公開(公告)號
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CN1196780C
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公開(公告)日
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2005.04.13
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申請(專利)號
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CN99806717.2
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申請日期
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1999.06.03
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專利名稱
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RNA病毒拯救的方法
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主分類號
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C12N7/02
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分類號
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C12N7/02;C12N7/04;C12N15/86;C07K14/145
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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1998.6.3 US 60/087,800
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申請(專利權(quán))人
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惠氏控股有限公司
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發(fā)明(設(shè)計)人
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C·L·帕克斯;M·S·西迪
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地址
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美國新澤西州
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頒證日
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國際申請
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PCT/US1999/012292 1999.6.3
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進(jìn)入國家日期
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2000.11.27
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專利代理機構(gòu)
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上海專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司
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代理人
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徐迅
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國省代碼
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美國;US
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主權(quán)項
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一種產(chǎn)生重組單鏈負(fù)義病毒目病毒的方法,其特征在于,該方法包含:(a)在至少一個宿主細(xì)胞中,進(jìn)行拯救組合物的轉(zhuǎn)染,該組合物中包含(i)一個含有分離的核酸分子的轉(zhuǎn)錄載體,該核酸分子中含有編碼單鏈負(fù)義病毒目的無節(jié)段、負(fù)義單鏈RNA病毒基因組或反基因組的多核苷酸序列,和(ii)至少一個表達(dá)載體,該表達(dá)載體含有編碼衣殼包裝、轉(zhuǎn)錄和復(fù)制所必需的反式作用蛋白的一種以上分離的核酸分子;(b)在能充分增加重組病毒挽救的條件下,加熱轉(zhuǎn)染的拯救組合物至有效熱休克溫度。
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摘要
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本發(fā)明涉及產(chǎn)生命名為單鏈負(fù)義RNA病毒目(Mononegaviral)的無節(jié)段、負(fù)義、單鏈RNA病毒的改良方法,包括關(guān)于產(chǎn)生減毒和/或傳染病毒的這些病毒,如麻疹病毒(MV)和呼吸道合胞病毒(RSV)的方法的實施例。用于產(chǎn)生單鏈負(fù)義病毒目的重組病毒的一種方法包含(a)在至少一個宿主細(xì)胞中,進(jìn)行拯救組合物的轉(zhuǎn)染,該組合物中包含在能充分允許載體共表達(dá)和產(chǎn)生重組病毒條件下的宿主細(xì)胞中;(i)一個含有分離的核酸分子的轉(zhuǎn)錄載體,該核酸分子中含有編碼單鏈負(fù)義病毒目的無節(jié)段、負(fù)義單鏈RNA病毒基因組或反基因組的多核苷酸序列,和(ii)至少一個表達(dá)載體,該表達(dá)載體含有編碼衣殼包裝、轉(zhuǎn)錄和復(fù)制所必需的反式作用蛋白的一種以上的分離的核酸分子;(b)在能充分增加重組病毒挽救的條件下,加熱轉(zhuǎn)染的拯救組合物至有效熱休克溫度;和可任選的,(c)收集得到的重組病毒。
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國際公布
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WO1999/063064 英 1999.12.9
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