公開(kāi)(公告)號(hào)
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CN1552880A
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公開(kāi)(公告)日
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2004.12.08
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申請(qǐng)(專(zhuān)利)號(hào)
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CN03126760.2
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申請(qǐng)日期
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2003.06.05
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專(zhuān)利名稱(chēng)
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以腫瘤CHK1為藥靶抗癌重組腺病毒的構(gòu)建方案及用途
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主分類(lèi)號(hào)
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C12N15/861
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分類(lèi)號(hào)
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C12N15/861;C12N7/01;A61K48/00;A61P35/00;//(C12N15/861,C12R1∶92)
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人
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深圳市奧尼克斯基因技術(shù)有限公司
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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周劍峰;馬 丁;盧運(yùn)萍;王世宣;陳 剛;高慶蕾
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地址
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518057廣東省深圳市高新區(qū)南區(qū)R3棟B座710室
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專(zhuān)利代理機(jī)構(gòu)
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代理人
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國(guó)省代碼
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廣東;44
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主權(quán)項(xiàng)
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一組重組腺病毒構(gòu)建體,其命名及技術(shù)特征在于:該構(gòu)建體命名為Δ923-946ADV5/ASCHK1,它缺失了ADV5923-946nt序列CTTACCTGCCACGAGGCTGGCTTT,該序列編碼E1A蛋白122至129位氨基酸,同時(shí),它缺失了ADV5E3區(qū)28532-29360nt,在該缺失區(qū)域引入一個(gè)ClaI酶切位點(diǎn),在ClaI酶切位點(diǎn)中反向插入相當(dāng)于CHK1mRNA853-250nt的外源性CHK1cDNA片段,其他基因組結(jié)構(gòu)與野生型ADV5完全相同。
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摘要
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本發(fā)明公開(kāi)了一種人工改造人類(lèi)5型腺病毒(ADV5)的構(gòu)建方案,以及用該方案獲取的重組腺病毒構(gòu)建體在腫瘤治療中的具體用途。用PCR擴(kuò)增定點(diǎn)缺失、同源重組、轉(zhuǎn)染、腺病毒單克隆純化等技術(shù),獲得一種重組腺病毒構(gòu)建體,其特征在于:ADV5基因組E1A保守序列2(CR2)編碼序列24個(gè)堿基缺失;ADV5 E3區(qū)28532-29360 nt缺失;并在該區(qū)域反向插入部分CHK1 cDNA片段。該重組腺病毒構(gòu)建體能選擇性地在腫瘤細(xì)胞內(nèi)復(fù)制增殖;插入的反義CHK1 cDNA片段在腫瘤細(xì)胞內(nèi)特異性表達(dá);對(duì)腫瘤細(xì)胞具有強(qiáng)效旁觀者效應(yīng)。從而特異性殺滅腫瘤細(xì)胞,同時(shí)對(duì)正常細(xì)胞無(wú)殺滅效應(yīng)。該構(gòu)建體在腫瘤治療藥物、診斷試劑的制備中具有獨(dú)特的實(shí)用價(jià)值,同時(shí)也為腫瘤基因治療提供了理想的基因靶點(diǎn)特異性治療應(yīng)用途徑。
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國(guó)際公布
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