公開(公告)號 | CN1179975C |
公開(公告)日 | 2004.12.15 |
申請(專利)號 | CN02115487.2 |
申請日期 | 2002.01.30 |
專利名稱 | 蝎抗心律失常肽及其制備方法和應(yīng)用 |
主分類號 | C07K14/435 |
分類號 | C07K14/435;C12P21/02;A61K38/17;A61P9/06 |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權(quán) | |
申請(專利權(quán))人 | 武漢大學(xué) |
發(fā)明(設(shè)計)人 | 李文鑫;彭方;曾憲春;何小華 |
地址 | 430072 湖北省武漢市武昌珞珈山 |
頒證日 | |
國際申請 | |
進(jìn)入國家日期 | |
專利代理機構(gòu) | 武漢宇晨專利事務(wù)所 |
代理人 | 王敏鋒 |
國省代碼 | 湖北;42 |
主權(quán)項 | 一種蝎抗心律失常肽,其特征是,該活性肽的氨基酸序列如下:DGYIRGSNGCLWGNEGCNKECKGFGYCWTWGLACWCEGLTWKSESNTCG。 |
摘要 | 本發(fā)明公開了一種蝎抗心律失常肽及其制備方法和應(yīng)用,該活性肽的氨基酸序列為GYIRGSNGCLWGNEGCNKECKGFGYCWTWGLACWCEGLTWKSESNTCG。制備蝎抗心律失常肽包括設(shè)計PCR引物,用PCR從東亞鉗蝎蝎毒cDNA庫中擴增抗心律失常肽基因片段,并通過表達(dá)載體轉(zhuǎn)化到大腸桿菌中表達(dá),其特征是:設(shè)計的PCR上游引物含小腸激酶酶切位點,用PCR擴增的抗心律失常肽基因片段經(jīng)過限制性內(nèi)切酶酶切,克隆到pGEX-5x-1表達(dá)載體中,轉(zhuǎn)化到大腸桿菌BL21中獲得重組大腸桿菌BL21(pGEX/BmKIM),經(jīng)IPTG誘導(dǎo)后,經(jīng)谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶親和層析柱純化,用小腸激酶酶切表達(dá)所得的融合蛋白,并脫鹽而得到可溶的抗心律失常肽。本發(fā)明具有高效抗心律失;钚,所得到的重組肽是可溶性的,而且產(chǎn)量高,可在制備抗心律失常肽藥中廣泛應(yīng)用。 |
國際公布 |