且或者立即破碎細(xì)胞，或者冷凍這些細(xì)胞供以后破碎；f.破碎VZV感染細(xì)胞以釋放細(xì)胞結(jié)合的VZV，并除去細(xì)胞碎片，以提供無細(xì)胞VZV制備物；其中VZV易感染細(xì)胞是MRC-5細(xì)胞，減毒VZV是水痘-帶狀皰疹病毒的Oka株，培養(yǎng)溫度是在30-37℃之間，二糖是以20-60mM提供的蔗糖，感染復(fù)數(shù)是1∶25和1∶625之間，溶酶體營養(yǎng)劑是以20-50mM提供的氯化銨或以230μM提供的氯喹。
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摘要
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以較高的VZV產(chǎn)量制備活的減毒水痘-帶狀皰疹病毒疫苗。該新方法使活VZV疫苗的大量制備更為實(shí)用。另外，最佳單層細(xì)胞培養(yǎng)條件提供了一種提高單層細(xì)胞密度的方法，該方法可用于提高病毒疫苗的產(chǎn)量。根據(jù)該方法，在常規(guī)培養(yǎng)容器中通常獲得接近500，000個(gè)細(xì)胞/cm2的細(xì)胞密度。
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國際公布
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評(píng)論加載中...
